RESUMO
Studies were designed to (a) evaluate the mRNA expression of the C-C motif chemokine receptor 2 (CCR2) and its chemokine ligands, as well as genes related to periovulatory events, within the cumulus oocyte complex (COC) and follicle wall after a luteinizing hormone (LH) stimulus in cultured feline antral follicles; (b) assess the immunolocalization of CCR2 and its main ligand (monocyte chemoattractant protein 1, MCP1) within the feline COC; and (c) examine the direct effects of exogenous recombinant MCP1 on mRNA expression of the CCR2 receptor and MCP1 as well as key periovulatory genes in the COC, using a feline COC culture system. Both culture systems were developed by our laboratory and exhibit physiological response to gonadotropin stimuli. In summary, this study demonstrated mRNA expression of CCR2 receptor and its assessed ligands (MCP1, MCP2, MCP3, and MCP4) within the feline COC and follicle antral wall, and a significant increase in CCR2 mRNA by LH within the COC. Also, CCR2 and MCP1 immunoreactivity was observed in the oocyte and cumulus cells of the feline COC. Remarkably, this is the first report, in any species, describing a direct effect of the recombinant MCP1 in the CCR2/MCP1 system within the COC, by increasing the mRNA levels of key genes involved in the ovulatory cascade, as well as its own receptor CCR2. Together, these data suggest that CCR2 receptor signaling in the COC may regulate events critical for promoting cumulus oocyte expansion and/or oocyte maturation.
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Quimiocina CCL2/fisiologia , Células do Cúmulo/metabolismo , Oócitos/metabolismo , Receptores CCR2/fisiologia , Animais , Gatos , Células Cultivadas , Quimiocina CCL2/genética , Células do Cúmulo/citologia , Feminino , Oócitos/citologia , Oogênese/genética , Folículo Ovariano/citologia , Folículo Ovariano/metabolismo , Receptores CCR2/genética , Receptores CCR2/metabolismo , Transdução de Sinais/genéticaRESUMO
In recent years, the use of stem cells for therapeutic purposes has received attention from research groups. In Mexico, the Mexican Official Standard 260-SSAI-2015 regarding the use of stem and progenitor cells for therapeutic and research purposes is in the process of authorization. Even when this has not been approved, an increasing number of establishments are offering medical services involving the use of stem cells for therapeutic purposes without official regulatory authorization. The Mexican Academy of Medicine of Mexico makes its position public in favor of regulating the use of stem cells and embryos for therapeutic and research purposes.
En años recientes, el uso de células troncales con fines terapéuticos ha recibido atención por grupos de investigación. En México está en proceso de autorización la Norma oficial mexicana 260-SSAI-2015, para la disposición de células troncales y progenitoras con fines terapéuticos y de investigación. Aun cuando esta no ha sido aprobada, cada vez más establecimientos ofrecen servicios médicos con la finalidad de usar células madres con fines terapéuticos sin contar con las autorizaciones sanitarias oficiales. La Academia Nacional de Medicina de México da a conocer su posición acerca de la regulación sobre el uso de células troncales y embriones para fines terapéuticos o de investigación.
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Pesquisa com Células-Tronco , Transplante de Células-Tronco/métodos , Células-Tronco/citologia , Academias e Institutos , Pesquisa Biomédica/métodos , Humanos , MéxicoRESUMO
There are decisions at the end of life that currently are relevant as humanistic values. Respect for human life and dignity are part of human rights. The National Academy of Medicine of Mexico declares its posture about end-of-life decisions that include treatment refusal, limitation of the therapeutic effort, advance directives and palliative sedation, among others, with the purpose to favor a peaceful death.
Hay decisiones relacionadas con el final de la vida que actualmente son relevantes como valores humanísticos. El respeto y la dignidad de la vida humana están incluidos en los derechos humanos. La Academia Nacional de Medicina de México declara su postura acerca de las decisiones sobre el final de la vida que incluyen rechazo a un tratamiento, limitación del esfuerzo terapéutico, voluntad anticipada y sedación paliativa, entre otros, con la finalidad de propiciar una muerte en paz.
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Tomada de Decisões , Direitos Humanos , Pessoalidade , Assistência Terminal/métodos , Academias e Institutos , Diretivas Antecipadas , Humanos , México , Cuidados Paliativos/métodos , Recusa do Paciente ao TratamentoRESUMO
PURPOSE: We hypothesized that the chemokine SDF1/CXCR4 system was present in feline cumulus-oocyte complexes (COCs) and that COCs cultured with SDF1 would directly upregulate gene expression in the ovulatory cascade. METHODS: Ovaries (n = 50) were obtained from adult domestic cats during the breeding season and COCs were recovered from antral follicles. Because IVM media triggers cumulus-oocyte expansion, culture conditions needed to be optimized to study periovulatory genes. After optimization, the effects of 25 ng/ml SDF1 and the CXCR4 inhibitor were examined in a COC culture for 3, 12, and 24 h. RESULTS: MEM-hepes with 1% of charcoal stripped-FBS was the optimized culture medium, assessed by the expansion of COCs at 24 h in the gonadotropin (GNT) group but not in the media with serum alone. The mRNA expression of HAS2, TNFAIP6, PTX3, and AREG peaked at 3 h in GNT group as compared to all other groups (p < 0.05). COCs cultured with SDF1 showed increased HAS2 and TNFAIP6 mRNA expression at 3 h compared to negative controls and to the CXCR4 inhibitor group. CXCR4 and SDF1 immunostaining was present in both cumulus cells and the oocyte. CONCLUSIONS: These results demonstrate that GNT stimulation upregulates key periovulatory genes and expansion in feline COCs from antral follicles, and support the use of this culture system to examine molecular processes within the COC. In addition, SDF1 directly promotes key periovulatory genes in feline COCs, suggesting that the SDF1-CXCR4 pathway may extend its function beyond a chemoattractant, and may play a direct role within the COC.
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Quimiocina CXCL12/metabolismo , Células do Cúmulo/fisiologia , Regulação da Expressão Gênica , Oócitos/fisiologia , Ovulação/genética , Animais , Gatos , Técnicas de Cultura de Células/métodos , Quimiocina CXCL12/farmacologia , Meios de Cultura/química , Meios de Cultura/farmacologia , Células do Cúmulo/citologia , Células do Cúmulo/efeitos dos fármacos , Feminino , Regulação da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Gonadotropinas/farmacologia , Oócitos/citologia , Oócitos/efeitos dos fármacos , Receptores CXCR4/metabolismoRESUMO
PURPOSE: The current study was designed to evaluate the response of individual intact antral follicles from adult female domestic cats to a luteinizing hormone (LH) stimulus in vitro by assessing cumulus-oocyte expansion (C-OE) and steroid production. METHODS: C-OE and steroid levels (estradiol [E2] and progesterone [P4]) obtained from individual antral feline follicles (n = 366 follicles; n = 56 cats) were analyzed after 12 or 24 h of culture in the presence or absence of LH (low [3.4 ng/ml] or high [100 ng/ml]). RESULTS: At the end of the culture, the highest percentage of expanded cumulus-oocyte complexes (COCs) was observed in the LH groups at 12 or 24 h in comparison to their controls (p < 0.001). There was a significant increase in expanded COCs when comparing LH concentrations (high vs. low) at 12 or 24 h. Higher levels of both E2 and P4 were observed in the media from antral follicles after 12 and 24 h of culture in the presence of LH (both concentration, p < 0.05). There was no association between hormone levels and follicle diameter; high variability was observed in the steroid levels produced by antral follicles within all treatment groups. CONCLUSIONS: These data indicate, for the first time, that feline antral follicles (0.5-2 mm) from different stages of the natural estrous cycle can be cultured and will respond to an LH stimulus, based on an increase in steroid levels as well as C-OE after 12 or 24 h in culture.
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Folículo Ovariano/fisiologia , Ovário/fisiologia , Animais , Gatos , Células Cultivadas , Estradiol/metabolismo , Feminino , Hormônio Luteinizante/farmacologia , Oócitos/citologia , Oócitos/fisiologia , Folículo Ovariano/efeitos dos fármacos , Ovário/citologia , Progesterona/metabolismo , Proteínas Recombinantes/farmacologiaRESUMO
A doença de Chagas é um problema importante de súde pública no México, onde estimativas recentes demonstraram a prevalência de 540 mil indivíduos infectados com o Trypanosoma cruzi. Neste trabalho deterimnou-se a sororreatividade ao T. cruzi em 2.210 doadores de sangue, no perído de 1998-2000, de 28/31 estados de México, bem como da cidade do México. Todos os soros foram testados por meio de hemaglutinação indireta e do imunoensaio enzimático (ELISA. Aplicou-se, na ocasião, um questionário para obter dados sociodemográficos. Em seguida, os indivíduos foram levados a identificar visualmente o vetor (Triatoma pallidipennis) e a assinar uma carta de consentimento. Dos 2.210 casos soros, 151 foram positivos em ambos os testes. Os indivíduos eram provenientes de 12 estados e da cidade do México, sendo 85,4 por cento homens e 14,6 por cento mulheres. Somente 14 por cento (6/151) identificaram o vetor. Essa elevada soroprevalência foi atribuída não só ao local inde foi realizado o estudo, Hospital General de México, um centro nacional de atenção à saúde, que assiste a população de todo o país, masa também ao elevado movimento migratório das áreas endêmicas para a cidade do México.
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Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Doadores de Sangue , Doença de Chagas/epidemiologia , Trypanosoma cruziRESUMO
Background: Epstein-Barr virus/EBV and HHV-6 are frequently found in Hodgkin's disease (HD) and to a certain extent in Kikuchi-Fujimoto's disease (KFD). Both viruses are apparently related to proliferative and/or apoptotic processes as represented by HD or KFD respectively. Objective: To correlate frequency and location of antigen and DNA expression of both viruses in HD or KFD tissue sections in relation to markers for cell proliferation and apoptosis. Design: Archival lymph node biopsies from 84 patients from the Hospital General de Mexico and 26 from the Clinic of the University of Cologne, Germany with HD and 14 with KFD were investigated immunhistologically for viral antigen expression (EBV LMP-1: HHV-6 gp110/60), Ki67/PCNA marker for proliferation (MIB1)/p53 and WAF1 for apoptosis. Viral ADN was shown by in situ hybridization. Apoptosis was determined by ISEL and TUNEL techniques. Results: HD is frequently infected by both EBV and HHV-6 while KFD tends to be infected only by HHV-6. EBV and HD is present in HD cells and Reed-Sternberg cells, HHV-6 preferentially in lymphocytes and in histiocytes in both HD and in KFD. Proliferation marker is found in both diseases. Apoptosis is demonstrated preferentially in KFD and to a lesser extent also in HD. Conclusion: Although EBV and HHV-6 may not be openly oncogenic in HD and KFD, they may well influence the course of the disease. Dual infection in HD appears to support proliferative processes,i.e. a redominance of EBV effects. Single infection with HHV-6 in KFD instead appears to favor an apoptotic course. These effects are according to the literature possibly cytokine-mediated.
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Doença de Hodgkin , Herpesvirus Humano 6 , Herpesvirus Humano 4 , Herpes Zoster , Vírus , Biópsia , DNA , Células de Reed-Sternberg , Hibridização In Situ , Antígeno Nuclear de Célula em Proliferação , Linfadenite Histiocítica Necrosante , Marcação In Situ das Extremidades Cortadas , Linfonodos , Antígenos ViraisRESUMO
Con base en alteraciones mielodisplásicas y mieloproliferativas observadas en pacientes con enfermedades linfoproliferativas asociadas a virus herpes linfotrópicos humanos, se realizaron estudios de escrutinio para demostrar eventualmente la reactivación de éstos y su posible implicación en la patogenia y curso de síndrome mielodisplásico (SMD) y de síndrome mieloproliferativo (SMP). Se investigaron 74 biopsias de médula ósea y sueros de pacientes con SMD y 49 biopsias de médula ósea y 36 sueros de pacientes con leucemia mieloide crónica (LMC), a 13 casos de México no se les realizó serología. El diagnóstico y clasificación se hizo según los criterios del Grupo Franco-Americano-Británico (FAB). Se realizaron pruebas séricas de anticuerpos contra antígeno de la cápsula viral (VCA) y antígeno temprano (EA) del VEB con las técnicas de ELISA y de inmunofluorescencia y de HHV-6 y HHV-7 mediante inmunofluorescencia. La inmunohistología se realizó con la técnica de APAAP (fosfatasa alcalina-antifosfatasa alcalina) para expresión antigénica de los 3 virus y por anticuerpos monoclonales. Se determinó proliferación celular con APAAP y con anticuerpo monoclonal contra el antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA). Se encontraron títulos de IgG anti-VEB-EA en 62 por ciento de los casos con SMD y en 33 por ciento con LMC, títulos de IgG HHV-6 elevados en 19 por ciento de los casos con SMD y en 9.3 por ciento de LMC y los de HHV-7 elevados en el 37.8 por ciento y 13.9 por ciento, respectivamente. Los títulos de IgM fueron negativos para los tres virus. La expresión de antígeno en la médula ósea fue positiva en el 76 por ciento de SMD a VEB-EA, 48.6 por ciento a HHV-6 p41 y 37.8 por ciento a HHV-7. Los casos de LMC expresaron VEB-EA en el 77 por ciento, HHV-6 en el 54.5 por ciento y HHV-7 en el 21.8 por ciento.
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Transtornos Mieloproliferativos/complicações , Transtornos Mieloproliferativos/fisiopatologia , Defeitos do Tubo Neural/complicações , Defeitos do Tubo Neural/fisiopatologia , Técnicas In Vitro , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/fisiopatologia , Herpesvirus Humano 6/patogenicidade , Herpesvirus Humano 7/patogenicidade , Herpesvirus Humano 4/patogenicidadeRESUMO
De mayo de 1994 a mayo de 1995 se atendieron en el Banco de Sangres del Hospital General de México a 18,491 hemodisponentes; de éstos, 317 (1.71 por ciento) fueron positivos a brucela confirmados por la prueba de rosa de Bengala. El estudio se realizó debido a la alta detección de disponentes asintomáticos positivos a brucela. Objetivo: Conocer la prevalencia de brucela positiva por serología en disponentes de sangre. Conocer el medio por el cual se infectaron. Material y métodos: Muestra de 228 hemodisponentes que cumplieron con los criterios de la Norma Oficial Mexicana (NOM-003-SSA2 1993), positivos a brucela, a los cuales se les realizó encuesta y valoración clínica. Resultados: De 9,590 disponentes, 228 fueron positivos, con una prevalencia de 2.8 por ciento; sólo uno presentó manifestaciones clínicas, el cual se perdió durante el seguimiento. La brucelosis resultó ser más frecuente en hombres en edad productiva; predominó en el estado de México; en el Distrito Federal, la delegación más afectada es Iztapalapa. El medio contaminante en general es leche y sus derivados, a pesar de ser comercial. El caso clínicamente positivos, consumió leche bronca y derivados de cabra. Conclusiones: Se requiere la confirmación adicional con 2 mercapto-etanol para definir brucelosis activa, llevar una conducta más conservadora en la eliminación de sangre de donadores serologicamente positivos a brucela y clínicamente senos. Se debe considerar al Distrito Federal y al estado de México como zonas endémicas de brucela debido a la migración
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Humanos , Masculino , Feminino , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Rosa Bengala , Bancos de Sangue/estatística & dados numéricos , Doadores de Sangue/estatística & dados numéricos , Brucelose/diagnóstico , Brucelose/patologia , Brucelose/sangue , Rifampina/uso terapêutico , Doença do Leite/patologia , Combinação Trimetoprima e Sulfametoxazol/uso terapêutico , Distribuição por Idade , Testes Sorológicos/métodosRESUMO
Se estudiaron 107 pacientes con SFC de entre 7 y 76 años de edad (promedio 41.8 años). 67 fueron del sexo femenino y 47 del masculino (relación F/M 1.27L1). Los períodos de seguimiento duraron desde 10 meses hasta 7.5 años. Los pacientes fueron reclutados mediante un cuesitonario (anexo) adecuando los criterios de Holmes para SFC, se realizó además examen clínico, biometría hemática, química sanguínea, fenotipificación de linfocitos y control de otros parámetros inmunológicos, así como estudios para detección de infecciones. En un paciente se diagnosticó síndrome miálgico-eosinofílico, 6 pacientes presentaron deficiencia de vitamina D3 (25-OH), cuyos síntomas se revirtieron con tratamiento de reposición. De los 100 pacientes restantes, 4 habían tenido episodios psiquiátricos previos. En 67 por ciento de los pacientes con SFC se comprobó infección persistente o recurrente, otro 16 por ciento sugería infección. La infección activa detectada con más frecuencia fue por virus herpes humano-6 (HHV-6) en 38.6 por ciento de los casos, seguida por infección por virus de Epstein-Barr (VEB) en 19.6 por ciento, menos frecuente fue la detección de virus herpes simple (VHS), chlamydia, campylobacter, coxsackie, citomegalovirus (CMV), yersinia o cándida. En el 46 por ciento de los pacientes se encontraron signos de inmunodeficiencia, mientras que en un 20 por ciento adicional la evidencia fue menos clara, consistiendo por ejemplo en disminución de la estimulación linfocitaria (46 por ciento), baja cantidad de células asesinas naturales (NK) (35 por ciento) y relación de células CD4/CD8 disminuída (21 por ciento). Del 14 al 21 por ciento de los pacientes presentaron datos de laboratorio de infección, alergias o de alteraciones autoinmunes, incluyendo niveles aumentados de factor de necrosis tumoral (sTNFÓ) en 41 por ciento, proteína C reactiva (CRP) positiva en 19.4 por ciento e incremento en los niveles de IgE (14.3 por ciento). Los de pacientes con SFC sin patogénesis identificable. Estos datos confirman el concepto de Demitrak acerca del SFC. De que no se trata de una entidad con una sola etiología sino que existen varios y diversos eventos que coinciden parcialmente y comparten las vías fisiopatológicas que finalmente resultan en este síndrome clínico