RESUMO
Endolysins are bacteriophage (or phage)-encoded enzymes that catalyse the peptidoglycan breakdown in the bacterial cell wall. The exogenous action of recombinant phage endolysins against Gram-positive organisms has been extensively studied. However, the outer membrane acts as a physical barrier when considering the use of recombinant endolysins to combat Gram-negative bacteria. This study aimed to evaluate the antimicrobial activity of the SAR-endolysin LysKpV475 against Gram-negative bacteria as single or combined therapies, using an outer membrane permeabilizer (polymyxin B) and a phage, free or immobilized in a pullulan matrix. In the first step, the endolysin LysKpV475 in solution, alone and combined with polymyxin B, was tested in vitro and in vivo against ten Gram-negative bacteria, including highly virulent strains and multidrug-resistant isolates. In the second step, the lyophilized LysKpV475 endolysin was combined with the phage phSE-5 and investigated, free or immobilized in a pullulan matrix, against Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium ATCC 13311. The bacteriostatic action of purified LysKpV475 varied between 8.125 µgâ¯ml-1 against Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, 16.25 µgâ¯ml-1 against S. enterica Typhimurium ATCC 13311, and 32.50 µgâ¯ml-1 against Klebsiella pneumoniae ATCC BAA-2146 and Enterobacter cloacae P2224. LysKpV475 showed bactericidal activity only for P. aeruginosa ATCC 27853 (32.50 µgâ¯ml-1) and P. aeruginosa P2307 (65.00 µgâ¯ml-1) at the tested concentrations. The effect of the LysKpV475 combined with polymyxin B increased against K. pneumoniae ATCC BAA-2146 [fractional inhibitory concentration index (FICI) 0.34; a value lower than 1.0 indicates an additive/combined effect] and S. enterica Typhimurium ATCC 13311 (FICI 0.93). A synergistic effect against S. enterica Typhimurium was also observed when the lyophilized LysKpV475 at â MIC was combined with the phage phSE-5 (m.o.i. of 100). The lyophilized LysKpV475 immobilized in a pullulan matrix maintained a significant Salmonella reduction of 2 logs after 6 h of treatment. These results demonstrate the potential of SAR-endolysins, alone or in combination with other treatments, in the free form or immobilized in solid matrices, which paves the way for their application in different areas, such as in biocontrol at the food processing stage, biosanitation of food contact surfaces and biopreservation of processed food in active food packing.
Assuntos
Antibacterianos , Endopeptidases , Glucanos , Polimixina B , Fagos de Salmonella , Endopeptidases/farmacologia , Endopeptidases/química , Endopeptidases/metabolismo , Polimixina B/farmacologia , Antibacterianos/farmacologia , Antibacterianos/química , Fagos de Salmonella/genética , Fagos de Salmonella/fisiologia , Fagos de Salmonella/química , Glucanos/química , Glucanos/farmacologia , Animais , Testes de Sensibilidade Microbiana , Bactérias Gram-Negativas/efeitos dos fármacos , Bactérias Gram-Negativas/virologia , Camundongos , Salmonella typhimurium/virologia , Salmonella typhimurium/efeitos dos fármacos , Bacteriófagos/fisiologia , Bacteriófagos/genética , Proteínas Virais/genética , Proteínas Virais/metabolismo , Proteínas Virais/farmacologia , Proteínas Virais/químicaRESUMO
O desmame de pacientes sob ventilação mecânica é uma das etapas críticas da assistência ventilatória em Terapia Intensiva. Existem vários critérios para a retirada de pacientes da prótese respiratória. O objetivo deste estudo foi comparar o tempo de desmame ventilatório entre dois métodos distintos - ventilação mandatória intermitente sincronizada (SIMV) e tubo T - e avaliar a implantação de protocolos de desmame ventilatório no pós-operatório imediato de cirurgia cardíaca. Trata-se de um ensaio clínico pragmático, quantitativo, prospectivo, comparativo, randomizado e de grupo controle, realizado no Centro de TerapiaIntensiva Cardíaca (CTIC) do Hospital Universitário Pedro Ernesto (HUPE). No grupo controle foi empregada como modalidade de desmame a SIMV, e no grupo experimental foi utilizado o tubo-T. Foram considerados dois desfechos como critérios de avaliação: extubação do paciente (sucesso) ou retorno àprótese ventilatória após três tentativas de desmame em cada protocolo (insucesso). A maioria dos pacientesfoi extubada no período de desmame ventilatório em até duas horas. Ressalta-se, entretanto, que 72% dos pacientes do grupo experimental apresentaram menor tempo de desmame (menor que uma hora) em comparação com o grupo controle, que teve apenas 8% dos pacientes desmamados neste mesmo período de tempo. A implantação de condutas padronizadas para o desmame da ventilação mecânica, rotinas parasedação e analgesia, assim como protocolos guiados por profissionais de enfermagem, são medidas efetivaspara abreviar o tempo de ventilação mecânica.
Assuntos
Humanos , Cirurgia Torácica , Desmame do Respirador/estatística & dados numéricos , Desmame do Respirador/normas , Enfermagem Perioperatória , Tubos TorácicosRESUMO
Este estudo, realizado no Centro de Tratamento Intensivo Cardíaco (CTIC) do Hospital Universitário Pedro Ernesto (HUPE), teve como objeto o procedimento do desmame ventilatório realizado por enfermeiras no pós-operatório imediato de cirurgia cardíaca. O objetivo que orienta a pesquisa é descrever e analisar, o atendimento ao cliente do CTIC em processo de desmame ventilatório. A fundam entação teórica vincula-se à literatura pertinente ao cuidado de enfermagem em Unidade de Terapia Intensiva. A metodologia se estruturou no estudo de caso, com abordagem qualitativa, utilizando para a coleta de dados a entrevista semi-estruturada. A análise dos dados deu origem a duas categorias denominadas: Saber/Fazer: o cuidado durante o desmame ventilatório; e Condutas técnicas no processo de cuidar. Os resultados apontam para as condutas de enfermagem baseadas em um conhecimento preexistent e, adquirido ao longo de um a prática e realizado com competência e habilidade, necessitando-se de um instrumento (protocolo) que subsidie legalmente a enfermeira para prestar um a assistência autônoma e embasada em conhecimento científico.