RESUMO
Objetivou-se avaliar a teofilina como agente capacitante substituto ou associado à heparina sobre a reação acrossômica dos espermatozoides e o desenvolvimento de embriões produzidos in vitro. O experimento foi realizado com quatro touros e três tratamentos, totalizando 12 grupos experimentais. O sêmen dos touros foi avaliado nos tratamentos descritos a seguir: tratamento 1 (HEP): heparina - 10µg/mL; tratamento 2 (TEO): teofilina - 5mM; tratamento 3 (HEP + TEO): heparina (10µg/mL) + teofilina (5mM), por zero, seis, 12 e 18 horas, corados com trypan blue/Giemsa para avaliação da reação acrossômica. Para a produção dos embriões, os agentes capacitantes foram adicionados aos meios de fertilização. Na análise espermática, a taxa de reação acrossômica verdadeira foi maior (P<0,05) no tempo zero hora, enquanto para espermatozoides mortos, as maiores taxas (P<0,05) foram nos tempos de 12h (84,46±5,82) e 18h (86,75±4,19). A taxa de embriões produzidos (37,97±13) e a taxa de eclosão (33,50±14) foram maiores (P<0,05) para o tratamento HEP. Não foi observada diferença (P>0,05) entre touros na análise de reação acrossômica nem na PIVE. A utilização da teofilina foi tão eficiente quanto a da heparina na indução da reação acrossômica, no entanto resultou em menores taxas de produção embrionária.(AU)
The sperm capacitating process should take special attention during in vitro embryo production (IVEP) once that affects the success of embryo production. The study aimed to evaluate theophylline as substitute capacitating agent or in combination with heparin on the sperm acrosome reaction and development of embryos produced in vitro. The experiment was carried out using 4 bulls and 3 treatments, establishing 12 experimental groups. Each bull was evaluated in the following treatments: Treatment 1 (HEP): Heparin - 10mg/mL; Treatment 2 (THEO): Theophylline - 5mM; Treatment 3 (HEP + THEO), Heparin (10mg/mL) + Theophylline (5mM). The semen of bulls was incubated in each treatment for 0, 6, 12 and 18h, stained with Trypan blue / Giemsa and analyzed by electron microscopy for assessment of acrosome reaction. Using sperm of same bulls, capacitating agents were added to the fertilization media, for IVEP. In sperm analysis, the true acrosome reaction rate was higher (P<0.05) in time 0h, while sperm dead rates were highest (P<0.05) at 12h (84.46±5, 82), and 18h (86.75±4.19). The produced embryos rate (37.97±13) and hatching rate (33.50±14) were larger (P<0.05) for HEP treatment. There was no difference (P>0.05) between bulls in acrosome reaction analysis neither for IVEP. The use of theophylline was as effective as heparin in the induction of the acrosome reaction, although it resulted in lower embryo production rates.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Bovinos , Reação Acrossômica , Heparina , Sêmen , Espermatozoides , Teofilina/uso terapêuticoRESUMO
Objetivou-se avaliar a teofilina como agente capacitante substituto ou associado à heparina sobre a reação acrossômica dos espermatozoides e o desenvolvimento de embriões produzidos in vitro. O experimento foi realizado com quatro touros e três tratamentos, totalizando 12 grupos experimentais. O sêmen dos touros foi avaliado nos tratamentos descritos a seguir: tratamento 1 (HEP): heparina - 10µg/mL; tratamento 2 (TEO): teofilina - 5mM; tratamento 3 (HEP + TEO): heparina (10µg/mL) + teofilina (5mM), por zero, seis, 12 e 18 horas, corados com trypan blue/Giemsa para avaliação da reação acrossômica. Para a produção dos embriões, os agentes capacitantes foram adicionados aos meios de fertilização. Na análise espermática, a taxa de reação acrossômica verdadeira foi maior (P<0,05) no tempo zero hora, enquanto para espermatozoides mortos, as maiores taxas (P<0,05) foram nos tempos de 12h (84,46±5,82) e 18h (86,75±4,19). A taxa de embriões produzidos (37,97±13) e a taxa de eclosão (33,50±14) foram maiores (P<0,05) para o tratamento HEP. Não foi observada diferença (P>0,05) entre touros na análise de reação acrossômica nem na PIVE. A utilização da teofilina foi tão eficiente quanto a da heparina na indução da reação acrossômica, no entanto resultou em menores taxas de produção embrionária.(AU)
The sperm capacitating process should take special attention during in vitro embryo production (IVEP) once that affects the success of embryo production. The study aimed to evaluate theophylline as substitute capacitating agent or in combination with heparin on the sperm acrosome reaction and development of embryos produced in vitro. The experiment was carried out using 4 bulls and 3 treatments, establishing 12 experimental groups. Each bull was evaluated in the following treatments: Treatment 1 (HEP): Heparin - 10mg/mL; Treatment 2 (THEO): Theophylline - 5mM; Treatment 3 (HEP + THEO), Heparin (10mg/mL) + Theophylline (5mM). The semen of bulls was incubated in each treatment for 0, 6, 12 and 18h, stained with Trypan blue / Giemsa and analyzed by electron microscopy for assessment of acrosome reaction. Using sperm of same bulls, capacitating agents were added to the fertilization media, for IVEP. In sperm analysis, the true acrosome reaction rate was higher (P<0.05) in time 0h, while sperm dead rates were highest (P<0.05) at 12h (84.46±5, 82), and 18h (86.75±4.19). The produced embryos rate (37.97±13) and hatching rate (33.50±14) were larger (P<0.05) for HEP treatment. There was no difference (P>0.05) between bulls in acrosome reaction analysis neither for IVEP. The use of theophylline was as effective as heparin in the induction of the acrosome reaction, although it resulted in lower embryo production rates.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Bovinos , Reação Acrossômica , Heparina , Sêmen , Espermatozoides , Teofilina/uso terapêuticoRESUMO
ABSTRACT The sperm capacitating process should take special attention during in vitro embryo production (IVEP) once that affects the success of embryo production. The study aimed to evaluate theophylline as substitute capacitating agent or in combination with heparin on the sperm acrosome reaction and development of embryos produced in vitro. The experiment was carried out using 4 bulls and 3 treatments, establishing 12 experimental groups. Each bull was evaluated in the following treatments: Treatment 1 (HEP): Heparin - 10mg/mL; Treatment 2 (THEO): Theophylline - 5mM; Treatment 3 (HEP + THEO), Heparin (10mg/mL) + Theophylline (5mM). The semen of bulls was incubated in each treatment for 0, 6, 12 and 18h, stained with Trypan blue / Giemsa and analyzed by electron microscopy for assessment of acrosome reaction. Using sperm of same bulls, capacitating agents were added to the fertilization media, for IVEP. In sperm analysis, the true acrosome reaction rate was higher (P 0.05) in time 0h, while sperm dead rates were highest (P 0.05) at 12h (84.46±5, 82), and 18h (86.75±4.19). The produced embryos rate (37.97±13) and hatching rate (33.50±14) were larger (P 0.05) for HEP treatment. There was no difference (P>0.05) between bulls in acrosome reaction analysis neither for IVEP. The use of theophylline was as effective as heparin in the induction of the acrosome reaction, although it resulted in lower embryo production rates.
RESUMO Objetivou-se avaliar a teofilina como agente capacitante substituto ou associado à heparina sobre a reação acrossômica dos espermatozoides e o desenvolvimento de embriões produzidos in vitro. O experimento foi realizado com quatro touros e três tratamentos, totalizando 12 grupos experimentais. O sêmen dos touros foi avaliado nos tratamentos descritos a seguir: tratamento 1 (HEP): heparina - 10µg/mL; tratamento 2 (TEO): teofilina - 5mM; tratamento 3 (HEP + TEO): heparina (10µg/mL) + teofilina (5mM), por zero, seis, 12 e 18 horas, corados com trypan blue/Giemsa para avaliação da reação acrossômica. Para a produção dos embriões, os agentes capacitantes foram adicionados aos meios de fertilização. Na análise espermática, a taxa de reação acrossômica verdadeira foi maior (P 0,05) no tempo zero hora, enquanto para espermatozoides mortos, as maiores taxas (P 0,05) foram nos tempos de 12h (84,46±5,82) e 18h (86,75±4,19). A taxa de embriões produzidos (37,97±13) e a taxa de eclosão (33,50±14) foram maiores (P 0,05) para o tratamento HEP. Não foi observada diferença (P>0,05) entre touros na análise de reação acrossômica nem na PIVE. A utilização da teofilina foi tão eficiente quanto a da heparina na indução da reação acrossômica, no entanto resultou em menores taxas de produção embrionária.
RESUMO
A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécie-específicos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.
Assuntos
Animais , Brucella ovis/isolamento & purificação , Epididimite/diagnóstico , Ovinos/microbiologia , Pasteurellaceae/isolamento & purificação , Sêmen/microbiologia , Urina/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterináriaRESUMO
A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécie-específicos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados(AU)
Assuntos
Animais , Brucella ovis/isolamento & purificação , Pasteurellaceae/isolamento & purificação , Urina/microbiologia , Sêmen/microbiologia , Ovinos/microbiologia , Epididimite/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterináriaRESUMO
The objective of the experiment was to verify, through ultrasonography, the follicular activity of ostriches in different seasons of the year, correlating them with photoperiod, number of rainy days in each month and egg laying. Eight females were evaluated monthly, during 12 consecutive months in an ostrich farm located in the Center-West of Minas Gerais, Brazil. It was found that the time of the year for egg laying lasts for eight months, from June to January. The egg laying was positively correlated (r = 0.48; P<0.01) with photoperiod. However, there was no correlation between the egg laying and the follicular activity with the amount of rain. Considering the technique adopted, the right antimere offered better ultrasonographic access. The method was efficient for ovary follicular evaluation in the ostrich, offering adequate subsidies for the evaluation of the reproductive activity of the female.
Assuntos
Animais , Feminino , Folículo Ovariano , Struthioniformes/anatomia & histologia , Struthioniformes/embriologia , Fotoperíodo , Ultrassonografia/veterináriaRESUMO
The objective of the experiment was to verify, through ultrasonography, the follicular activity of ostriches in different seasons of the year, correlating them with photoperiod, number of rainy days in each month and egg laying. Eight females were evaluated monthly, during 12 consecutive months in an ostrich farm located in the Center-West of Minas Gerais, Brazil. It was found that the time of the year for egg laying lasts for eight months, from June to January. The egg laying was positively correlated (r = 0.48; P<0.01) with photoperiod. However, there was no correlation between the egg laying and the follicular activity with the amount of rain. Considering the technique adopted, the right antimere offered better ultrasonographic access. The method was efficient for ovary follicular evaluation in the ostrich, offering adequate subsidies for the evaluation of the reproductive activity of the female.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Folículo Ovariano , Struthioniformes/anatomia & histologia , Struthioniformes/embriologia , Ultrassonografia/veterinária , FotoperíodoRESUMO
The objective was to use various nonlinear models to describe scrotal circumference (SC) growth in Guzerat bulls on three farms in the state of Minas Gerais, Brazil. The nonlinear models were: Brody, Logistic, Gompertz, Richards, Von Bertalanffy, and Tanaka, where parameter A is the estimated testis size at maturity, B is the integration constant, k is a maturating index and, for the Richards and Tanaka models, m determines the inflection point. In Tanaka, A is an indefinite size of the testis, and B and k adjust the shape and inclination of the curve. A total of 7410 SC records were obtained every 3 months from 1034 bulls with ages varying between 2 and 69 months (<240 days of age = 159; 241-365 days = 451; 366-550 days = 1443; 551-730 days = 1705; and >731 days = 3652 SC measurements). Goodness of fit was evaluated by coefficients of determination (R(2)), error sum of squares, average prediction error (APE), and mean absolute deviation. The Richards model did not reach the convergence criterion. The R(2) were similar for all models (0.68-0.69). The error sum of squares was lowest for the Tanaka model. All models fit the SC data poorly in the early and late periods. Logistic was the model which best estimated SC in the early phase (based on APE and mean absolute deviation). The Tanaka and Logistic models had the lowest APE between 300 and 1600 days of age. The Logistic model was chosen for analysis of the environmental influence on parameters A and k. Based on absolute growth rate, SC increased from 0.019 cm/d, peaking at 0.025 cm/d between 318 and 435 days of age. Farm, year, and season of birth significantly affected size of adult SC and SC growth rate. An increase in SC adult size (parameter A) was accompanied by decreased SC growth rate (parameter k). In conclusion, SC growth in Guzerat bulls was characterized by an accelerated growth phase, followed by decreased growth; this was best represented by the Logistic model. The inflection point occurred at approximately 376 days of age (mean SC of 17.9 cm). We inferred that early selection of testicular size might result in smaller testes at maturity.
Assuntos
Bovinos/crescimento & desenvolvimento , Dinâmica não Linear , Escroto/anatomia & histologia , Animais , Cruzamento , Comportamento Alimentar , Fertilidade , Masculino , Estações do Ano , Maturidade Sexual , Testículo/anatomia & histologiaRESUMO
A brucelose ovina causada pela Brucella ovis é uma doença reprodutiva de carneiros caracterizada por epididimite, orquite, com consequente diminuição da fertilidade e prejuízos econômicos significativos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a aplicabilidade da técnica de PCR como um método de diagnóstico em campo, comparado-a com a técnica de IDGA. Foram coletadas amostras de urina e soro de 90 carneiros oriundos de 31 rebanhos localizados no Estado do Piauí. Quatro das 31 (12,9%) propriedades avaliadas apresentaram animais positivos. Dezoito (20%) amostras de urina foram positivas pela PCR, enquanto o método de IDGA identificou 16 (17,8%) carneiros soropositivos. Embora os métodos tenham apresentado concordância baixa na estatística Kappa (k=0,04), não foi observada diferença estatística entre as técnicas (P>0,05) pelo teste exato de Fisher. A combinação dos dois testes aumentou significativamente a detecção de animais positivos para 34,4% (P <0,05), sugerindo que a associação de métodos de diagnóstico como a técnica de PCR em amostras de urina e sorologia por IDGA e a avaliação clínica dos animais é necessária para um diagnóstico eficiente na infecção por B. ovis.
RESUMO
A brucelose ovina causada pela Brucella ovis é uma doença reprodutiva de carneiros caracterizada por epididimite, orquite, com consequente diminuição da fertilidade e prejuízos econômicos significativos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a aplicabilidade da técnica de PCR como um método de diagnóstico em campo, comparado-a com a técnica de IDGA. Foram coletadas amostras de urina e soro de 90 carneiros oriundos de 31 rebanhos localizados no Estado do Piauí. Quatro das 31 (12,9%) propriedades avaliadas apresentaram animais positivos. Dezoito (20%) amostras de urina foram positivas pela PCR, enquanto o método de IDGA identificou 16 (17,8%) carneiros soropositivos. Embora os métodos tenham apresentado concordância baixa na estatística Kappa (k=0,04), não foi observada diferença estatística entre as técnicas (P>0,05) pelo teste exato de Fisher. A combinação dos dois testes aumentou significativamente a detecção de animais positivos para 34,4% (P <0,05), sugerindo que a associação de métodos de diagnóstico como a técnica de PCR em amostras de urina e sorologia por IDGA e a avaliação clínica dos animais é necessária para um diagnóstico eficiente na infecção por B. ovis.(AU)