RESUMO
The preservation of animal genetic biodiversity is fundamental to food security. Santa Ines (SI) is an important native Brazilian hair sheep breed that should be preserved by biotechnologies of selection, conservation and multiplication. The molecular biotechnology identify genes of interest that have an impact on the reproductive, productive and health performance, adding value to these animals, while reproduction biotechnologies, especially semen cryopreservation and artificial insemination, are used for multiplication, conservation and dissemination of this germplasm. Activities related to the conservation and adding value to SI should continue to be stimulated otherwise an irretrievable loss of its originality and genetic diversity can happen.(AU)
A preservação da biodiversidade genética dos animais é fundamental para a segurança alimentar. O ovino Santa Inês (SI) é um importante patrimônio genético autóctone brasileiro que deve ser conservado através do uso de biotecnologias para seleção, conservação e multiplicação. As biotecnologias moleculares identificam genes de interesse que têm impacto sobre o desempenho reprodutivo, produtivo e sanitário, agregando valores a estes animais, enquanto que, as biotecnologias da reprodução, em especial a criopreservação do sêmen e inseminação artificial, são utilizadas para a multiplicação, conservação e disseminação deste germoplasma. As atividades relacionadas à conservação e agregação de valores ao ovino SI devem continuar sendo estimuladas sob pena de uma irrecuperável perda da sua originalidade e diversidade genética.(AU)
Assuntos
Animais , Ovinos , Engenharia Genética , Variação Genética , Biodiversidade , Marcadores Genéticos , Técnicas Reprodutivas/veterináriaRESUMO
The preservation of animal genetic biodiversity is fundamental to food security. Santa Ines (SI) is an important native Brazilian hair sheep breed that should be preserved by biotechnologies of selection, conservation and multiplication. The molecular biotechnology identify genes of interest that have an impact on the reproductive, productive and health performance, adding value to these animals, while reproduction biotechnologies, especially semen cryopreservation and artificial insemination, are used for multiplication, conservation and dissemination of this germplasm. Activities related to the conservation and adding value to SI should continue to be stimulated otherwise an irretrievable loss of its originality and genetic diversity can happen.
A preservação da biodiversidade genética dos animais é fundamental para a segurança alimentar. O ovino Santa Inês (SI) é um importante patrimônio genético autóctone brasileiro que deve ser conservado através do uso de biotecnologias para seleção, conservação e multiplicação. As biotecnologias moleculares identificam genes de interesse que têm impacto sobre o desempenho reprodutivo, produtivo e sanitário, agregando valores a estes animais, enquanto que, as biotecnologias da reprodução, em especial a criopreservação do sêmen e inseminação artificial, são utilizadas para a multiplicação, conservação e disseminação deste germoplasma. As atividades relacionadas à conservação e agregação de valores ao ovino SI devem continuar sendo estimuladas sob pena de uma irrecuperável perda da sua originalidade e diversidade genética.
Assuntos
Animais , Biodiversidade , Engenharia Genética , Ovinos , Variação Genética , Marcadores Genéticos , Técnicas Reprodutivas/veterináriaRESUMO
Rabies is a contagious, neurotropic zoonosis associated with abandoned street dogs and low immunity. The disease has a reduced laboratory diagnosis rate because it is difficult to gather and transport sample material (brain). Based on this challenge, we studied the cervical medulla (CNS) as the pathway of de Rabies virus from the body to the brain. The cervical medulla was an ideal candidate for our study because its anatomy and location make it an easy material to gather. Our objective was to analyse the use of cervical medulla in the laboratory diagnosis of Rabies. Rabies viruses were intramuscularly inoculated into five Rattus species. After death, the brain and cervical medulla of each animal were intra-cerebrally macerated and inoculated. 100% positive for Rabies using the direct immunofluorescence (DIF) test and intracerebral inoculation. Overall, there was agreement between the analyses of the brains and the cervical medullas. Therefore, we propose the use of cervical medulla as a material for the laboratory diagnosis of Rabies.
Assuntos
Técnicas de Laboratório Clínico , Raiva , Raiva/diagnósticoRESUMO
O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito citotóxico das drogas antivirais em cultivos de fibroblastos que foram isolados por explantation da membrana sinovial de caprinos soronegativos para a presença de anticorpos para lentivírus de pequenos ruminantes. As células eram mantidas em cultivo, para posterior utilização nos testes de citotoxicidade, contendo Meio Essencial Mínimo (MEM) acrescido de SFB 10%, antifúngico, antibióticos e glutamina. Para o teste de citotoxicidade das drogas, alíquotas de 0,1mL de fibroblastos, na concentração de 2 x105 células/mL, foram depositadas em microplacas de 96 poços, incubadas por 24 e 48h com posterior troca do meio por outro contendo diluições de 0,005 μM, 0,05 μM, 0,5 μM, 5μM, 50 μM e 500 μM de cada droga, que foram: zidovudina (AZT), estavudina, lamivudina, didanosina, efavirenz, atazanavir e lopinavir. Após 24 h de incubação o meio foi desprezado e acrescentou-se 100 μL de azul de tetrazólio (MTT) a uma concentração de 5 mg/mL. As microplacas foram incubadas por 4 h/37oC. Posteriormente, adicionou-se 100 μL de uma solução de 95% de isopropanol e 5% de ácido fórmico. A análise espectrofotométrica foi medida em um leitor de ELISA a uma absorbância de 600 nm. A partir dos valores das densidades ópticas determinou-se a concentração da droga capaz de reduzir em 50% as células viáveis. Dessa forma, a zidovudina e a didanosina na concentração de 0,05 μM e a estavudina e a lamivudina nas concentrações de 0,5 μM e 500 μM, respectivamente, não apresentaram efeitos tóxicos. Concluindo-se que essas drogas mostram potencial para o desenvolvimento de testes capazes de mensurar sua atividade antiviral frente aos lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV small ruminant lentivirus).(AU)
This work evaluates the cytotoxic effect of antiviral drugs on cultured fibroblasts that were isolated by explantation from the synovial membrane of goats that were soronegative to the presence of lentivirus antibodies from small ruminants. The cells were grown in MEM supplemented with 10% fetal bovine serum, an antifungal, antibiotics and glutamine. The drug cytotoxicity assay was performed in 0.1 mL of fibroblasts with 2x105 cells per mL, cultivated in 96 well microplates, incubated for 24h and submitted to dilutions of 0.005 μM, 0.05 μM, 0.5 μM, 5 μM, 50 μM and 500 μM of each of zidovudine, stavudine, lamivudine, didanosine, efavirenz, atazanavir and lopinavir. After incubation for 24 hours the medium was removed and replaced by 100 μL of MTT solution (5 mg/mL) for 4 h at 37ºC. Then, the MTT solution was removed and 100 μL of a solution of 95% isopropanol and 5% of acid formic was added in order to dissolve the crystals. The absorbance was read on a multiwell spectrophotometer at 600 nm. The optical density values were used to determine the concentration of the drug capable of reducing the viable cells by 50%. Zidovudine and the didanosine at a concentration of 0.05 μM and stavudine and lamivudine at concentrations of 0.5 μM and 500 μM had no toxic effect. Therefore, these drugs have potential to develop tests to measure their antiviral activity against small ruminant lentiviruses.(AU)
Assuntos
Animais , FibroblastosRESUMO
O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito citotóxico das drogas antivirais em cultivos de fibroblastos que foram isolados por explantation da membrana sinovial de caprinos soronegativos para a presença de anticorpos para lentivírus de pequenos ruminantes. As células eram mantidas em cultivo, para posterior utilização nos testes de citotoxicidade, contendo Meio Essencial Mínimo (MEM) acrescido de SFB 10%, antifúngico, antibióticos e glutamina. Para o teste de citotoxicidade das drogas, alíquotas de 0,1mL de fibroblastos, na concentração de 2 x105 células/mL, foram depositadas em microplacas de 96 poços, incubadas por 24 e 48h com posterior troca do meio por outro contendo diluições de 0,005 μM, 0,05 μM, 0,5 μM, 5μM, 50 μM e 500 μM de cada droga, que foram: zidovudina (AZT), estavudina, lamivudina, didanosina, efavirenz, atazanavir e lopinavir. Após 24 h de incubação o meio foi desprezado e acrescentou-se 100 μL de azul de tetrazólio (MTT) a uma concentração de 5 mg/mL. As microplacas foram incubadas por 4 h/37oC. Posteriormente, adicionou-se 100 μL de uma solução de 95% de isopropanol e 5% de ácido fórmico. A análise espectrofotométrica foi medida em um leitor de ELISA a uma absorbância de 600 nm. A partir dos valores das densidades ópticas determinou-se a concentração da droga capaz de reduzir em 50% as células viáveis. Dessa forma, a zidovudina e a didanosina na concentração de 0,05 μM e a estavudina e a lamivudina nas concentrações de 0,5 μM e 500 μM, respectivamente, não apresentaram efeitos tóxicos. Concluindo-se que essas drogas mostram potencial para o desenvolvimento de testes capazes de mensurar sua atividade antiviral frente aos lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV small ruminant lentivirus).
This work evaluates the cytotoxic effect of antiviral drugs on cultured fibroblasts that were isolated by explantation from the synovial membrane of goats that were soronegative to the presence of lentivirus antibodies from small ruminants. The cells were grown in MEM supplemented with 10% fetal bovine serum, an antifungal, antibiotics and glutamine. The drug cytotoxicity assay was performed in 0.1 mL of fibroblasts with 2x105 cells per mL, cultivated in 96 well microplates, incubated for 24h and submitted to dilutions of 0.005 μM, 0.05 μM, 0.5 μM, 5 μM, 50 μM and 500 μM of each of zidovudine, stavudine, lamivudine, didanosine, efavirenz, atazanavir and lopinavir. After incubation for 24 hours the medium was removed and replaced by 100 μL of MTT solution (5 mg/mL) for 4 h at 37ºC. Then, the MTT solution was removed and 100 μL of a solution of 95% isopropanol and 5% of acid formic was added in order to dissolve the crystals. The absorbance was read on a multiwell spectrophotometer at 600 nm. The optical density values were used to determine the concentration of the drug capable of reducing the viable cells by 50%. Zidovudine and the didanosine at a concentration of 0.05 μM and stavudine and lamivudine at concentrations of 0.5 μM and 500 μM had no toxic effect. Therefore, these drugs have potential to develop tests to measure their antiviral activity against small ruminant lentiviruses.