RESUMO
The present article reviews the status of Chagas disease in Venezuela during the period 2003-2018, based on the detection of Trypanosoma cruzi-infection in 3,343 blood samples of individuals from rural localities and 182 patients referred from health centers to confirm presumptive clinical diagnostic. The study involved samples from 81 rural localities of 17 states located at different regions and ecological life zones of the country. Analysis by parasitological (fresh microscopic observation, hemoculture and Giemsa stained blood smears), serological (DAT, IFAT-polyvalent, IgM, IgG tests) and molecular (PCR) tests, revealed 10.7% seroprevalence and 42.8% T. cruzi-infection, in individuals from rural localities and referred patients, respectively. In both groups T. cruzi-infection was detected at any age, revealing active transmission in children under 10-years-old. Clinical profile detected in referred patients, showed significantly major number of symptoms in orally infected patients than in infected by vectorial route (P<0.01). Genetic characterization of T. cruzi isolates obtained from orally and vectorial transmitted acute Chagas disease in western Venezuela, revealed the circulation of DTUI and DTUIII in the former, and DTUI, DTUII and DTUIII in patients infected by vectorial route. DTUI predominated in both cases, and haplotype Ib was the most frequently found in this genotype. Statistical analysis of clinical profile - T. cruzi DTUs - transmission route relationships did not show association among these variables and, consequently, chagasic patient's clinical condition did not depend of T. cruzi genotype or its route of transmission. In addition, differences in clinical severity may be associated with host susceptibility and/or parasite load received by the human receptor in spite of the T. cruzi genotype itself. The epidemiological implications of the present findings are discussed, and the need for developing efficient tools as well as implementation of urgent and radical changes in the public health policy to control Chagas disease transmission in the Venezuelan territory are suggested.
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Doença de Chagas/epidemiologia , Animais , Doença de Chagas/parasitologia , Doença de Chagas/transmissão , Haplótipos , Humanos , Carga Parasitária , Estudos Soroepidemiológicos , Fatores de Tempo , Trypanosoma cruzi/genética , Venezuela/epidemiologiaRESUMO
Se registra un brote de enfermedad de chagas agudo, en una localidad rural de Mérida-Venezuela, asociado con transmisión oral por ingesta contaminada con trypanosoma cruzi dada la masiva y simultanea infección detectada en 5 miembros de una familia. La masiva transmisión de T. cruzi generó cuadros clínicos severos causando miocarditis aguda en 2 pacientes (40%) incluyendo un caso fatal. La severidad clínica en todos los pacientes involucrados mostró correspondencia con los hallazgos parasitológicos, serológicos y moleculares (PCR) con los cuales se evidenció presencia de tripomastigotes sanguícolas de T. cruzi, anticuerpos anti-T. cruzi con niveles variables de IgM e IgG específicas y ADN de T. cruzi, respectivamente. Asimismo, el perfil clínico reveló 17 signos o síntomas con un promedio por paciente de 12±3 (rango=9-16) con simultaneidad en 8 de los síntomas más frecuentemente detectados. Resalta en la sintomatología la presencia de edema facial interno con manifiesta tumefacción y parestesia lingual en ausencia del cuadro típico de edema bipalpebral (signo de Romaña) y/o chagoma de inoculación comúnmente registrados en la infección chagásica por vía vectorial. Se argumenta la posibilidad de la transmisión oral y se discute la potencial importancia epidemiológica del presente hallazgo.
An acute Chagas disease outbreak associated with oral transmission, detected in a rural village of Merida- Venezuela, is reported. The massive transmission due to ingestion of food contaminated with Trypanosoma cruzi generated, in 5 members of the same family, severe clinical features causing acute myocarditis in two of them (40%) including a fatal case. Parasitological, serological and molecular (PCR) examination of samples from the 5 patients involved in the outbreak, revealed T.cruzi blood circulating tripomastigotes, anti-T. cruzi specific antibodies (IgM; IgG) and the presence of T. cruzi respectively. The recorded clinical pattern detected a total of 17 signs or symptoms with an average ± SD 12±3 per patients (range = 9-16) showing simultaneity in 8 symptoms and a 20% mortality. A remarkable characteristic detected during the study was the presence of internal facial swollen with paresthesia in tongue in absence of the typical Romaña's sign or chagoma commonly found in Chagas disease-infection caused by vector transmission. The possible oral transmission and the potential of the findings from the epidemiological viewpoint are discussed.
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Humanos , Masculino , Feminino , Doença de Chagas , Parasitos , Trypanosoma cruzi/parasitologia , Doenças Endêmicas , Fatores EpidemiológicosRESUMO
Se registra un estudio epidemiológico sobre leishmaniasis visceral (LV) llevado a cabo en localidades de la región semiárida noroccidental de Venezuela, donde previamente se había detectado casos activos de esta dolencia. Un total de 1036 individuos sin manifestaciones clínicas aparentes (SMCA) domiciliados en 25 localidades, y 67 perros, de 8 localidades, fueron examinados por métodos serológicos (TAD, IFI, ELISA) y ensayos de PCR. Los resultados revelan una seropositividad a la presencia de anticuerpos circulantes anti-Leishmania infantum (=L. chagasi) del 16,9% y 76,1% en humanos asintomáticos y perros, respectivamente. Los hallazgos serológicos fueron corroborados por la reactividad a la prueba de PCR, arrojando valores de 17,7% en humanos y 29,9% en caninos. Se demuestra la alta prevalencia de infecciones inaparentes por L. infantum en individuos asintomáticos, resultando más frecuentes y ampliamente distribuidas que las infecciones activas. Se discute su rol en la dinámica de transmisión de la LV. Se propone considerar el perro como factor importante en el mantenimiento de L. infantum como fuente de infección humana, corroborando su rol de reservorio de LV en el semiárido venezolano. Se identifican 12 especies flebotominas entre 6000 especímenes colectados en 12 localidades, detectándose un franco predominio de Lutzomyia evansi (66,6%) sobre Lu. longipalpis (14,9%). Se detecta en ambas especies infección natural por L. infantum, utilizando ensayos de PCR. Se concluye que la asociación de personas con LV, activas o SMCA; perros infectados con L. infantum y Lu. evansi, presente en todas las localidades; aunada a las pobres condiciones sanitarias y/o nutricionales, son factores de riesgo suficientes para explicar la alta endemicidad de la LV en la región semiárida del occidente de Venezuela.
An epidemiological study on visceral leishmaniasis (VL) in the semiarid region of western Venezuela, where some acute cases have been previously reported, is recorded. A total of 1036 symptomless people's sera samples from 25 villages, and 67 dogs from 8 different localities, were tested by using 3 different serologic methods (DAT, IFAT, ELISA) and the polymerase chain reaction assay (PCR). Serological tests revealed 16.9% and 76.1% seropositive to Leishmania infantum in asymptomatic humans and dogs, respectively. In addition, a PCR assay detected the presence of L. infantumspecific DNA in 17.7% of the symptomless sampled individuals and in 29.9% of the tested dogs. The combined analyses of serologic and molecular findings demonstrate the presence of subclinical or inapparent VL infections in local people from this part of western Venezuela. The observed prevalence of VL in asymptomatic people is by itself a matter of concern from the epidemiological point of view. The present results also serve to call the attention to the presence of infected dogs as a risk factor in the maintenance of L. infantum as a source for infection to humans in the studied semiarid region. A total of 12 sand fly species were identified from 6000 specimens collected in 12 sampled villages, with a predominance of Lu. evansi (66.6%) over Lu. longipalpis (14.9%). In both sand fly species natural infection by L. infantum was detected using a PCR assay. It is concluded that the association among VL infected people, L. infantum-infected dogs and the presence of Lu. evansi, together with the observed poor sanitary and/or nutritional conditions, are risk factors to explain the high endemicity by VL at the semiarid region of western Venezuela.
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Humanos , Animais , Doenças Transmissíveis , Leishmaniose , Reservatórios de Água , Fatores de Risco , Testes Sorológicos , Estudos Epidemiológicos , Perfis SanitáriosRESUMO
Se registra, en un paciente masculino de 48 años, la detección de Leishmania (Viannia) braziliensis en muestra de lesión mucosa crónica con 16 años de evolución clínica. El caso presentado cursa con perforación del tabique nasal no evidenciándose lesión cutánea primaria sugestiva de leishmaniasis. Por su ocupación el paciente ha frecuentado, por largos períodos, bosques en áreas endémicas para leishmaniasis en el occidente de Venezuela. Continuas evaluaciones clínicas, inmunológicas e histopatológicas realizadas durante varios años fallaron en establecer un diagnóstico certero incrementando la severidad del caso. Exámenes recientes realizados en nuestro laboratorio revelan la presencia de amastigotes en muestras de la lesión nasal activa en extendidos coloreados con tinción de Giemsa. La identificación del parásito como L. braziliensis y la verificación de la infección por este parásito en el paciente, fue lograda por ensayos de PCR y Western Blot, respectivamente. Se concluye que el caso presentado sufre una leishmaniasis mucocutánea de vieja data con una baja respuesta inmunológica, a juzgar por la frecuente negatividad en pruebas de IDR y/o la detección de anticuerpos circulantes anti-Leishmania. Se discute sobre la imprecisión diagnóstica en el caso presentado y se advierte sobre el riesgo epidemiológico potencial de casos similares.
The detection of Leishmania (Viannia) braziliensis from a chronic mucosal lesion with 16 years of clinical evolution in a 48 years old male patient is reported. The patient showed destruction of the nasal septal cartilage with no evidence of primary leishmanial lesion. Due to his professional work he frequently visited areas of western Venezuela where leishmaniasis is endemic. Frequent clinical, immunologic and histopathologic evaluations carried out during several years failed to establish a right diagnosis, increasing the severity of the mucosal lesion. The finding of a sparse number of amastigotes in a sample from the mucosal lesion stained by Giemsa stain, suggested a mucosal infection by Leishmania. The identification of the parasite as L. braziliensis and the verification of the infection by this parasite in the reported case were carried out using a PCR assay and a Western Blot test, respectively. It is concluded that the patient was suffering a long-lasting, reluctant to heal and severe lesion with a low immunological response due to infection by L. braziliensis causing mucocutaneous leishmaniasis (MCL). The fail in the diagnosis of this particular case of MCL and the potential epidemiological risk in similar cases are discussed.
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Humanos , Masculino , Adulto , Leishmania braziliensis/crescimento & desenvolvimento , Leishmaniose Mucocutânea/diagnóstico , Leishmaniose Mucocutânea/etnologia , Leishmaniose Mucocutânea/fisiopatologia , Leishmaniose Mucocutânea/patologia , Leishmaniose Mucocutânea/tratamento farmacológico , Parasitologia/métodos , VenezuelaRESUMO
Inapparent infections by Trypanosoma cruzi were detected, for the first time, in symptomless seropositive healthy individuals from a Yukpa ethnic community in western Venezuela where Chagas disease had not been previously reported. Seropositivity was detected in 24 out of 173 (13.9%) sera samples taken from asymptomatic people by using three serological methods (DAT, IFAT, ELISA). Complementary analyses by IFAT revealed a low level of anti-T. cruzi specific IgM and IgG in all seropositive people when compared with detected levels in acute and chronic chagasic patients included as positive controls. In addition, 100% of the sampled dogs (8) were seropositive showing a level of anti-T. cruzi IgG similar to that detected in humans. Genotyping of a T. cruzi isolate obtained from an infected wild specimen of Rhodnius pictipes, revealed the circulation of lineage1 (DTU1) in the study area. The importance of the detection of asymptomatic T.cruzi-infections in this indigenous community and its potential epidemiological implications are discussed.
Infecciones inaparentes por Trypanosoma cruzi fueron detectadas, por vez primera, en individuos seropositivos asintomáticos muestreados en una comunidad Yukpa del occidente de Venezuela donde no se ha registrado hasta el presente enfermedad de Chagas. De un total de 173 muestras de suero examinadas 24 (13,9%) fueron registradas como seropositivas utilizando tres pruebas serológicas. Análisis complementarios por IFI revelaron bajos niveles de IgM e IgG cuando las muestras de individuos seropositivos asintomáticos fueron comparadas con casos agudos y crónicos incluidos como controles positivos. La totalidad de perros examinados (8) reveló seropositividad, registrándose niveles de IgG similares a los detectados en el grupo humano. La caracterización molecular de un aislado de T. cruzi obtenido de un espécimen silvestre de Rhodnius pictipes reveló la circulación del linaje 1 (DTU1) en el área de estudio. Se discute la importancia de infecciones asintomáticas por T. cruzi y sus implicaciones epidemiológicas en la comunidad indígena estudiada.
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Humanos , Animais , Doença de Chagas , Epidemiologia , Trypanosoma cruzi , Testes SorológicosRESUMO
Se detecta la presencia de Anaplasma marginale en becerros hijos de vacas con infección asintomática. Ensayos de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) llevados a cabo en muestras de sangre de 31 vacas lactantes, en aparente buen estado físico y sus respectivas crías, revelaron la presencia de ADN específico de A. marginale en el 70 y 40%, respectivamente. La detección de parte del genoma de A. marginale en becerros recién nacidos, hijos de vacas asintomáticas PCR positivas, sugiere la transmisión de la infección madre-hijo por vía transplacentaria. Se discute las implicaciones epizootiológicas de la infección por A. marginale en animales asintomáticos y se advierte sobre la potencialidad de esta forma de transmisión en el mantenimiento del ciclo de este organismo. Se concluye que la transmisión por vía transplacentaria podría ser un evento de frecuente ocurrencia en el área de estudio y se sugiere la utilización de técnicas producto de la nueva biotecnología como la PCR para incrementar la especificidad en el diagnóstico.
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A total of 72 Trypanosoma cruzi isolates from different hosts and geographical regions of western Venezuela, where Chagas disease is endemic, were typed using ribosomal and mini-exon gene markers. The isolates were obtained from wild, peridomestic and domestic sources including triatomine-bugs, human acute chagasic patients and other mammals. Results showed that T. cruzi two major phylogenetic lineages, T. cruzi I and T. cruzi II were present. However, a remarkable predominance of T. cruzi I (96%) over T. cruzi II (4%) was observed. The present results suggest that in western Venezuela circulation of both T. cruzi I and T. cruzi II isolates is independent from the source of isolation and the geographical area where they occur, with predominance of T. cruzi I. The epidemiological significance of the present results is discussed
Un total de 72 aislados de Trypanosoma cruzi obtenidos de diferentes hospedadores y regiones geográficas del occidente de Venezuela, donde la enfermedad de Chagas es endémica, fueron caracterizados genéticamente utilizando marcadores moleculares de los genes ribosomales y del mini-exón. Los aislados fueron obtenidos de fuentes silvestres y domésticas, incluyendo triatominos-vectores, pacientes chagásicos agudos y otros mamiferos. Los resultados mostraron la presencia de los dos linajes reconocidos para T. cruzi (TcI y TcII) en la mayoría de los aislados provenientes de los diferentes hospedadores estudiados. Sin embargo, fue observada una marcada predominancia de T. cruzi I (96%) sobre T. cruzi II (4%). Los presentes resultados sugieren que en el occidente de Venezuela la circulación de aislados de los linajes TcI y TcII es independiente de la fuente biológica de aislamiento y del área geográfica de procedencia, siendo predominante los aislados TcI. Se discute la significación epidemiológica de los presentes resultados
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Animais , Doença de Chagas , Parasitos , Trypanosoma cruzi/genética , Trypanosoma cruzi/patogenicidade , Parasitologia , Saúde PúblicaRESUMO
GPI-anchored proteins from the plasma membrane of Leishmania (Viannia) braziliensis promastigotes were isolated, characterized and their migration pattern compared with those from other Leishmania species. In all cases the SDS-PAGE migration patterns were obtained under reducing and non-reducing conditions, using DL-dithiothreitol (DTT) as a reducer agent. Our results reveal that under reducing conditions the SDS-PAGE migration pattern is modified as a consequence of the disruption of disulphur-bonds and protein transformation. This is demonstrated when in non-reducing conditions the L. (V.) braziliensis-GPI-anchored proteins pattern showed a group of bands over the 100kDa, and two more bands of 52kDa and 50kDa in four different isolates, whereas under reducing conditions the major GPI-anchored protein fractions were detected as bands of 63kDa, 50kDa and an increase of peptides between 34kDa and 22kDa. Similar modifications were detected in the SDS-PAGE migration patterns of GPI-anchored protein fractions from L. (Leishmania) donovani, L. (L.) mexicana and L. (L.) amazonensis run under the same reducing conditions. Antigenic evaluation carried out by Western blot revealed the presence of two very specific L. (V.) braziliensis-GPI-anchored protein bands of 50kDa and 28kDa. These bands were specifically recognized by anti-L. (V.) braziliensis-GPI-anchored protein serum from experimentally immunized animals. These two peptides were not detected when GPI-anchored protein fractions from L. (L.) donovani, L. (L.) mexicana and L. (L.) amazonensis, were challenged with the same anti-serum. The present results lead us to suggest the use of these two peptides as biochemical markers to identify and differentiate leishmaniasis caused by L. (V.) braziliensis. The lack of immunogenicity observed here with the peptide gp63, a very common protein detected in Leishmania species, is considered.
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Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Antígenos de Protozoários , Glicosilfosfatidilinositóis/química , Leishmania braziliensis/imunologia , Proteínas de Membrana , Animais , Anticorpos Antiprotozoários/imunologia , Antígenos de Protozoários/química , Antígenos de Protozoários/imunologia , Antígenos de Protozoários/isolamento & purificação , Biomarcadores , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Glicosilfosfatidilinositóis/metabolismo , Leishmania braziliensis/crescimento & desenvolvimento , Leishmania braziliensis/metabolismo , Leishmaniose Cutânea/diagnóstico , Leishmaniose Cutânea/imunologia , Leishmaniose Cutânea/parasitologia , Proteínas de Membrana/química , Proteínas de Membrana/imunologia , Proteínas de Membrana/isolamento & purificação , CoelhosRESUMO
Se registró un caso infantil de leishmaniasis visceral procedente del caserío Los Pozones, municipio Buchivacoa ubicado al occidente del Estado Falcón, Venezuela, a finales del año 2002. Se presentan resultados de un estudio epidemiológico en la localidad, realizado durante el año siguiente la detección del caso. El estudio incluyó un muestreo serológico a 110 humanos de diversos grupos etarios y a 10 perros, utilizando tres pruebas inmunodiagnósticas (TAD, IFI y ELISA). Además se realizaron capturas de flebotominos en refugios naturales y con trampa lumínica de Shannon cada dos meses durante un año, detectándose la presencia dominante de Lutzomyia evansi (62.7%) sobre Lutzomyia longipalpis (37.3%). La zona de vida donde se enclava la localidad rural estudiada corresponde a un bosque seco espinoso. El estudio serológico arrojó valores de seroprevalencia humana y canina para Leishmania del 17,3% y 50%, respectivamente. Estos hallazgos sugieren la existencia de un nuevo foco de LV en la parte occidental del estado Falcón, Venezuela, el cual requiere más investigación.
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Humanos , Criança , Doenças Endêmicas , Estudos Epidemiológicos , Leishmaniose Visceral , Parasitologia , Medicina Tropical , VenezuelaRESUMO
Tripomastigotes sanguícolas de Trypanosoma vivax y Trypanosoma evansi obtenidos de infecciones experimentales en ovejas y ratones respectivamente, fueron utilizados para purificar y caracterizar proteínas citosólicas mediante el método de partición con Tritón X-114. Los resultados revelan diferencias en los patrones proteicos entre las dos especies. Asimismo, las reacciones antigénicas mediante Western blot utilizando suero de animales naturalmente infectados, permitió discriminar las infecciones entre ambos parásitos. Se sugiere la utilización de esta metodología como una prueba diagnóstica confiable.