RESUMO
Canine distemper virus (CDV) is the cause of a severe and highly contagious disease in dogs. Practical diagnosis of canine distemper based on clinical signs and laboratory tests are required to confirm CDV infection. The present study aimed to develop a molecular assay to detect and differentiate field and vaccine CDV strains. Reverse transcription followed by nested real time polymerase chain reaction (RT-nqPCR) was developed, which exhibited analytical specificity (all the samples from healthy dogs and other canine infectious agents were not incorrectly detected) and sensitivity (all replicates of a vaccine strain were positive up to the 3125-fold dilution - 10(0.7) TCID50). RT-nqPCR was validated for CDV detection on different clinical samples (blood, urine, rectal and conjunctival swabs) of 103 animals suspected to have distemper. A total of 53 animals were found to be positive based on RT-nqPCR in at least one clinical sample. Blood resulted in more positive samples (50 out of 53, 94.3%), followed by urine (44/53, 83.0%), rectal (38/53, 71%) and conjunctival (27/53, 50.9%) swabs. A commercial immunochromatography (IC) assay had detected CDV in only 30 conjunctival samples of these positive dogs. Nucleoprotein (NC) gene sequencing of 25 samples demonstrated that 23 of them were closer to other Brazilian field strains and the remaining two to vaccine strains. A single nucleotide sequences difference, which creates an Msp I restriction enzyme digestion, was used to differentiate between field and vaccine CDV strains by restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis. The complete assay was more sensitive than was IC for the detection of CDV. Blood was the more frequently positive specimen and the addition of a restriction enzyme step allowed the differentiation of vaccine and Brazilian field strains.
Assuntos
Vírus da Cinomose Canina/classificação , Vírus da Cinomose Canina/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Polimorfismo de Fragmento de Restrição , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/métodos , Transcrição Reversa , Vacinas Virais/isolamento & purificação , Animais , Brasil , Cinomose/diagnóstico , Cinomose/virologia , Doenças do Cão/diagnóstico , Doenças do Cão/virologia , Cães , Sensibilidade e Especificidade , Medicina Veterinária/métodos , Virologia/métodosRESUMO
No mês de outubro de 2008 foi trazido ao Hospital Veterinário da ULBRA, Canoas/RS, um canino da raça PUG, domiciliado no município de São Borja, Rio Grande do Sul, sem registro de viagens para outras localidades, com exceção da capital do Estado, com histórico de doença prolongada, emagrecimento, lesões de pele e claudicação. Ao exame clínico constatou-se alopecia generalizada com rarefação pilosa e seborreia seca, claudicação com os membros posteriores, ceratoconjuntivite purulenta, magreza pronunciada, linfadenomegalia periférica generalizada e esplenomegalia, entre outras alterações. Foram coletadas urina e sangue para diversos exames laboratoriais, destacando-se o resultado de elevação pronunciada das proteínas plasmáticas to¬tais, com hiperglobulinemia e hipoalbuminemia. Procedeu-se a biópsias de pele, medula óssea e gengiva, onde havia uma proliferação de tecido, que revelaram a presença de Leishmania spp no citoplasma de macrófagos. Uma pesquisa sorológica revelou reatividade para o protozoário em teste de ELISA e RIFI (reação de imunofluorescência indireta). O paciente foi sacrificado e na necropsia evidenciaram-se alterações de linfadenomegalia generalizada e esplenomegalia, entre outras. Posteriormente, o material aspirado da medula óssea e dos tecidos obtidos na necropsia foi submetido ao exame de PCR que confirmou tratar-se da espécie Leishmania (Leishmania) chagasi. No Estado do Rio Grande do Sul até então todos os casos diagnosticados como leishmaniose visceral canina eram de animais provenientes de outros Estados onde a doença é prevalente, sendo esse o primeiro registro de caso autóctone da doença no Estado do Rio Grande do Sul
In October, 2008, a dog of the Pug breed was brought to ULBRA Veterinary Hospital in Canoas Rio Grande do Sul, without any records of travels to other places, with the exception of the capital of the State, with a history of prolonged disease, weight loss, skin lesions and lameness. It was verified at the clinical examination the presence of extensive alopecia with hair coat thinning and dry seborrhea, lameness on the hind limbs, purulent keratoconjuntivitis, severe weight loss, generalized peripheric lymphadenomegaly and splenomegaly, among other features. Blood and urine samples were taken and various laboratory tests were performed, on wich the main alteration was a high level of total plasmatic proteins, with hyperglobulinemia and hypoalbuminemia. Sequentially, a biopsy of skin, bone marrow and a gingival mass was performed, and all samples revealed the presence of Leishmania spp on macrophages cyto¬plasm. A serologic survey was performed and revealed reactivity to the protozoan on ELISA and IFA (Indirect Fluorescent Antibody) tests. The patient was euthanasied and at the necropsy generalized lymphadenomegaly and splenomegaly were evident, among other features. After that, material from the bone marrow aspirate and tissue samples obtained at the necropsy were used on PCR test that confirmed the parasite species as Leishmania (Leishmania) chagasi. Until then all the cases dignosed as canine visceral leishmaniasis in Rio Grande do Sul came from animals that were brought from other States where the disease is prevalent, being this case the first autochthonous record of the disease in Rio Grande do Sul
Assuntos
Animais , Leishmaniose Visceral/veterináriaRESUMO
No mês de outubro de 2008 foi trazido ao Hospital Veterinário da ULBRA, Canoas/RS, um canino da raça PUG, domiciliado no município de São Borja, Rio Grande do Sul, sem registro de viagens para outras localidades, com exceção da capital do Estado, com histórico de doença prolongada, emagrecimento, lesões de pele e claudicação. Ao exame clínico constatou-se alopecia generalizada com rarefação pilosa e seborreia seca, claudicação com os membros posteriores, ceratoconjuntivite purulenta, magreza pronunciada, linfadenomegalia periférica generalizada e esplenomegalia, entre outras alterações. Foram coletadas urina e sangue para diversos exames laboratoriais, destacando-se o resultado de elevação pronunciada das proteínas plasmáticas to¬tais, com hiperglobulinemia e hipoalbuminemia. Procedeu-se a biópsias de pele, medula óssea e gengiva, onde havia uma proliferação de tecido, que revelaram a presença de Leishmania spp no citoplasma de macrófagos. Uma pesquisa sorológica revelou reatividade para o protozoário em teste de ELISA e RIFI (reação de imunofluorescência indireta). O paciente foi sacrificado e na necropsia evidenciaram-se alterações de linfadenomegalia generalizada e esplenomegalia, entre outras. Posteriormente, o material aspirado da medula óssea e dos tecidos obtidos na necropsia foi submetido ao exame de PCR que confirmou tratar-se da espécie Leishmania (Leishmania) chagasi. No Estado do Rio Grande do Sul até então todos os casos diagnosticados como leishmaniose visceral canina eram de animais provenientes de outros Estados onde a doença é prevalente, sendo esse o primeiro registro de caso autóctone da doença no Estado do Rio Grande do Sul(AU)
In October, 2008, a dog of the Pug breed was brought to ULBRA Veterinary Hospital in Canoas Rio Grande do Sul, without any records of travels to other places, with the exception of the capital of the State, with a history of prolonged disease, weight loss, skin lesions and lameness. It was verified at the clinical examination the presence of extensive alopecia with hair coat thinning and dry seborrhea, lameness on the hind limbs, purulent keratoconjuntivitis, severe weight loss, generalized peripheric lymphadenomegaly and splenomegaly, among other features. Blood and urine samples were taken and various laboratory tests were performed, on wich the main alteration was a high level of total plasmatic proteins, with hyperglobulinemia and hypoalbuminemia. Sequentially, a biopsy of skin, bone marrow and a gingival mass was performed, and all samples revealed the presence of Leishmania spp on macrophages cyto¬plasm. A serologic survey was performed and revealed reactivity to the protozoan on ELISA and IFA (Indirect Fluorescent Antibody) tests. The patient was euthanasied and at the necropsy generalized lymphadenomegaly and splenomegaly were evident, among other features. After that, material from the bone marrow aspirate and tissue samples obtained at the necropsy were used on PCR test that confirmed the parasite species as Leishmania (Leishmania) chagasi. Until then all the cases dignosed as canine visceral leishmaniasis in Rio Grande do Sul came from animals that were brought from other States where the disease is prevalent, being this case the first autochthonous record of the disease in Rio Grande do Sul(AU)
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Animais , Leishmaniose Visceral/veterináriaRESUMO
A Hydrodynastes giga, (Duméril, Bibron & Duméril, 1854) vulgarmente conhecida como surucucu-do-pantanal, é uma serpente de grande porte, que ocorre no norte, centro-oeste, sudeste e sul do Brasil e que pode ser parasitada por ectoparasitos como os carrapatos do gênero Amblyomma. Em dezembro de 2007 foram coletados manualmente três carrapatos de uma serpente H. gigas no pantanal de Miranda, MS,Brasil (19º51-19º58S; 56º17-56º24W). Os carrapatos foram armazenados e enviados para o Laboratório de Parasitologia do Hospital Veterinário da ULBRA, Canoas, RS, onde foi realizada a identificação de três machos da espécie Amblyomma dissimile. A presente nota faz o primeiro relato de A. dissimile parasitando serpentes da espécie H. gigas no pantanal de Miranda, MS, Brasil
Hydrodynastes giga (Duméril, Bibron & Duméril, 1854) best known as false water cobra, is a big-sized snake, which lives in Northern, Middle western, Southeastern and Southern Brazil and might be infested by ectoparasites, such as ticks from the Amblyomma genus. In December 2007 three ticks were manually collected from a H. gigas in the Miranda wetlands, MS, Brazil (19º51-19º58S; 56º17-56º24W). All ticks were placed in identified bottles and then sent to the Laboratório de Parasitologia of ULBRA Veterinary Hospital, Canoas, RS, where the identification of three males of the Amblyomma dissimile species was carried out. This note is the first report of A. dissimile parasitizing snakes of the H. gigas species in the Miranda wetlands, MS, Brazil
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Animais , Masculino , Ixodidae/fisiologia , Serpentes/parasitologia , Brasil , Interações Hospedeiro-Parasita , Ixodidae/classificaçãoRESUMO
A Hydrodynastes giga, (Duméril, Bibron & Duméril, 1854) vulgarmente conhecida como surucucu-do-pantanal, é uma serpente de grande porte, que ocorre no norte, centro-oeste, sudeste e sul do Brasil e que pode ser parasitada por ectoparasitos como os carrapatos do gênero Amblyomma. Em dezembro de 2007 foram coletados manualmente três carrapatos de uma serpente H. gigas no pantanal de Miranda, MS,Brasil (19º51-19º58S; 56º17-56º24W). Os carrapatos foram armazenados e enviados para o Laboratório de Parasitologia do Hospital Veterinário da ULBRA, Canoas, RS, onde foi realizada a identificação de três machos da espécie Amblyomma dissimile. A presente nota faz o primeiro relato de A. dissimile parasitando serpentes da espécie H. gigas no pantanal de Miranda, MS, Brasil.(AU)
Hydrodynastes giga (Duméril, Bibron & Duméril, 1854) best known as false water cobra, is a big-sized snake, which lives in Northern, Middle western, Southeastern and Southern Brazil and might be infested by ectoparasites, such as ticks from the Amblyomma genus. In December 2007 three ticks were manually collected from a H. gigas in the Miranda wetlands, MS, Brazil (19º51-19º58S; 56º17-56º24W). All ticks were placed in identified bottles and then sent to the Laboratório de Parasitologia of ULBRA Veterinary Hospital, Canoas, RS, where the identification of three males of the Amblyomma dissimile species was carried out. This note is the first report of A. dissimile parasitizing snakes of the H. gigas species in the Miranda wetlands, MS, Brazil.(AU)
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Animais , Serpentes/parasitologia , Ixodidae/parasitologia , Interações Hospedeiro-ParasitaRESUMO
A doenças articular degenerativa é uma patologia muito freqüente nos cães e afeta especialmente as articulações sinoviais, resultando na degradação da cartilagem articular, remodelação do osso subcondral e formação de osteófitos. Apesar de ser esse processo predominantemente não-inflamatório, é perpetuado por citocinas e prostaglandinas pró-inflamatórias. O tratamento tem como objetivos o controle da dor e a diminuição dos sinais clínicos, proporcionando uma melhor qualidade de vida ao paciente. A terapia medicamentosa baseia-se comumente no uso de dois grupos de fármacos, os antiinflamatórios não esteroidais e antiinflamatórios esteroidais. Porém, a doença tem caráter progressivo e o tratamento é sintomático
The degenerative joint disease is a very common patology in dogs and especially affects the synovial, resulting in degradation of the articular cartilage, subchodral bone remodalation and osteophytos formation. Despite this is a non inflammatory process, it is perpetuated by proinflammatory cytokines and prostaglandins. The treatment goals are pain control and signs decrease, improving a better quality of life patient. The medical therapy is commonly based in the use of two pharmacos groups, the nonsteroidal antiinflammatory drugs and esteroidal anti-inflammatory drugs. Howewer, the disease has a progressive character and the treatment is symptomatic
Assuntos
Cães , Anti-Inflamatórios , Articulações/anormalidades , CãesRESUMO
A doenças articular degenerativa é uma patologia muito freqüente nos cães e afeta especialmente as articulações sinoviais, resultando na degradação da cartilagem articular, remodelação do osso subcondral e formação de osteófitos. Apesar de ser esse processo predominantemente não-inflamatório, é perpetuado por citocinas e prostaglandinas pró-inflamatórias. O tratamento tem como objetivos o controle da dor e a diminuição dos sinais clínicos, proporcionando uma melhor qualidade de vida ao paciente. A terapia medicamentosa baseia-se comumente no uso de dois grupos de fármacos, os antiinflamatórios não esteroidais e antiinflamatórios esteroidais. Porém, a doença tem caráter progressivo e o tratamento é sintomático(AU)
The degenerative joint disease is a very common patology in dogs and especially affects the synovial, resulting in degradation of the articular cartilage, subchodral bone remodalation and osteophytos formation. Despite this is a non inflammatory process, it is perpetuated by proinflammatory cytokines and prostaglandins. The treatment goals are pain control and signs decrease, improving a better quality of life patient. The medical therapy is commonly based in the use of two pharmacos groups, the nonsteroidal antiinflammatory drugs and esteroidal anti-inflammatory drugs. Howewer, the disease has a progressive character and the treatment is symptomatic(AU)