RESUMO
Folliculogenesis is a process of development and maturation of the ovarian follicles, being essential for the maintenance of fertility. In in vivo conditions, 99.9% of the follicles of an ovary do not ovulate and undergo atresia. In order to minimize this loss and to clarify the existing mechanisms, a technique was developed that allows for the in vitro follicular development. The objective of this study was to evaluate the effects of different epidermal growth factor (EGF) concentrations on the in vitro culturing of equine preantral follicles. Ovaries (n = 10) were collected from a local slaughterhouse of mares in seasonal anestrus, washed with 70% alcohol and PBS, and transported. The inner portion of the ovary was divided into 11 fragments of approximately 3 × 3 × 1 mm. A fragment of each ovary was immediately fixed in Bouin (control group). The remaining 10 fragments were individually cultured for 2 and 6 d. The medium was supplemented with different concentrations of EGF (0, 10, 50, 100, and 200 ng/mL). After cultivation, the fragments were processed and classified according to the developmental stage and morphology. In total, 1065 slides containing 6105 tissue sections were evaluated. Within 2 d of culture, there was a higher proportion of intact follicles at the EGF concentrations of 0 and 100 ng/mL (p > 0.05). After 6 d of culture, only the EGF concentration of 100 ng/mL demonstrated a difference when compared to the other treatments (0, 10, 50 and 200 ng/mL of EGF, p > 0.05). There was follicular development after 2 d at all EGF concentrations. Thus, we suggest that EGF promotes follicular survival in equines at a concentration of 100 ng/mL in in vitro cultures of ovarian fragments for 2 d. In addition, we suggest that EGF promotes follicular survival in equines at a concentration of 100 ng/mL in situ cultivation.
Assuntos
Meios de Cultura/farmacologia , Fator de Crescimento Epidérmico/farmacologia , Folículo Ovariano/citologia , Animais , Forma Celular/efeitos dos fármacos , Sobrevivência Celular/efeitos dos fármacos , Células Cultivadas , Feminino , CavalosRESUMO
The aim of this study was to evaluate two pre-aspiration protocols associated with PGF2a. Nelore heifers (n=14), not pregnant, body score of 2.5 (scale of 1 to 5) were used. All animals were submitted to two treatments (cross over) to control the follicular wave of growth, one by follicular ablation 3 days before the aspiration (PAF) and another by hormonal control with estrogen and injectable progesterone (PCH). Data were analyzed by ANOVA and significant differences were compared by Tukey test, with significance level of 5%. The hormonal control protocol (PCH) provided advantages as higher average of follicles and oocytes, reduction in the number of corpus luteum and one procedure less the follicle ablation. We concluded that the hormone control protocol (PCH) is a viable alternative for pre-aspiration treatments, with additional benefits for the absence of corpus luteum at the time of follicular aspiration.
O objetivo deste estudo foi comparar dois protocolos pré-aspiração folicular associados com PGF2a. Foram utilizadas 14 novilhas da raça Nelore, não gestantes, com escore corporal de 2,5 (escala de 1 a 5). Todos os animais foram submetidos aos dois tratamentos (cross over) para controle da onda de crescimento folicular, um através da ablação de todos os folículos 3 dias antes da aspiração folicular (PAF) e outro por controle hormonal (PCH) com benzoato de estradiol e progesterona injetável. Os dados foram analisados pelo ANOVA e as diferenças significativas pelo teste de Tukey, com nível de significância de 5 %. O protocolo controle hormonal (PCH) mostrou-se vantajoso por propiciar maior média de folículos e oócitos, além de redução no número de corpos lúteos evitando também o procedimento extra de aspiração prévia para ablação dos folículos. Conclui-se que o protocolo hormonal (PCH) apresentado mostra-se uma alternativa viável para tratamentos pré-aspiração, havendo benefícios adicionais pela ausência de corpo lúteo no momento da aspiração folicular.
Assuntos
Animais , Bovinos , Oócitos , Progesterona , Benzoatos , EstradiolRESUMO
Objetivo: Divulgar a biotécnica relacionando alguns de seus aspectos, bem como abordar suas principais etapas, o isolamento, a criopreservação e o cultivo. Fontes Consultadas: O levantamento das informações foi realizado no CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct e Portal CAPES. Síntese dos Dados: Os folículos pré-antrais armazenam cerca de 90% dos oócitos presentes no ovário. Essa biotécnica consiste em recuperar oócitos imaturos retidos no interior de folículos pré-antrais antes de ocorrer o processo de atresia. Pela criopreservação destas células, é possível montar bancos de gerrnoplasma preservando material genético de mulheres submetidas à quimio e/ou à radioterapia, e de animais em via de extinção. Conclusões: Por ser uma biotécnica recente, sua aplicação é restrita à pesquisa fundamental, sendo ainda necessário mais estudos para aprimorar suas etapas.
Objective: To disclose a new biotechnique, listing some of its aspects and addressing its main stages, isolation, cryopreservation and culture of preantral follicles. Data Sources: The information was obtained from CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct and CAPES Portal. Data Synthesis: The preantral follicles store about 90% of the oocytes within the ovary. The biotechnique described is based on recovering immature oocytes retained inside preantral follicles before atresia takes place. The cryopreservation of these cells enables the creation of germoplasm banks, preserving the genetic material of women submitted to chemotherapy and/or radiotherapy, as well as that endangered animal species. Conclusions: Being a recent biotechnique, its application is restricted to basic research. Additional studies are required lo improve the stages involved.
Objetivo: Divulgar la biotécnica exponiendo algunos de sus aspectos y abordar sus principales etapas, el aislamiento, la criopreservación y el cultivo. Fuentes Consultadas: La información se obtuvo de CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct y el Portal CAPES. Síntesis de los Datos: Los foliculos preantrales guardan aproximadamente el 90% de los oocitos que están presentes en el ovario. Esta biotécnica consiste en rescatar oocitos inmaduros retenidos en los foliculos preantrales antes de que ocurra el proceso de atresia. Por la criopreservación de las células es posible constituir bancos de germoplasma, y preservar e/ material genético de mujeres que se sometieron a la quimio y/o radioterapia as; como de animales en extinción. Conclusiones: AI ser una biotécnica reciente, sus aplicaciones se restringen a la investigación básica. Se requieren más estudios para perfeccionar sus etapas.
Assuntos
Feminino , Animais , Folículo Ovariano/anatomia & histologia , Folículo Ovariano/crescimento & desenvolvimento , Oócitos/classificação , Criopreservação , Criopreservação/veterináriaRESUMO
Objetivo: Divulgar a biotécnica relacionando alguns de seus aspectos, bem como abordar suas principais etapas, o isolamento, a criopreservação e o cultivo. Fontes Consultadas: O levantamento das informações foi realizado no CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct e Portal CAPES. Síntese dos Dados: Os folículos pré-antrais armazenam cerca de 90% dos oócitos presentes no ovário. Essa biotécnica consiste em recuperar oócitos imaturos retidos no interior de folículos pré-antrais antes de ocorrer o processo de atresia. Pela criopreservação destas células, é possível montar bancos de gerrnoplasma preservando material genético de mulheres submetidas à quimio e/ou à radioterapia, e de animais em via de extinção. Conclusões: Por ser uma biotécnica recente, sua aplicação é restrita à pesquisa fundamental, sendo ainda necessário mais estudos para aprimorar suas etapas.(AU)
Objective: To disclose a new biotechnique, listing some of its aspects and addressing its main stages, isolation, cryopreservation and culture of preantral follicles. Data Sources: The information was obtained from CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct and CAPES Portal. Data Synthesis: The preantral follicles store about 90% of the oocytes within the ovary. The biotechnique described is based on recovering immature oocytes retained inside preantral follicles before atresia takes place. The cryopreservation of these cells enables the creation of germoplasm banks, preserving the genetic material of women submitted to chemotherapy and/or radiotherapy, as well as that endangered animal species. Conclusions: Being a recent biotechnique, its application is restricted to basic research. Additional studies are required lo improve the stages involved.(AU)
Objetivo: Divulgar la biotécnica exponiendo algunos de sus aspectos y abordar sus principales etapas, el aislamiento, la criopreservación y el cultivo. Fuentes Consultadas: La información se obtuvo de CAB, MEDLINE, PUBMED, Science Direct y el Portal CAPES. Síntesis de los Datos: Los foliculos preantrales guardan aproximadamente el 90% de los oocitos que están presentes en el ovario. Esta biotécnica consiste en rescatar oocitos inmaduros retenidos en los foliculos preantrales antes de que ocurra el proceso de atresia. Por la criopreservación de las células es posible constituir bancos de germoplasma, y preservar e/ material genético de mujeres que se sometieron a la quimio y/o radioterapia as; como de animales en extinción. Conclusiones: AI ser una biotécnica reciente, sus aplicaciones se restringen a la investigación básica. Se requieren más estudios para perfeccionar sus etapas.(AU)