RESUMO
This study evaluated the effects of the synchronization of ovarian follicular wave emergence on the efficiency of in vitro embryo production. Bos indicus cows (n = 20) were divided into two groups (control vs. synchronization) and subjected to repeated ovum pick-up (OPU) sessions (8 replicates each, with an interval of 21 days in a 2 × 2 crossover design) and subsequent in vitro embryo production. Cows in the control group (n = 10) were submitted to OPU procedures without any stimulation every 21 days. Animals in the synchronization group received a protocol-based progesterone implant, estradiol benzoate and prostaglandin on a random day of the estrus cycle (Day 0) and the OPU was performed on Day 5. After in vitro production, embryos were transferred to recipients synchronized at a fixed time and the diagnosis was performed 60 days later. An evaluation of the parameters for each OPU session revealed that donors that received the synchronization protocol pre-OPU showed a greater number of embryos (5.9 ± 0.5 vs. 4.5 ± 0.4; P = 0.037), higher rate of embryo production (45.8% vs. 38.5%; P = 0.001) and higher mean number of conceptions per group (2.2 ± 0.2 vs. 1.6 ± 0.2; P = 0.07) in relation to the group that did not receive hormonal treatment. We concluded that synchronization of the follicular wave prior to OPU showed positive effects on in vitro embryo production as well as on pregnancy rates.
Assuntos
Bovinos , Fertilização in vitro/veterinária , Animais , Estradiol/análogos & derivados , Estradiol/uso terapêutico , Sincronização do Estro , Feminino , Fertilização in vitro/métodos , Recuperação de Oócitos/métodos , Recuperação de Oócitos/veterinária , Folículo Ovariano/efeitos dos fármacos , Folículo Ovariano/crescimento & desenvolvimento , Folículo Ovariano/fisiologia , Gravidez , Taxa de Gravidez , Progesterona/uso terapêutico , Prostaglandinas/uso terapêuticoRESUMO
The present study determined the transcriptome profile in Nelore and Holstein oocytes subjected to heat shock during IVM and the mRNA abundance of selected candidate genes in Nelore and Holstein heat-shocked oocytes and cumulus cells (CC). Holstein and Nelore cows were subjected to in vivo follicle aspiration. Cumulus-oocyte complexes were assigned to control (38.5°C, 22h) or heat shock (41°C for 12h, followed by 38.5°C for 10h) treatment during IVM. Denuded oocytes were subjected to bovine microarray analysis. Transcriptome analysis demonstrated 127, nine and six genes were differentially expressed between breed, temperature and the breed×temperature interaction respectively. Selected differentially expressed genes were evaluated by real-time polymerase chain reaction in oocytes and respective CC. The molecular motor kinesin family member 3A (KIF3A) was upregulated in Holstein oocytes, whereas the pro-apoptotic gene death-associated protein (DAP) and the membrane trafficking gene DENN/MADD domain containing 3 (DENND3) were downregulated in Holstein oocytes. Nelore CC showed increased transcript abundance for tight junction claudin 11 (CLDN11), whereas Holstein CC showed increased transcript abundance for antioxidant metallothionein 1E (MT1E) . Moreover, heat shock downregulated antioxidant MT1E mRNA expression in CC. In conclusion, oocyte transcriptome analysis indicated a strong difference between breeds involving organisation and cell death. In CC, both breed and temperature affected mRNA abundance, involving cellular organisation and oxidative stress.
Assuntos
Proteínas Reguladoras de Apoptose/metabolismo , Células do Cúmulo/metabolismo , Fatores de Troca do Nucleotídeo Guanina/metabolismo , Resposta ao Choque Térmico/genética , Cinesinas/metabolismo , Oócitos/metabolismo , Transcriptoma , Animais , Proteínas Reguladoras de Apoptose/genética , Bovinos , Regulação para Baixo , Feminino , Expressão Gênica , Perfilação da Expressão Gênica , Fatores de Troca do Nucleotídeo Guanina/genética , Temperatura Alta , Cinesinas/genética , Regulação para CimaRESUMO
The Brazilian livestock is based on the use and in the improvement of reproductive biotechnologies. Researches that aims to solve problems such as the distance between laboratories and the large cattle producing farms are necessary. The objective of this study was to evaluate the effectiveness of a culture system during long periods of transportation on bovine embryos produced in vitro. The oocytes obtained from slaughterhouse cows ovaries, passed through in vitro production of embryos procedures such as: maturation, fertilization and embryo culture and subsequently were allocated into the transportation system to compose the treatments: Tcontrol - control embryos kept in the incubator; T48 - embryos removed from the culture medium on the 5th day and transportation simulated for 48 hours; T24 - embryos removed from the culture medium on the 6th day and transportation simulated for 24 hours. After the treatments, the embryos were evaluated for blastocyst on the 7th day and hatching rate on the 9th day. The experimental design was completely randomized. No differences were found (P> 0.05) for blastocyst rate (31, 33 and 35%) and hatching rate (74, 78 and 80%), respectively, for Tcontrol, T48 and T24 treatments. It was concluded that the culture system during transport, up to 48 hours, was efficient when considering the embryonic viability, inferring that the transportation environment simulated atmosphere and temperature conditions of the laboratory in a satisfactory manner
A pecuária brasileira é, em parte, sustentada pela utilização e aperfeiçoamento de biotecnologias da reprodução. Pesquisas que buscam solucionar problemas como a distância existente entre os laboratórios e as grandes fazendas produtoras de gado são necessárias. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia de um sistema de cultivo durante períodos longos de transporte de embriões bovinos produzidos in vitro. Os oócitos, obtidos de ovários de vacas de abatedouro, passaram pelos procedimentos de produção de embriões in vitro, e no quinto dia do cultivo, foram alocados no sistema de transporte para compor os tratamentos: Tcontrole embriões controle mantidos na incubadora; T48 - embriões retirados do meio de cultivo no 5º dia e simulado o transporte por 48 horas; T24 - embriões retirados do meio de cultivo no 6º dia e simulado o transporte por 24 horas. Após os tratamentos, os embriões foram avaliados quanto à taxa de blastocistos no 7º dia e a taxa eclosão no 9º dia. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com três tratamentos e cinco repetições cada. Não foram observadas diferenças (P> 0,05) na taxa de blastocisto (31, 33 e 35%) e na taxa de eclosão (74, 78 e 80%), respectivamente para os tratamentos Tcontrole, T48 e T24. Concluiu-se que o sistema de cultivo durante o transporte, por até 48 horas, foi eficiente quanto à viabilidade embrionária inferindo que o ambiente de transporte simulou as condições de atmosfera e de temperatura do laboratório de forma satisfatória
Assuntos
Animais , Bovinos , Blastômeros/fisiologia , Embrião de Mamíferos/fisiologia , Incubadoras/veterinária , Técnicas In Vitro/veterinária , Técnicas de Maturação in Vitro de Oócitos/veterináriaRESUMO
The Brazilian livestock is based on the use and in the improvement of reproductive biotechnologies. Researches that aims to solve problems such as the distance between laboratories and the large cattle producing farms are necessary. The objective of this study was to evaluate the effectiveness of a culture system during long periods of transportation on bovine embryos produced in vitro. The oocytes obtained from slaughterhouse cows ovaries, passed through in vitro production of embryos procedures such as: maturation, fertilization and embryo culture and subsequently were allocated into the transportation system to compose the treatments: Tcontrol - control embryos kept in the incubator; T48 - embryos removed from the culture medium on the 5th day and transportation simulated for 48 hours; T24 - embryos removed from the culture medium on the 6th day and transportation simulated for 24 hours. After the treatments, the embryos were evaluated for blastocyst on the 7th day and hatching rate on the 9th day. The experimental design was completely randomized. No differences were found (P> 0.05) for blastocyst rate (31, 33 and 35%) and hatching rate (74, 78 and 80%), respectively, for Tcontrol, T48 and T24 treatments. It was concluded that the culture system during transport, up to 48 hours, was efficient when considering the embryonic viability, inferring that the transportation environment simulated atmosphere and temperature conditions of the laboratory in a satisfactory manner(AU)
A pecuária brasileira é, em parte, sustentada pela utilização e aperfeiçoamento de biotecnologias da reprodução. Pesquisas que buscam solucionar problemas como a distância existente entre os laboratórios e as grandes fazendas produtoras de gado são necessárias. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia de um sistema de cultivo durante períodos longos de transporte de embriões bovinos produzidos in vitro. Os oócitos, obtidos de ovários de vacas de abatedouro, passaram pelos procedimentos de produção de embriões in vitro, e no quinto dia do cultivo, foram alocados no sistema de transporte para compor os tratamentos: Tcontrole embriões controle mantidos na incubadora; T48 - embriões retirados do meio de cultivo no 5º dia e simulado o transporte por 48 horas; T24 - embriões retirados do meio de cultivo no 6º dia e simulado o transporte por 24 horas. Após os tratamentos, os embriões foram avaliados quanto à taxa de blastocistos no 7º dia e a taxa eclosão no 9º dia. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com três tratamentos e cinco repetições cada. Não foram observadas diferenças (P> 0,05) na taxa de blastocisto (31, 33 e 35%) e na taxa de eclosão (74, 78 e 80%), respectivamente para os tratamentos Tcontrole, T48 e T24. Concluiu-se que o sistema de cultivo durante o transporte, por até 48 horas, foi eficiente quanto à viabilidade embrionária inferindo que o ambiente de transporte simulou as condições de atmosfera e de temperatura do laboratório de forma satisfatória(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Embrião de Mamíferos/fisiologia , Blastômeros/fisiologia , Técnicas de Maturação in Vitro de Oócitos/veterinária , Técnicas In Vitro/veterinária , Incubadoras/veterináriaRESUMO
Verificou-se a influência da proteína quinase C (PK-C) no reinício e na progressão da meiose em oócitos bovinos, determinando se as células do cumulus são mediadoras da PK-C na regulação da maturação dos oócitos. Complexos cumulus-oócitos (CCO) e oócitos desnudos (OD), distribuídos aleatoriamente em seis tratamentos (T) com base na presença de um ativador da PK-C (PMA) (T1 e T2), de um forbol éster incapaz de ativar a PK-C (4a-PDD-controle) (T3 e T4) ou de apenas o meio básico (TCM-199-controle) (T5 e T6), foram cultivados por 7, 9, 12, 18 e 22 horas. A percentagem de rompimento da vesícula germinativa no grupo cultivado com PMA foi maior do que nos dois grupos controle, com e sem células do cumulus. O cultivo de CCO e OD por 12 e 18 horas demonstrou que a PK-C influencia a progressão para os estádios de metáfase I (MI) e metáfase II (MII) de maneira dependente das células do cumulus. Nos períodos de 9 e 22 horas, não foi possível observar diferença entre os grupos quanto aos diferentes estádios de maturação. A ativação da PK-C acelera o reinício da meiose independentemente das células somáticas e acelera a progressão até os estádios de MI e MII na dependência das células do cumulus.(AU)
The aim of this study was to evaluate the effect of protein kinase C (PK-C) on the meiotic resumption and progression in bovine oocyte, and to determine if the cumulus cells mediate the PK-C action in the regulation of bovine oocyte nuclear maturation. Cumulus-oocyte complexes (COC) and denuded oocytes (DO), randomly allotted to 6 treatments (T) based on the presence of an activator of PK-C (PMA) (T1 and T2), or a phorbol ester unable to activate PK-C (4aPDD-control) (T3 and T4) or a basic culture medium (T5 and T6), were cultivated for 7, 9, 12, 18 and 22 hours. The percentage of germinal vesicle breakdown (GVBD) was higher when the oocytes were cultured with PMA than in the control groups with and without cumulus cells. However, PK-C was dependent of cumulus cells to affect the progression to the stages of metaphase I (MI) and metaphase II (MII) at 12 and 18 hours of culture. At 9 and 22 hours, no difference among groups was detected. PK-C accelerates the meiotic resumption independently of the somatic cells but depends on cumulus cells for the progression to the stages of MI and MII.(AU)
Assuntos
Animais , Ovário , Oócitos , Proteína Quinase C , Células , Meiose , Bovinos , Fator Promotor de MaturaçãoRESUMO
Verificou-se a influência da proteína quinase C (PK-C) no reinício e na progressão da meiose em oócitos bovinos, determinando se as células do cumulus são mediadoras da PK-C na regulação da maturação dos oócitos. Complexos cumulus-oócitos (CCO) e oócitos desnudos (OD), distribuídos aleatoriamente em seis tratamentos (T) com base na presença de um ativador da PK-C (PMA) (T1 e T2), de um forbol éster incapaz de ativar a PK-C (4alfa-PDD-controle) (T3 e T4) ou de apenas o meio básico (TCM-199-controle) (T5 e T6), foram cultivados por 7, 9, 12, 18 e 22 horas. A percentagem de rompimento da vesícula germinativa no grupo cultivado com PMA foi maior do que nos dois grupos controle, com e sem células do cumulus. O cultivo de CCO e OD por 12 e 18 horas demonstrou que a PK-C influencia a progressão para os estádios de metáfase I (MI) e metáfase II (MII) de maneira dependente das células do cumulus. Nos períodos de 9 e 22 horas, não foi possível observar diferença entre os grupos quanto aos diferentes estádios de maturação. A ativação da PK-C acelera o reinício da meiose independentemente das células somáticas e acelera a progressão até os estádios de MI e MII na dependência das células do cumulus.
Assuntos
Animais , Bovinos , Células , Meiose , Oócitos , Ovário , Proteína Quinase C , Fator Promotor de MaturaçãoRESUMO
Observaram-se 549 éguas da raça Puro-Sangue de Corrida paridas durante o segundo semestre, no período de 1º de julho de 1983 a 31 de dezembro de 1994, com a finalidade de se analisar o índice de concepçäo pós-parto, a duraçäo e a fertilidade dos cios pós-parto, os percentuais de produtos nascidos no ano seguinte e relacioná-los com a idade das éguas. Verificou-se que éguas com idade superior a 13 anos apresentaram uma capacidade significativamente menor de conceber e levar a gestaçäo a termo do que éguas mais novas. O 1º cio pós-parto ocorre em média aos 12,3 (ñ10,9) dias pós-parto e, quando apresenta uma duraçäo de 8 a 14 dias, é significativamente mais fértil do que quando tem uma duraçäo fora destes limites. A taxa de prenhez observada no 2º cio pós-parto foi significativamente superior à do 1º cio pós-parto