RESUMO
The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Freys medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.(AU)
O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.(AU)
Assuntos
Animais , Aves Domésticas/sangue , Aves Domésticas/genética , Mycoplasma/patogenicidade , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Freys medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.
O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.
Assuntos
Animais , Aves Domésticas/genética , Aves Domésticas/sangue , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Mycoplasma/patogenicidade , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
Abstract The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Freys medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.
Resumo O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.
RESUMO
Abstract The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Frey's medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.
Resumo O setor avícola do Paquistão está contribuindo principalmente para preencher a lacuna entre a demanda e a oferta de proteína. Mycoplasma gallisepticum é uma bactéria emergente que causa sérios problemas na indústria avícola do Paquistão. Um estudo transversal foi conduzido para avaliar a carga de M. gallisepticum em regiões de avicultura do Paquistão. Um total de 600 amostras de soro e 600 amostras de esfregaço foi coletado, 200 de cada frango de corte, poedeiras e aves reprodutoras nos distritos de Rawalpindi e Abbottabad. Amostras de soro foram analisadas por ELISA para soroprevalência. As zaragatoas foram cultivadas em meio Frey, seguido de PCR e sequenciação parcial do gene mgc2. Os resultados da soroprevalência de M. gallisepticum mostraram que as poedeiras (75%, n = 150) são mais positivas em comparação com matrizes (70%, n = 140) e frangos de corte (50%, n = 100). Colônias típicas de M. gallisepticum foram observadas em reprodutoras (26,5%), seguidas de poedeiras (21%) e frangos de corte (9%). Um total de 37,1% (n = 42) das amostras foi identificado como positivas por PCR de um total de 113 amostras positivas baseadas em cultura. Um total de seis isolados de M. gallisepticum do estudo atual mostrou 98-99% de similaridade com isolados relatados anteriormente com base no sequenciamento parcial do gene mgc2. O M. gallisepticum foi encontrado com alta prevalência em diferentes pães de aves. Os resultados deste estudo acrescentariam dados básicos e forneceriam orientação para o setor pecuário fortalecer uma estratégia de controle da micoplasmose em granjas avícolas.
Assuntos
Animais , Doenças das Aves Domésticas/epidemiologia , Mycoplasma gallisepticum/genética , Paquistão/epidemiologia , Aves Domésticas , Estudos Soroepidemiológicos , Galinhas , Estudos TransversaisRESUMO
The poultry sector in Pakistan is contributing mainly in bridging gap between demand and supply for protein. Mycoplasma gallisepticum is an emerging bacterium causing serious problems in poultry industry of Pakistan. A cross-sectional study was conducted to evaluate the M. gallisepticum load in poultry populated regions of Pakistan. Total 600 serum and 600 swab samples were collected, 200 from each broiler, layers and breeders poultry in Rawalpindi and Abbottabad districts. Serum samples were analyzed through ELISA for seroprevalence. Swabs were cultured on Frey's medium followed by PCR and partial mgc2 gene sequencing. Results of seroprevalence of M. gallisepticum showed that layers (75%, n=150) are more positive as compared to breeders (70%, n=140) and broilers (50%, n=100). Typical colonies of the M. gallisepticum were observed in breeder (26.5%), followed by layer (21%) and broilers (9%). A total of 37.1% (n=42) samples were identified positive through PCR out of total 113 cultured based positive samples. A total of six M. gallisepticum isolates of current study showed 98-99 percent similarity with previously reported isolates on the basis of mgc2 gene partial sequencing. The M. gallisepticum was found highly prevalent in different poultry breads. Results of this study would add into basic data and provide a direction for livestock sector to strengthen a control strategy for mycoplasmosis in poultry farms.
Assuntos
Mycoplasma gallisepticum , Doenças das Aves Domésticas , Animais , Galinhas , Estudos Transversais , Mycoplasma gallisepticum/genética , Paquistão/epidemiologia , Aves Domésticas , Doenças das Aves Domésticas/epidemiologia , Estudos SoroepidemiológicosRESUMO
Cereal crops that have rigid non-cellulose components in the cell wall tissues of leaves and high starch and protein content in grains face limitations in DNA extraction. Advanced molecular genetic techniques such as mapping and marker-assisted selection programs require pure and quick DNA extraction. In this study, we developed methods for isolating high-quality genomic DNA from leaves and seeds of major cereal crops with minor modifications. DNA yields ranged from 300 to 1800 ng for 0.01 g seed or leaf tissue.
Assuntos
DNA de Plantas/isolamento & purificação , Grão Comestível/genética , Genoma de Planta , Folhas de Planta/química , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Sementes/químicaRESUMO
A simple protocol for obtaining pure, restrictable and amplifiable megabase genomic DNA from oil-free seed residue of Brassica napus, an important oil seed plant, has been developed. Oil from the dry seeds was completely recovered in an organic solvent and quantified gravimetrically followed by processing of the residual biomass (defatted seed residue) for genomic DNA isolation. The isolated DNA can be cut by a range of restriction enzymes. The method enables simultaneous isolation and recovery of lipids and genomic DNA from the same test sample, thus allowing two independent analyses from a single sample. Multiple micro-scale oil extraction from the commercial seeds gave approximately 39% oil, which is close to the usual oil recovery from standard oil seed. Most of the amplified fragments were scored in the range of 2.5 to 0.5 kb, best suited for scoring as molecular diagnostics.
Assuntos
Brassica napus/genética , DNA de Plantas/isolamento & purificação , Sementes/genética , DNA de Plantas/genética , Reação em Cadeia da Polimerase , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA PolimórficoRESUMO
Genetic diversity underlies the improvement of crops by plant breeding. Land races of rice (Oryza sativa L.) can contain some valuable alleles not common in modern germplasm. The aim here was to measure genetic diversity and its effect on agronomic traits among rice land-race genotypes grown in Pakistan. Diversity was measured using thirty-five microsatellite markers and seventy-five genotypes. Among the markers used a total of 142 alleles were detected at 32 polymorphic SSR loci, while three loci were monomorphic in Pakistani rice landraces. The number of alleles identified by each marker ranged from 2 to 13 with a mean of 4.4. Size differences between the smallest and largest alleles varied from 11bp to 71bp. Polymorphism information content ranged from 0.124 to 0.836, with an average of 0.569. At nine microsatellite loci, basmati-type landraces amplified more different alleles than those in the coarse-type. DNA markers RM70 and RM72 divided the rice landraces on the basis of days to flowering. A dendrogram based on total microsatellite polymorphism grouped 75 genotypes into four major clusters at 0.40 similarity coefficient, differentiating tall, late maturing and slender aromatic types from the short, early and bold non-aromatic ones. It inferred that Pakistani landraces have diverse genetic bases and can be utilized in future breeding programs. The DNA markers developed will assist in genotype identification, purity testing and plant variety protection.
Assuntos
Variação Genética , Repetições de Microssatélites , Oryza/genética , Agricultura , Alelos , Eletroforese , Marcadores Genéticos , Genótipo , Paquistão , Polimorfismo GenéticoRESUMO
Abstract Salivary gland chromosome slides of Anopheles albitarsis from Brasil, Colombia and Venezuela indicate that at least three chromosomally differentiated populations of this species exist in this area. The B1 population from Brasil contains one heterozygous inversion in the X and two in the autosomes. Population B2, sympatric with B1 in Brasil, differs from it by two inversions in the X and ten in the autosomes. Population C in Colombia and Venezuela is closer to B1, from which it differs by three inversions in chromosome 2 and three in chromosome 3. Each population, B1, B2 and C may be distinguished with about 98% certainty using the banding patterns of the X chromosomes. Most of the remaining individuals may be identified using a combination of the X and autosomal paracentric inversions. The scarcity of shared inversions argues for little if any natural hybridization among these populations. A standard salivary gland chromosome map, based on the B1 populations, is presented.
Resumo Estudos citológicos utilizando cromossomos politênicos das glândulas salivares de Anopheles albitarsis, coletados no Brasil, Colômbia e Venezuela indicam que existem pelo menos 3 populações, que são diferentes cromossomicamente. Todas as três podem ser diferenciadas usando somente o cromossomo X. A população B1 do Brasil tem uma inversão heterozigota no cromossomo X e duas nos autossomos. A população B2, simpátrica com a B1, no Brasil, varia daquela por duas inversões no X e dez nos autossomos. A terceira população C, a qual se encontra na Colômbia e Venezuela, mostra mais proximidade a B1, da qual ela varia por três inversões no cromossomo 2 e três inversões no cromossomo 3. Cada população, B1, B2 e C pode ser identificada com 98 por cento de certeza usando a seqüência das bandas do cromossomo X. A escassez das inversões comuns indica uma baixa taxa de hibridismo na natureza entre estas populações. É apresentado um mapa dos cromossomos de glândulas salivares de larvas da população B1 para ser considerado como padrão para esta espécie.
RESUMO
Abstract Salivary gland chromosome slides of Anopheles albitarsis from Brasil, Colombia and Venezuela indicate that at least three chromosomally differentiated populations of this species exist in this area. The B1 population from Brasil contains one heterozygous inversion in the X and two in the autosomes. Population B2, sympatric with B1 in Brasil, differs from it by two inversions in the X and ten in the autosomes. Population C in Colombia and Venezuela is closer to B1, from which it differs by three inversions in chromosome 2 and three in chromosome 3. Each population, B1, B2 and C may be distinguished with about 98% certainty using the banding patterns of the X chromosomes. Most of the remaining individuals may be identified using a combination of the X and autosomal paracentric inversions. The scarcity of shared inversions argues for little if any natural hybridization among these populations. A standard salivary gland chromosome map, based on the B1 populations, is presented.
Resumo Estudos citológicos utilizando cromossomos politênicos das glândulas salivares de Anopheles albitarsis, coletados no Brasil, Colômbia e Venezuela indicam que existem pelo menos 3 populações, que são diferentes cromossomicamente. Todas as três podem ser diferenciadas usando somente o cromossomo X. A população B1 do Brasil tem uma inversão heterozigota no cromossomo X e duas nos autossomos. A população B2, simpátrica com a B1, no Brasil, varia daquela por duas inversões no X e dez nos autossomos. A terceira população C, a qual se encontra na Colômbia e Venezuela, mostra mais proximidade a B1, da qual ela varia por três inversões no cromossomo 2 e três inversões no cromossomo 3. Cada população, B1, B2 e C pode ser identificada com 98 por cento de certeza usando a seqüência das bandas do cromossomo X. A escassez das inversões comuns indica uma baixa taxa de hibridismo na natureza entre estas populações. É apresentado um mapa dos cromossomos de glândulas salivares de larvas da população B1 para ser considerado como padrão para esta espécie.