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Aliarcobacter butzleri (A. butzleri) is an emergent zoonotic food-related pathogen that can be transmitted through the consumption of poultry meat. Data regarding the pathogenicity and resistance of A. butzleri are still scarce, and the presence of virulent MDR strains of this zoonotic pathogen in poultry meat is an issue of particular concern to public health. This study aimed to characterize the pathogenicity and antimicrobial resistance profiles of A. butzleri strains isolated from poultry meat sold at retail markets in São Paulo, Brazil. The minimum inhibitory concentrations of 27 strains were determined using the broth microdilution method. The results showed that 77.7% of the isolates were resistant to clindamycin, 62.9% to florfenicol, 59.2% to nalidixic acid, 11.1% to azithromycin, 7.4% to ciprofloxacin and telithromycin, and 3.7% to erythromycin and tetracycline, although all were susceptible to gentamicin. Moreover, 55.5% of the virulent isolates were also multidrug-resistant (MDR). Three strains were selected for pathogenicity tests in vitro and in vivo. The tested strains expressed weak/moderate biofilm production and showed a diffuse adhesion pattern (3 h) in HeLa cells and toxicity in Vero cells (24 h). Experimental inoculation in 11-week-old chicks induced a transitory inflammatory enteritis. Intestinal hemorrhage and destruction of the intestinal crypts were observed in the rabbit ileal loop test. Considering the fact that Brazil is a major exporter of poultry meat, the data from this study point to the need of improvement of the diagnostic tools, as well as of the adoption of surveillance guidelines and more specific control strategies to ensure food safety, reducing the presence of pathogenic MDR strains in broilers.

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Salmonella serovars Heidelberg and Minnesota encoding antimicrobial resistance to third-generation cephalosporins and fluoroquinolones are often detected in poultry/poultry meat. We analysed the genomes of 10 Salmonella Heidelberg (SH) and 4 Salmonella Minnesota (SM) from faecal isolates of Brazilian poultry. These featured virulent and multidrug-resistant characteristics, with AmpC beta-lactamase (blaCMY-2 ) predominance (9/14), for all SM (4/4) and some SH (3/10) located on IncC plasmid replicons. IncC carrying blaCTX-M-2 was only detected among SH (3/10). Mutation in the gyrA/parC genes was present in all SH, whereas SM harboured parC mutation plus qnrB19 on ColRNAI plasmids (3/4). In silico resistance overall corroborated with phenotypic results. Core genome phylogenies showed close clustering and high similarities between the Brazilian and poultry meat/food isolates from Europe, and to human isolates from European countries with documented import of Brazilian poultry meat. Conjugation assays with SM successfully transferred blaCMY-2 , and qnrB19 to an Escherichia coli recipient. The findings reinforce the ongoing antimicrobial resistance acquisition of SH and Minnesota and the risks for disseminating resistant strains and/or mobile elements which may increasingly affect importing countries and the need for controlling AMR in major poultry-exporting countries like Brazil.

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Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) constitutes one of the main causes of mortality in children in low- to medium-income countries. Diverse animal species have been linked as reservoirs, including birds. The aim of this study was to describe the genomic and phylogenetic features of an EPEC recovered from a pet macaw and further characterizing the macro and microscopic lesion in a rabbit ileal loop experimental model. The isolate was whole-genome sequenced (WGS) obtaining its genotypic and phenotypic in silico characteristics and inoculated in a rabbit experimental model with subsequently evaluating the strain's pathogenicity by scanning electron microscopy (SEM) and histopathology. The isolate was characterized as O109:H21-B1-ST40 typical EPEC, harboring several virulence factors of diarrheagenic E. coli. The macaw EPEC genome was located in a monophyletic clade of human and animal ST40 EPEC sequences. In vivo inoculation demonstrated severe hemorrhage with SEM and histopathological analysis confirming these lesions to be associated with intra-epithelial lymphocytes. Therefore, the isolate not only shared several genotypic and phylogenetic similarities with EPEC that affects humans and animals, but was able to induce severe tissue injury in a mammal model. These findings highlight the underrated role of pet birds as zoonotic reservoirs and the diversity in virulence factors being unraveled by new WGS studies.

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A microbiota intestinal de psitacídeos é constituida principalmente por bactérias Gram positivas e tem menor prevalência de Gram negativas. Embora existam poucos estudos descrevendo a microbiota destas aves, uma série de agentes bacterianos com potencial zoonótico pode ser transmitida das aves para os humanos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de bactérias Gram negativas em um criadouro de papagaios do congo (Psittacus erithacus). Foram coletadas e analisadas amostras de fezes e de coana de 24 animais. Os resultados obtidos demonstraram a presença de bactérias Gram negativas nas fezes (45,8%) e na coana (62,5%). Foi isolado um total de 26 colônias bacterianas, com predomínio de agentes da família Enterobacteriaceae (21/26). As espécies encontradas foram Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis e Aeromonas caviae. Os dados deste trabalho revelaram uma elevada frequência de bactérias Gram negativas na microbiota destas aves. Estudos futuros serão realizados para avaliar a virulência e a resistência antimicrobiana, determinando o impacto potencial da presença destes agentes para a saúde dos animais e os riscos zoonóticos.(AU)

The intestinal microbiota of parrots consists mainly by Gram positive bacteria and has a lower prevalence of Gram negative. Although there are few studies describing the microbiota of these birds, many of these bacteria have a zoonotic potential and can be transmitted from birds to humans. The aim of this study was to investigate the presence of Gram negative in congo parrots (Psittacus erithacus). Fecal and coana samples collected from 24 birds were analyzed. The results showed the presence of Gram negative bacteria in feces (45.8%) and coana (62.5%). A total of 26 strains were isolated, with predominance of members of the Enterobacteriaceae family (21/26). The species identified were Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis and Aeromonas caviae. The data of this study revealed a high frequency of Gram negative bacteria in the microbiota of these birds. Future studies will be conducted to assess virulence and antimicrobial resistance profile, looking for the potential impact of these agents over animal health and zoonotic risks.(AU)

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A microbiota intestinal de psitacídeos é constituida principalmente por bactérias Gram positivas e tem menor prevalência de Gram negativas. Embora existam poucos estudos descrevendo a microbiota destas aves, uma série de agentes bacterianos com potencial zoonótico pode ser transmitida das aves para os humanos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de bactérias Gram negativas em um criadouro de papagaios do congo (Psittacus erithacus). Foram coletadas e analisadas amostras de fezes e de coana de 24 animais. Os resultados obtidos demonstraram a presença de bactérias Gram negativas nas fezes (45,8%) e na coana (62,5%). Foi isolado um total de 26 colônias bacterianas, com predomínio de agentes da família Enterobacteriaceae (21/26). As espécies encontradas foram Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis e Aeromonas caviae. Os dados deste trabalho revelaram uma elevada frequência de bactérias Gram negativas na microbiota destas aves. Estudos futuros serão realizados para avaliar a virulência e a resistência antimicrobiana, determinando o impacto potencial da presença destes agentes para a saúde dos animais e os riscos zoonóticos.

The intestinal microbiota of parrots consists mainly by Gram positive bacteria and has a lower prevalence of Gram negative. Although there are few studies describing the microbiota of these birds, many of these bacteria have a zoonotic potential and can be transmitted from birds to humans. The aim of this study was to investigate the presence of Gram negative in congo parrots (Psittacus erithacus). Fecal and coana samples collected from 24 birds were analyzed. The results showed the presence of Gram negative bacteria in feces (45.8%) and coana (62.5%). A total of 26 strains were isolated, with predominance of members of the Enterobacteriaceae family (21/26). The species identified were Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis and Aeromonas caviae. The data of this study revealed a high frequency of Gram negative bacteria in the microbiota of these birds. Future studies will be conducted to assess virulence and antimicrobial resistance profile, looking for the potential impact of these agents over animal health and zoonotic risks.

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La investigación ha demostrado que existe un aumento em la viabilidad celular cuando se produce un aumento en el conteo de células somáticas (CCS) en infecciones de la glándula mamaria en animales. El principal microorganismo aislado en la mastitis subclínica en el ganado caprino es Staphylococcus spp. Los objetivos de este estúdio son determinar el CCS, células viables y relacionar los con Staphylococcus spp. aislado de las muestras de leche de cabras con mastitis subclínica. Se cosecharon três alícuotas de las muestras de leche de cabras reactivas para CMT (CaliforniaMastitis Test) para la realización de la viabilidad celular, la microbiología y de CCS. Se determino la viabilidad de las células después de la centrifugación de las muestras de leche y la visualización de las células bajo un microscópio, utilizando colorante azul de Trypan, y la cantidad de CCS a través del equipo de citometría de flujo. De las muestras, 104 no estaban aislando microorganismos y 110 mostraron aislamiento de Staphylococcus spp., de los cuales el detectado con mayor frecuencia fueron: S. epidermidis, S. intermedius y S. lugdunensis. Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre el CCS y la viabilidad celular de las muestras en las que no había aislamiento de Staphylococcus spp. y muestras sin crecimiento bacteriano, que mostraron un aumento en CCS y la viabilidad celular en las muestras de leche de cabras con mastitis subclínica causada por Staphylococcus spp.(AU)

Research has shown that there is an increase in cell viability when a growth in somatic cell count (SCC) in infections of the mammary gland occurs. The main microorganism isolated from subclinical mastitis in goats is Staphylococcus spp. The aims of this study were determined SCC, viable cells and relate them with Staphylococcus spp. isolated from milk samples of goats with subclinical mastitis. Three aliquots of milk samples from goats reagents to CMT test (California Mastitis Test) were collected for performing cell viability, microbiology and SCC. Cell viability, after centrifugation of milk samples and viewing the cells under a microscope, using Trypan blue dye, and the amount of SCC, through the flow cytometry equipment, were determinated. A total of 104 samples had no isolation of microorganisms and 110 showed isolation of Staphylococcusspp., of which the most frequently detected were: S. epidermidis, S. intermedius and S. lugdunensis. There was a statistically significant difference between SCC and cell viability of samples in which there was isolation of Staphylococcus spp. and samples without bacterial growth, that showed an increase in SCC and cell viability in milk samples of goats with subclinical mastitis caused by Staphylococcus spp.(AU)

Pesquisas têm demonstrado que há uma elevação na viabilidade celular quando ocorre aumento na contagem de células somáticas (CCS) em infecções da glândula mamária em animais. O principal micro-organismo isolado em mastite subclínica dos caprinos é Staphylococcus spp. Os objetivos do presente estudo foram determinar a CCS, células viáveis e relacioná-las com Staphylococcus spp. isolados de amostras de leite de cabras com mastite subclínica. Foram colhidas três alíquotas de amostras de leite de cabras reagentes ao teste do CMT (CaliforniaMastitis Test) para a realização da viabilidade celular, exame microbiológico e CCS. Determinou-se a viabilidade celular, após centrifugações das amostras de leite e visualização das células em microscópio, utilizando o corante azul de Trypan e a quantidade de CCS, utilizando equipamento de citometria de fluxo. Das amostras analisadas, 104 não tiveram isolamento de micro-organismos e 110 apresentaram isolamento de Staphylococcus spp., dos quais os mais frequentemente detectados foram: S. epidermidis, S. intermedius e S. lugdunensis. Foi observada diferença estatisticamente significante entre a CCS e a viabilidade celular das amostras nas quais houve isolamento de Staphylococcus spp. e as amostras sem crescimento bacteriano, o que demonstrou um aumento da CCS e da viabilidade celular nas amostras de leite de cabras com mastite subclínica por Staphylococcus spp.(AU)

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Although Brazil has a great bird diversity, information on the health status of free living psittacine is scarce. The aim of this study was to determine the prevalence of endoparasites and the ratio of gram-negative versus gram-positive bacteria in the feces of free-living adult Hyacinth and Green-winged macaws. Fecal samples were collected placing camouflaged sheet covers on bird foraging areas. Fifty-five swabs were evaluated by gram staining technique and 101 fecal samples were analyzed using flotation and centrifugation methods. None of the samples presented parasites or ova. The presence of gram-negative bacteria was detected in 1.8% of the fecal samples. These results suggest that parasites and gram-negative bacteria may be transient in the gastrointestinal tract of healthy free-living psittacine birds. This situation is quite different from what is observed for birds in captivity, where stressful events and improper husbandry facilitate the dysbiosis and high parasite loads, with an imbalance in the host-parasite relationship.

Embora o Brasil tenha uma grande diversidade de aves, as informações sobre o estado sanitário de psitacídeos de vida livre são escassas. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência de endoparasitas e a relação entre bactérias gram-negativas e gram-positivas nas fezes de Arara-azuis e Araras-vermelhas-grandes adultas em vida-livre. Amostras de fezes foram coletadas empregando-se lonas camufladas onde as aves se reuniam para forragear. Cinquenta e cinco esfregaços foram avaliados pela técnica de gram e 101 amostras de fezes foram analisadas pelos métodos de flutuação e centrífugo-flutuação.  Nenhuma amostra foi positiva para a presença de ovos ou formas adultas de parasitas. A presença de bactérias gram-negativas foi detectada em 1.8% das amostras fecais. Esses resultados sugerem que parasitas e bactérias gram-negativas podem ser apenas transientes no trato gastrointestinal de psitacídeos saudáveis de vida livre. Essa situação é bastante diversa do que ocorre em cativeiro, onde situações de estresse e manejo inadequado facilitam a disbiose e o aumento das cargas parasitárias, com um desequilíbrio na relação hospedeiro-parasita.

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Pesquisas têm demonstrado que há uma elevação na viabilidade celular quando ocorre um aumento na contagem de células somáticas (CCS) em infecções da glândula mamária. O principal microrganismo isolado em mastite subclínica dos caprinos é o Staphylococcus spp. Assim, os objetivos do presente estudo foram determinar a contagem de células somáticas e células viáveis e relacioná-las com os Staphylococcus spp. isolados de amostras de leite de cabras com mastite subclínica. Foram colhidas três alíquotas de amostras de leite de cabras reagentes ao teste do CMT (California Mastitis Test) para a realização da viabilidade celular, exame microbiológico e CCS. Determinou-se a viabilidade celular, após centrifugações das amostras de leite e visualização das células em microscópio, utilizando o corante azul de Trypan e a quantidade de CCS, através do equipamento de citometria de fluxo. Das amostras analisadas, 104 não tiveram isolamento de microrganismos e 110 apresentaram isolamento de Staphylococcus spp., sendo os mais detectados: S. epidermidis, S. intermedius e S. lugdunensis. Observou-se diferença estatisticamente significante entre a CCS e a viabilidade celular das amostras nas quais houve isolamento de Staphylococcus spp. e as amostras sem crescimento bacterian

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Although Brazil has a great bird diversity, information on the health status of free living psittacine is scarce. The aim of this study was to determine the prevalence of endoparasites and the ratio of gram-negative versus gram-positive bacteria in the feces of free-living adult Hyacinth and Green-winged macaws. Fecal samples were collected placing camouflaged sheet covers on bird foraging areas. Fifty-five swabs were evaluated by gram staining technique and 101 fecal samples were analyzed using flotation and centrifugation methods. None of the samples presented parasites or ova. The presence of gram-negative bacteria was detected in 1.8% of the fecal samples. These results suggest that parasites and gram-negative bacteria may be transient in the gastrointestinal tract of healthy free-living psittacine birds. This situation is quite different from what is observed for birds in captivity, where stressful events and improper husbandry facilitate the dysbiosis and high parasite loads, with an imbalance in the host-parasite relationship.(AU)

Embora o Brasil tenha uma grande diversidade de aves, as informações sobre o estado sanitário de psitacídeos de vida livre são escassas. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência de endoparasitas e a relação entre bactérias gram-negativas e gram-positivas nas fezes de Arara-azuis e Araras-vermelhas-grandes adultas em vida-livre. Amostras de fezes foram coletadas empregando-se lonas camufladas onde as aves se reuniam para forragear. Cinquenta e cinco esfregaços foram avaliados pela técnica de gram e 101 amostras de fezes foram analisadas pelos métodos de flutuação e centrífugo-flutuação.  Nenhuma amostra foi positiva para a presença de ovos ou formas adultas de parasitas. A presença de bactérias gram-negativas foi detectada em 1.8% das amostras fecais. Esses resultados sugerem que parasitas e bactérias gram-negativas podem ser apenas transientes no trato gastrointestinal de psitacídeos saudáveis de vida livre. Essa situação é bastante diversa do que ocorre em cativeiro, onde situações de estresse e manejo inadequado facilitam a disbiose e o aumento das cargas parasitárias, com um desequilíbrio na relação hospedeiro-parasita.(AU)

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Um componente da conservação de animais selvagens é a relocação de espécies comumente referida como projetos de soltura. Para que esta seja bem sucedida os candidatos do projeto devem estar livres de patógenos considerados de importância para a espécie. Segundo a Instrução Normativa 179 oficializada pelo IBAMA em 25/06/2008, determinou-se a realização de exames laboratoriais como medidas a se prevenir a introdução de agentes infecciosos no ambiente, e garantir a sobrevivência a longo prazo dos animais em questão. No Brasil encontra-se a maior quantidade em espécies de psitacídeos, e das 84 espécies, 13 são vulneráveis a criticamente ameaçadas de extinção. Diversos projetos de relocação de animais silvestres, incluindo vários já bem sucedidos com psitacídeos, vêm sido realizados em território nacional além dos existentes do exterior. O Papagaio-de-peito-roxo (Amazona vinacea) tem suas populações severamente afetadas, sendo classificada no estado de São Paulo como criticamente ameaçada e como ameaçada a nível mundial. Apesar das dificuldades para a conservação dos recursos naturais, existem remanescentes de habitat protegido e em regeneração que podem abrigar espécies que historicamente ocupavam estes locais, de maneira que projetos de reintrodução visando A.vinacea como espécie bandeira em São Paulo e em Santa Catarina, foram contatados para realizar a pesquisa sanitária prévia à soltura. [...] Tendo em vista que para obter um mínimo de segurança no projeto de relocação no Brasil depende-se quase exclusivamente da iniciativa privada, convênios com universidades tornam-se não apenas uma necessidade, mas também uma oportunidade para troca em direção a um objetivo em comum e geração de conhecimento científico.

One component in the conservation of wild animals is the relocation of species, commonly referred as release projects. In order for this attempt to be successful the candidates must be clear of pathogens of significance for the species. According to the normative rule 179 established by the IBAMA in 25/06/2008, it was determined that a series of laboratorial exams should be performed in order to prevent the introduction of infectious agents in the environment and guarantee the long term survival of the animals. The largest number of psittacine species is found in Brazil accounting for 84 species, with 13 of these classified as vulnerable to critically endangered. Several relocation projects with wild animals, including several well succeeded with psittacines have been taking place on a national scale besides others being carried out around the world. The Vinaceous Amazon (Amazona vinacea) have had its populations severely affected being classified as critically endangered in the state of São Paulo and globally threatened. Although there are challenges to conserve natural resources, available remnants of protected and regenerating habitat can be found and could support species that historically inhabited these sites, hence reintroduction projects with A.vinacea as a flagship species in the state of São Paulo and Santa Catarina were contacted to perform a health survey previously to the releases. [...] Taking into account that to obtain a minimum in terms of safety for a relocation project in Brazil one is almost exclusively dependent on private parties, cooperation with universities are not only a necessity but also an opportunity for exchanges toward a common goal besides generating scientific knowledge.

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