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INTRODUCTION: Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is a widely used therapy, but its success largely depends on the number and quality of stem cells collected. Current evidence shows the complexity of the hematopoietic system, which implies that, in the quality assurance of the apheresis product, the hematopoietic stem cells are adequately characterized and quantified, in which mass cytometry (MC) can provide its advantages in high-dimensional analysis. OBJECTIVE: This research aimed to characterize and enumerate CD45dim/CD34+ stem cells using the MC in apheresis product yields from patients with chronic lymphoid malignant diseases undergoing autologous transplantation at the Abu Dhabi Stem Cells Center. METHODS: An analytical and cross-sectional study was performed on 31 apheresis products from 15 patients diagnosed with multiple myeloma (n = 9) and non-Hodgkin lymphomas (n = 6) eligible for HSCT. The MC was employed using the MaxPar Kit for stem cell immunophenotyping. The analysis was performed manually in the Kaluza and unsupervised by machine learning in Cytobank Premium. RESULTS: An excellent agreement was found between mass and flow cytometry for the relative and absolute counts of CD45dim/CD34+ cells (Bland-Altman bias: -0.029 and -64, respectively), seven subpopulations were phenotyped and no lineage bias was detected for any of the methods used in the pool of collected cells. A CD34+/CD38+/CD138+ population was seen in the analyses performed on four patients with multiple myeloma. CONCLUSIONS: The MC helps to characterize subpopulations of stem cells in apheresis products. It also allows cell quantification by double platform. Unsupervised analysis allows results completion and validation of the manual strategy. The proposed methodology can be extended to apheresis products for purposes other than HSCT.

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Introduction: Autoimmune hemolytic anemia is a rare disorder characterized by hemolysis mediated by autoantibodies directed against red blood cells. The demonstration of antibody specificity is a very difficult procedure since autoantibodies in general are nonspecific of antigens and react with all erythrocytes analyzed. Occasionally, specificity is observed against the Rh system antigens. Objective: To determinate the specificity of erythrocytes autoantibodies in DAT positive autoimmune hemolytic anemia by MAIEA technique. Methods: The specificity and isotype of erythrocyte autoantibodies were determined in the eluate of 109 blood samples from patients with warm autoimmune hemolytic anemia, by means of the MAIEA technique and the use of monoclonal antibodies that recognized 11 blood group systems and the protein CD47. Results: In 100 percent of cases autoantibodies against Rh system antigens were detected; in 24 cases we detected autoantibodies of IgA and IgM isotypes that recognized different antigens that were recognized by IgG isotype autoantibodies. For idiopathic and secondary warm autoimmune hemolytic anemias, predominance was observed against three or more specificities. IgG was detected in 99.09 percent of the eluates, IgA in 35.77 percent and IgM in 16.51 percent. The high degree of hemolysis was related to the presence of several isotype autoantibodies against four or more blood group specificities. Conclusions: The MAIEA technique is a sensitive method that can be used to determine the specificities and isotypes of autoantibodies in patients with warm autoimmune hemolytic anemia.

Introducción: La anemia hemolítica autoinmune es un trastorno poco común, caracterizado por hemólisis mediada por autoanticuerpos dirigidos contra los glóbulos rojos. La demostración de la especificidad de los anticuerpos es un procedimiento muy difícil, ya que los autoanticuerpos en general no son específicos de los antígenos y reaccionan con todos los eritrocitos analizados. Ocasionalmente, se observa especificidad contra los antígenos del sistema Rh. Objetivo: Determinar la especificidad de los autoanticuerpos eritrocitarios en pacientes con anemias hemolíticas autoinmunes PAD positivas con el empleo de la técnica MAIEA Métodos: Se determinó la especificidad e isotipo de los autoanticuerpos eritrocitarios en el eluido de 109 muestras de sangre de pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente, mediante la técnica de MAIEA y el uso de anticuerpos monoclonales que reconocieron 11 sistemas de grupos sanguíneos y la proteína CD47. Resultados: En el ciento por ciento de los casos se detectaron autoanticuerpos contra los antígenos del sistema Rh. En 24 casos se descubrió autoanticuerpos de isotipos IgA e IgM que reconocieron diferentes antígenos que fueron a su vez reconocidos por autoanticuerpos de isotipo IgG. Se observó para las anemias hemolíticas autoinmunes calientes idiopáticas y secundarias; predominio frente a tres o más especificidades. Se detectó IgG en el 99,09 por ciento de los eluidos, IgA en 35,77 por ciento e IgM en 16,51 por ciento. El alto grado de hemólisis se relacionó con la presencia de varios isotipos de autoanticuerpos contra cuatro o más especificidades de grupos sanguíneos. Conclusiones: La técnica MAIEA es un método sensible que puede usarse para determinar las especificidades e isotipos de autoanticuerpos en pacientes con anemia hemolítica autoinmune caliente.

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Introducción: La trombocitopenia neonatal aloinmune es una enfermedad producida por anticuerpos maternos contra antígenos plaquetarios fetales heredados del padre. Puede ser causa de hemorragia intracraneal y conducir a la muerte o discapacidad en el feto/neonato. Aunque es la causa más grave de trombocitopenia en el neonato y la más común en los recién nacidos a término, en general ha sido poco investigada. Objetivos: Exponer los conocimientos actuales sobre la patogénesis, presentación clínica, diagnóstico y del manejo pre- y posnatal de la trombocitopenia neonatal aloinmune, Métodos: Se realizó una revisión de la literatura, en inglés y español, a través del sitio web PubMed y el motor de búsqueda Google académico de artículos publicados en los últimos 10 años. Se hizo un análisis y resumen de la bibliografía revisada. Resultados: Los anticuerpos IgG maternos son transportados a través de la placenta a la circulación fetal, opsonizan las plaquetas fetales que son removidas por fagocitosis. Los antígenos más implicados son el HPA-1a y HPA-4a. La fisiopatología de la enfermedad es muy similar a la enfermedad hemolítica perinatal, pero aún no se han implementado programas de pesquisa y el diagnóstico se realiza después del nacimiento del niño afectado de trombocitopenia, hemorragia intracraneal o muerte in útero de causa no explicada. Consideraciones finales: El impacto clínico de la trombocitopenia neonatal aloinmune y las oportunidades de tratamiento potencian la necesidad de implantar programas de pesquisa para la detección de fetos en riesgo de padecer esta enfermedad(AU)

Introduction: Neonatal alloimmune thrombocytopenia is a disease produced by maternal antibodies against fetal platelet antigens inherited from the father. It can be a cause of intracranial hemorrhage and lead to death or disability in the fetus / neonate. Although it is the most serious cause of thrombocytopenia in newborns and the most common in full-term infants, it has generally been poorly investigated. Objectives: To approximate to current knowledge about the pathogenesis, clinical presentation, diagnosis and pre- and post-natal management of neonatal alloimmune thrombocytopenia. Methods: A review of literature, in English and Spanish, through PubMed website and Google scholar search engine of articles published in the last 10 years was conducted. An analysis and summary of the reviewed bibliography was made. Results: Maternal IgG antibodies are transported through the placenta to the fetal circulation, opsonizing fetal platelets that are removed by phagocytosis. The most involved antigens are HPA-1a and HPA-4a. The pathophysiology of this disease is very similar to perinatal hemolytic disease, but research programs have not been implemented yet and diagnosis is made after birth of children affected by thrombocytopenia, intracranial hemorrhage or in uterus death by unexplained causes. Final considerations: Clinical impacts of neonatal alloimmune thrombocytopenia and treatment opportunities enhance the need to implement screening programs for the detection of fetuses at risk of suffering from this disease(AU)

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Introducción: Los antígenos plaquetarios humanos (HPA) se expresan en 6 glucoproteínas plaquetarias diferentes. Se ha descrito que estos antígenos pueden estimular la producción de aloanticuerpos una vez expuestos a plaquetas humanas con diferentes HPA, lo que provoca complicaciones clínicas como la trombocitopenia neonatal aloinmune y la púrpura postransfusional. Métodos: Se realizó el estudio a 11 muestras de pacientes en espera de trasplante renal de genotipo de los antígenos HPA-1,2,3 a/b mediante PCR multiplex, mientras que para el estudio de genotipo de los antígenos HPA-5a/b se utilizó la técnica de PCR con secuencia específica de primer. Los productos de ADN amplificados fueron visualizados mediante electroforesis en gel de agarosa y electroforesis capilar. Resultados: El análisis de los fragmentos de ADN amplificados revelaron resultados similares por ambos métodos. Para los antígenos HPA-1,-2, el 63 por ciento de las muestras fueron homocigóticas para el fenotipo (a) mientras que se observó heterocigocidad en todos los casos para el genotipo HPA-3. En el sistema HPA-5, el 54 por ciento fueron homocigóticas para el fenotipo (a) y el 46 por ciento, heterocigóticas. Para el genotipo del HPA-15, el 4 por ciento fueron homocigóticas para el fenotipo (b) mientras que el 96 por ciento resultaron ser heterocigóticas. Conclusiones: Estos resultados muestran similitudes para los genotipos HPA 1, 2,3 a/b, HPA 5a/b y HPA15 a/brespecto a lo planteado en la literatura(AU)

Introduction: Human platelet antigens (HPA) are expressed in 6 different platelet glycoproteins. It has been described that these antigens can stimulate the production of alloantibodies once exposed to human platelets with different HPA, which causes clinical complications such as neonatal alloimmune thrombocytopenia and postransfusional purpura. Methods: The study was performed on 11 samples of patients awaiting kidney transplantation of genotype of the HPA-1,2,3 a/b antigens by multiplex PCR, while for the genotype study of the HPA-5a/b antigens was used the PCR technique with primer-specificsequence. The amplified DNA products were visualized by agarose gel electrophoresis and by capillary electrophoresis. Results: The analysis of DNA fragments amplified by agarose electrophoresis and capillary electrophoresis revealed similar results in both methods. For the HPA-1, -2 antigens, 63 percent of the samples were homozygous for phenotype (a) while heterozygosity was observed in all cases for the HPA-3 genotype. In the HPA-5 system, 54 percent were homozygous for the phenotype (a) and 46 percent were heterozygous. For the genotype of HPA-15, 4 percent were homozygous for phenotype (b) while 96 percent proved heterozygous. Conclusions: These results show similarities for the genotypes HPA 1, 2.3 a/b, HPA 5a/b and HPA15 a/bwith respect to report in literature(AU)

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Introducción: Los antígenos específicos de plaquetas, conocidos como antígenos de plaquetas humanas (HPA, del inglés human platelet antigens), se incluyen dentro del espectro de antígenos de histocompatibilidad no-HLA, debido a que los anticuerpos anti-HPA participan en el rechazo del trasplante, además de ser causa del fenómeno de refractariedad plaquetaria. Objetivo: Caracterizar los anticuerpos contra antígenos específicos de plaquetas en pacientes cubanos en espera de trasplante renal. Métodos: Se investigaron muestras de sangre de 901 pacientes mediante la técnica de inmovilización de antígenos plaquetarios con anticuerpos monoclonales. Resultados: En 78 pacientes se detectaron anticuerpos anti-HPA, que en el 87,17 por ciento reconocían los antígenos presentes en el complejo GP-IIb/IIIa. Estos anticuerpos fueron del tipo IgG en el 78,2 por ciento, IgA en el 11,53 por ciento e IgM en el 46,15 por ciento. Conclusiones: En pacientes cubanos en espera de trasplante renal son frecuentes los Ac anti-HPA, en su mayoría del tipo IgG dirigidos contra antígenos presentes en el complejo GP-IIb/IIIa(AU)

Introduction: Platelet-specific antigens, known as human platelet antigens (HPA), are included within the spectrum of non-HLA histocompatibility antigens, because HPA antibodies participate in the rejection of transplantation, besides being a cause of the phenomenon of platelet refractoriness. Objective: To characterize antibodies against platelet-specific antigens in Cuban patients awaiting kidney transplantation. Methods: The technique monoclonal antibodies immobilized platelets antigens was applied to blood samples from 901 patients. Results: HPA antibodies were detected in 78 patients, which in 87.17 percent recognized the antigens present in the GP-IIb / IIIa complex. These antibodies were in 78.2 percent of the IgG class, in 11.53 percent IgA and IgM in 46.15 percent. Conclusions: HPA antibodies, mostly of the IgG class and directed to antigens present in the GP-IIb/IIIa complex, are common in Cuban patients awaiting kidney transplantation(AU)

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Introducción: el gen de fusión RUNX1-RUNX1T codifica para una proteína quimérica con múltiples efectos en la proliferación, diferenciación y viabilidad de las células leucémicas. Objetivo: describir el comportamiento del RUNX1-RUNX1T1 en pacientes cubanos con dicha enfermedad. Método: Para ello se estudió el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 en 251 pacientes con leucemia mieloide aguda, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, en el Instituto de Hematología e Inmunología de La Habana, entre los años 2000 y 2016. Resultados: El 20,3 por ciento (51 pacientes) fue positivo para el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1, con una edad comprendida entre los 11 meses y los 80 años, media de 26 años. En los pacientes pediátricos la frecuencia del transcrito fue casi el doble de la de los adultos (29,2 por ciento y 15,3 por ciento, respectivamente) (p= 0,009). Mayor cantidad de pacientes masculinos presentaron el gen quimérico. En menores de 25 años hubo una mayor frecuencia del transcrito (p=0,019) con predominio significativo de la mutación en los adolescentes (p=0,027). Cinco pacientes fueron positivos al RUNX1-RUNX1T1 y a la duplicación interna en tándem del gen FLT3 (12,2 por ciento). Ningún paciente positivo al RUNX1-RUNX1T1 presentó el gen de fusión CBFB-MYH11. La mayor asociación estuvo con la mutación A del gen NPM1 para un 25 por ciento. El debut de la enfermedad se caracterizó por anemia moderada (p= 0,024), trombocitopenia severa (p= 0,004) y gran infiltración medular. La mayor discrepancia entre diagnósticos se concentró entre las variantes morfológicas M2 y M3 (p= 0,000). Conclusiones: En pacientes cubanos la leucemia mieloide aguda con gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 positivo, tiene un comportamiento similar a lo descrito internacionalmente con algunas particularidadesen las características hematológicas de presentación de la enfermedad. El estudio molecular es imprescindible para definir el diagnóstico, y la estrategia terapéutica en estos pacientes(AU)

Introduction: The RUNX1-RUNX1T fusion gene codes for a chimeric protein with multiple effects on the proliferation, differentiation and viability of leukemic cells. Objective: To describe the behavior of RUNX1-RUNX1T1 in Cuban patients with this disease. Method: The RUNX1-RUNX1T1 fusion gene was studied in 251 patients with acute myeloid leukemia, through the polymerase chain reaction, at the Institute of Hematology and Immunology of Havana, between 2000 and 2016. Results: The 20.3 percent (51 patients) were positive for the RUNX1-RUNX1T1 fusion gene, with an age between 11 months and 80 years, average of 26 years.In pediatric patients, the transcript frequency was almost twice that of adults (29.2 percent and 15.3 percent , respectively) (p= 0.009). More male patients presented the chimeric gene. There was a higher frequency of the transcript in children under 25 years of age (p= 0.019) with a significant predominance of the mutation in adolescents (p= 0.027).Five patients were positive for RUNX1-RUNX1T1 and for internal tandem duplication of the FLT3 gene (12.2 percent ).No patient positive for RUNX1-RUNX1T1 presented the CBFB-MYH11 fusion gene. The greatest association was with the A mutation of the NPM1 gene for 25 percent . The onset of the disease was characterized by moderate anemia (p= 0.024), severe thrombocytopenia (p= 0.004) and extensive bone marrow infiltration. The greatest discrepancy between diagnoses was concentrated between the morphological variants M2 and M3 (p= 0.000). Conclusions: In Cuban patients, acute myeloid leukemia with a positive RUNX1-RUNX1T1 fusion gene has a behavior similar to that described internationally with some peculiarities in the hematological characteristics of the disease presentation.The molecular study is essential to define the diagnosis, and the therapeutic strategy in these patients(AU)

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La donación de sangre es el sustento de los programas que proporcionan la sangre segura para el uso terapéutico, con el fin de preservar la salud y vida humana. Es necesario prestar especial atención a la seguridad y calidad de esta actividad ya que es también un principio ético, cuidar de la salud del que de forma altruista da parte de si para beneficiar a los demás. Aunque la donación es un proceder seguro, en ocasiones pueden presentarse efectos adversos en los donantes, algunos evitables, que pueden repercutir en su salud o afectar el retorno a esta actividad. A inicios de la década de 1990, surgen los programas de hemovigilancia encargados de velar, notificar, investigar y prevenir los efectos adversos de la transfusión y la donación, con el fin de prevenir su recurrencia e incrementar la seguridad y calidad de ambos procederes. Este trabajo realiza una revisión actualizada sobre las reacciones adversas de la donación en el contexto de la hemovigilancia(AU)

Blood donation is the livelihood of all blood programs to provide safe blood transfusion for therapeutic use whit the aim to preserve health and human life. It is necessary to pay attention to the safety and quality of this activity, because is an ethical principle to take care of the health of those who, in an altruist manner, give part of themselves in order to benefit others. Although the donation is a safe procedure, occasionally some side effects in donors may occur, many of them can be avoided, and that could have an echo on the donors' health on effect their return to this activity. At the beginning of the 90ths, decade started the Hemovigilance programs in charge of the vigilance, notification and prevention of transfusion and donation side effects, whit the purpose of preventing its recurrence and increase the safety and quality of both procedures. This work carries out and update revision about of donor's reactions in the Hemovigilance(AU)

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