RESUMO
Visceral leishmaniasis is a high-burden disease caused by parasites of the Leishmania genus. The K39 kinesin is a highly antigenic protein of Leishmania infantum, but little is known about the immune response elicited by this antigen. We evaluated the humoral immune response of female BALB/c mice (n = 6) immunized with the rK39-HFBI construct, formed by the fusion of the K39 antigen to a hydrophobin partner. The rK39-HFBI construct was administered through subcutaneous, oral, and intranasal routes using saponin as an adjuvant. We analyzed the kinetics of IgG, IgG1, and IgG2a production. The groups were then challenged by an intravenous infection with L. infantum promastigote cells. The rK39-HFBI antigen-induced high levels of total IgG (p < 0.05) in all groups, but only the subcutaneous route was associated with increased production of IgG1 and IgG2a 42 days after immunization (p < 0.05), suggesting a potential secondary immune response following the booster dose. There was no reduction in the splenic parasite load; thus, the rK39-HFBI failed to protect the mice against infection under the tested conditions. The results presented here demonstrate that the high antigenicity of the K39 antigen does not contribute to a protective immune response against visceral leishmaniasis.
RESUMO
A dengue é um problema grave para a saúde pública no Brasil e vários fatores agravam a situação, um deles é que a dengue pode ser confundida com outras doenças infecciosas. Este trabalho teve como objetivo a produção de um polipetídeo quimérico do vírus da dengue para a produção de um kit de imunodiagnóstico de baixo custo. Foi usada a proteína E do envelope viral do domínio III, fusionada ao Polipeptídeo Elastina-Like (ELP), a expressão foi feita em N. benthamiana. Os resultados do Western blotting mostraram que a fusão com a cauda de ELP foi melhor expressa do que a não fusionada. O teste de ELISA apresentou diferença significativa nas médias de absorbância entre pacientes positivos e negativos para dengue e de diferenciar pacientes com dengue positivo e de zika positivo, cujo os resultados de absorbâncias se equipararam aos resultados de pacientes negativos.
Dengue is a serious problem for public health in Brazil and several factors aggravate the situation, one of which is that dengue can be mistaken for other infectious diseases. This work aimed at the production of a chimeric dengue virus polypeptide for the production of a low cost immunodiagnostic kit. Domain E viral envelope protein E, fused to the Elastin-Like Polypeptide (ELP), was used in N. benthamiana. Western blotting results showed that fusion with the ELP tail was better expressed than the non-fused. The ELISA test showed a significant difference in the absorbance means between positive and negative patients for dengue and to differentiate patients with dengue positive and positive zika, whose absorbance results were similar to the results of negative patients.
Assuntos
Dengue/diagnóstico , Vírus da Dengue/imunologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Testes Imunológicos/métodosRESUMO
A dengue é um problema grave para a saúde pública no Brasil e vários fatores agravam a situação, um deles é que a dengue pode ser confundida com outras doenças infecciosas. Este trabalho teve como objetivo a produção de um polipetídeo quimérico do vírus da dengue para a produção de um kit de imunodiagnóstico de baixo custo. Foi usada a proteína E do envelope viral do domínio III, fusionada ao Polipeptídeo Elastina-Like (ELP), a expressão foi feita em N. benthamiana. Os resultados do Western blotting mostraram que a fusão com a cauda de ELP foi melhor expressa do que a não fusionada. O teste de ELISA apresentou diferença significativa nas médias de absorbância entre pacientes positivos e negativos para dengue e de diferenciar pacientes com dengue positivo e de zika positivo, cujo os resultados de absorbâncias se equipararam aos resultados de pacientes negativos.(AU)
Dengue is a serious problem for public health in Brazil and several factors aggravate the situation, one of which is that dengue can be mistaken for other infectious diseases. This work aimed at the production of a chimeric dengue virus polypeptide for the production of a low cost immunodiagnostic kit. Domain E viral envelope protein E, fused to the Elastin-Like Polypeptide (ELP), was used in N. benthamiana. Western blotting results showed that fusion with the ELP tail was better expressed than the non-fused. The ELISA test showed a significant difference in the absorbance means between positive and negative patients for dengue and to differentiate patients with dengue positive and positive zika, whose absorbance results were similar to the results of negative patients.(AU)