RESUMO
Comprehending the immune defense mechanisms of new aquaculture species, such as the Chilean meagre (Cilus gilberti), is essential for sustaining large-scale production. Two bioassays were conducted to assess the impact of acute and intermittent hypoxia on the antibacterial activity of juvenile Chilean meagre epidermal mucus against the potential pathogens Vibrio anguillarum and Vibrio ordalii. Lysozyme and peroxidase activities were also measured. In general, fish exposed to hypoxia showed a 9-30% reduction in mucus antibacterial activity at the end of hypoxic periods and after stimulation with lipopolysaccharide. However, following water reoxygenation, the activity of non-stimulated fish was comparable to that of fish in normoxic conditions, inhibiting bacterial growth by 35-52%. In the case of fish exposed to chronic hypoxia, the response against V. anguillarum increased by an additional 19.8% after 6 days of control inoculation. Lysozyme exhibited a similar pattern, while no modulation of peroxidase activity was detected post-hypoxia. These results highlight the resilience of C. gilberti to dissolved oxygen fluctuations and contribute to understanding the potential of mucus in maintaining the health of cultured fish and the development of future control strategies.
RESUMO
Antimicrobial peptides (AMP) play an essential role in the innate immune system, modulating the defense response. In a previous study, we demonstrated the antimicrobial activity of synthetic hepcidin (hep20) from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss), and its protective effect in European sea bass (Dicentrarchus labrax) challenged with Vibrio anguillarum. Additionally, we described the uptake and distribution of hep20 in different tissues and leukocyte cells. Interestingly, various AMPs characterized in high vertebrates, called host defense peptides (HDPs), also possess immunomodulation activity. For that reason, the present study explores the immunomodulatory abilities of hep20 through in vitro and in vivo studies. First, a monocyte/macrophage RTS-11 cell line from rainbow trout was used to evaluate hep20 effects on pro- and anti-inflammatory cytokines in fish leukocyte cells. Next, the European sea bass juveniles were used to determine if hep20 can regulate the expression of cytokines in fish immune tissues. The results show that hep20 was uptake inner to RTS-11 cells and was able to induce the expression of IL-10, IL-1ß, and TNFα at transcriptional and protein levels. Then, the European sea bass juveniles were given intraperitoneal injections of the peptide. At 1, 3, 7, 14, and 21 days post-injection (dpi), IL-10, IL -1ß, and TNFα mRNA were quantified in the anterior gut, spleen, and head kidney. The hep20 was able to up-regulate cytokine gene expression in these tissues, mainly in the head kidney. Furthermore, the evaluated cytokines showed a cyclical tendency of higher to lesser expression. Finally, a bioinformatics analysis showed that the structure adopted by hep20 is similar to the γ-core domain described for cysteine-stabilized AMP, defined as immunomodulatory and antimicrobial, which could explain the ability of hep20 to regulate the cytokine expression. This study provides new insights into immunomodulatory function complementary to the previously established antimicrobial activity of hep20, suggesting a role as an HDP in teleost fish. These facts are likely to be associated with molecular functions underpinning the protective effect of fish hepcidin against pathogens.
RESUMO
Un importante reto para los cirujanos pediatras es el estreñimiento en la población infantil, que se presenta en cerca del 25% de los pacientes, sin que en la mayoría de los casos -hasta un 90%- no se especifique su causa orgánica. Este trabajo se realizó para mostrar, dentro del manejo de pacientes pediátricos con estreñimiento crónico idiopático, la viabilidad de replicar el método gammagráfico, un examen ampliamente divulgado en la literatura, para simplificar el que se ha descrito para tránsito intestinal y para justificar su uso en la orientación de un tratamiento efectivo para esta patología. El estudio mostró que el tránsito intestinal por gammagrafía es un método viable y preciso para la evaluación de pacientes con diagnóstico de estreñimiento crónico idiopático y que sus ventajas sobre otros estudios de tránsito intestinal con marcadores radio-opacos son muy evidentes, al tratarse de un método bien tolerado, no invasor y con mínima exposición radioactiva...
It is estimated that constipation is a common problem in children, accounting on the average as much as 25% of pediatric consultations. It has become a true challenge for the pediatric surgeon because no specific organic cause can be found in approximately 90% of the cases. Our study had two main objectives. First, to demonstrate the ability to replicate the method widely described in the literature and to simplify the gammagraphic exam described for the assessment of pediatric patients with chronic idiopathic constipation, and also to justify its use and value to provide enough information for the effective treatment of this pathology. This paper demonstrates that the gammagraphic colonic transit time is a viable and precise method for assessment of patients with chronic idiopathic constipation. The advantages of gammagraphic studies against other types, which use radio-opaque markers, are evident. It is a well-tolerated method, non-invasive and furthermore provides minimal radioactive exposure...
Um grande desafio para os cirurgiões pediátricos é a constipação em crianças, que acontece ao redor de um 25% dos doentes, e na maioria dos casos, - até um 90% - não se consiga especificar a causa orgânica. Este trabalho foi feito para mostrar, no manejo de pacientes pediátricos com constipação crônica idiopática, a viabilidade de replicar o método de cintilo grafia, um teste amplamente relatado na literatura, para simplificar o descrito para o trânsito intestinal e para justificar seu uso na orientação de um tratamento eficaz para esta condição. O estudo mostrou que a cintilografia de trânsito intestinal é um método viável e preciso para a avaliação de pacientes com constipação crônica idiopática e sua vantagem em relação a outros estudos de trânsito intestinal com marcadores radia - opacos são muito evidentes, sendo um método bem tolerado, não-invasivo e com a exposição à radiação mínima...
Assuntos
Criança , Constipação Intestinal , Trânsito Gastrointestinal , Doença de HirschsprungRESUMO
Se preparó un conjugado para la determinación de anticuerpos contra el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B por inmunoensayo enzimático tipo sandwich de doble Ag. Se utilizó la peroxidasa, el antígeno de la vacuna cubana contra la hepatitis B y el método de conjugación del periodato. Se evaluó la actividad enzimática, la actividad inmunológica y la actividad específica del conjugado. La enzima y el antígeno conservaron su actividad luego de la conjugación y se escogió la dilución óptima de trabajo 1/200. Se concluyó que el conjugado obtenido presentaba adecuada especificidad, detectabilidad y reactividad, y podía considerarse apto para su utilización.
A conjugate was prepared for the determination of antibodies against the surface antigen of hepatitis B virus by double Ag sandwich ELISA. Peroxidase, the antigen of the Cuban vaccine against hepatitis B, and the periodate-conjugation method were used. The enzymatic activity, the immunological activity and the specific conjugate activity were evaluated. The enzyme and the antigen conserved their activity after conjugation, and the optimal working dilution 1/200 was selected. It was concluded that the conjugate obtained had an adequate specificity, detectability and reactivity, and could be considered apt for its use.
Assuntos
Humanos , Antígenos de Superfície , Anticorpos Anti-Hepatite B , Técnicas ImunoenzimáticasRESUMO
Se propuso el empleo de la determinación de la actividad enzimática sin mediación de la interacción antígeno-anticuerpo, como procedimiento analítico inicial en la evaluación de conjugados inmunoenzimáticos. Los conjugados empleados en los métodos inmunoenzimáticos deben ser evaluados una vez obtenidos y cada cierto tiempo. Como en estos procedimientos la señal que se obtiene depende del producto enzimático formado, sería ventajoso iniciar la evaluación determinando la actividad de la enzima independientemente de la del producto como conjugado. Se sugirió un método basado en la adición del conjugado de manera directa al soporte empleado para el inmunoensayo enzimático y seguidamente el sustrato de la enzima. Se incluyó la forma de interpretar los resultados y se concluyó que este es un proceder sencillo, que pudiera tener un papel rector en la evaluación de estos reactivos
Assuntos
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Enzimas , Técnicas ImunoenzimáticasRESUMO
Se presenta un estudio experimental que tiene por objetivo evaluar la sensibilidad y especificidad de la detección de solución de continuidad del tracto gastrointestinal con la utilización de partículas pesadas marcadas con Tecnecio 99. Se diseñó un estudio experimental prospectivo triple ciego, con un cálculo de tamaño de muestra teniendo en cuenta una sensibilidad y especificidad superiores al 95 por ciento, con un error alfa del 0.05 y una precisión de 0.05. Inicialmente se evaluaron 4 conejos de la raza Nueva Zelanda para determinar: el anestésico y la dosis a utilizar, la capacidad del estómago en mililitros; los tiempos promedios de tránsito gastrointestinal, la capacidad de la cavidad abdominal en mililitros y la biodistribución del radiofármaco (absorción gastrointestinal, diseminación y distribución hemática y eliminación renal). Se utilizaron 40 conejos de la raza Nueva Zelanda y se analizaron en tres estaciones de trabajo independientes, asignando aleatoriamente 20 conejos en cada grupo de estudio (perforados y no perforados). El radiofármaco utilizado fue Tecnecio 99 sulfuro coloidal > 100 nm, 2.5 mCi a 140 Kev de energía preparado en una dilución de solución salina al 0.9 por ciento quedando una concentración de 0.0025 mCi por mililitro. El rastreo se realizó con una sonda gamma a 10X. El análisis estadístico se realizó con el programa Episet V:1 aplicando la prueba de Chi Cuadrado.Todos los 20 conejos que tenían disrupción del estómago, presentaron una prueba positiva para detección de radioactividad en el líquido peritoneal analizado con un valor promedio de 467 y un rango de 37 a 1748. En los 20 conejos restantes que no tenían perforación de la pared gástrica la prueba fue negativa.La sensibilidad de la metodología diagnóstica fue de 0.98 y la especificidad de 0.98 con un intervalo...