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Abstract Introduction : Chia and flax seeds are rich in alpha-linolenic acid (ALA), which is bioconverted into the active derivatives eicosapentaenoic (EPA) and doco sahexaenoic (DHA) having multiple beneficial effects. However, there is limited knowledge about the anti-inflammatory effects of chia and flax integral flours diets rich in ALA. Objective : The study aimed to evaluate the anti-inflammatory effect of dietary supplementation with integral chia and flax flours in a murine model of LPS-induced systemic inflammation. Methods : Balb/c mice were distributed into three groups: diet A (control), diet B (supplemented with inte gral chia flour), and diet C (supplemented with integral flax flour). Nutritional, hematological, and biochemical determinations were performed. ALA, EPA, and DHA were assessed by GC-MS in the liver, brain, cardiac and skeletal muscles. NF-kB immunoassays were per formed in kidney, liver, and peritoneal macrophages, respectively. The phagocytic capacity was determined in peritoneal macrophages and the expression of the pro- and anti-inflammatory cytokines was assessed by RT-qPCR in the kidney, liver, and spleen. Results : Diets B and C exhibited optimal nutritional adequacy and caused increased levels of ALA, EPA, and DHA in critical tissues compared to the control. The phagocytic capacity of murine peritoneal macrophages (p< 0.01) and IL-10 transcription increased, whereas the expression of NF-κB, IL-1β, IL-6, and TNF-α decreased in animals fed both experimental diets. Conclusions : This work contributes to the current knowledge of the anti-inflammatory effects of chia and flax integral flours rich in ALA and reinforces the health advantages of their consumption.

Resumen Introducción : Las semillas de chía y lino son ricas en ácido alfa-linolénico (ALA), sus derivados activos eico sapentaenoico (EPA) y docosahexaenoico (DHA) ejercen probados efectos beneficiosos. Existe un conocimiento limitado sobre los efectos protectores de ambas semillas bajo la forma de harinas integrales, siendo de particular interés el efecto antiinflamatorio. Objetivo : El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto antiinflamatorio de la suplementación dietaria con harinas integrales de semillas de chía y lino en un modelo murino de inflamación sistémica inducido por LPS. Métodos : Ratones de la cepa Balb/c fueron distribui dos en tres grupos: dieta A (control), dieta B (suplemen tada con harina integral de chía) y dieta C (suplementa da con harina integral de lino). Se efecturaron determi naciones nutricionales, hematológicas y bioquímicas. El contenido de ALA, EPA y DHA en hígado, cerebro, corazón y músculo esquelético se determinó por cromatografía GC-MS. Se realizó la inmunodetección de NF-kB en macrófagos peritoneales, riñón e hígado. Se determinó la capacidad fagocítica de macrófagos peritoneales y se evaluó la expresión de citoquinas pro y antiinflamatorias por RT-qPCR en riñón, hígado y bazo. Resultados : Las dietas B y C mostraron una adecua ción nutricional óptima y generaron niveles elevados de ALA, EPA y DHA en tejidos críticos. La capacidad fagocítica de los macrófagos peritoneales (p< 0.01) y la transcripción de IL-10 aumentó, mientras que la expre sión de NF-κB, IL-1β, IL-6 y TNF-α disminuyó en animales de los grupos B y C. Conclusiones : Este trabajo contribuye al conocimien to actual de los efectos antiinflamatorios de ambas hari nas integrales y refuerza los beneficios de su consumo.

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INTRODUCTION: Chia and flax seeds are rich in alphalinolenic acid (ALA), which is bioconverted into the active derivatives eicosapentaenoic (EPA) and docosahexaenoic (DHA) having multiple beneficial effects. However, there is limited knowledge about the antiinflammatory effects of chia and flax integral flours diets rich in ALA. OBJECTIVE: The study aimed to evaluate the antiinflammatory effect of dietary supplementation with integral chia and flax flours in a murine model of LPSinduced systemic inflammation. METHODS: Balb/c mice were distributed into three groups: diet A (control), diet B (supplemented with integral chia flour), and diet C (supplemented with integral flax flour). Nutritional, hematological, and biochemical determinations were performed. ALA, EPA, and DHA were assessed by GC-MS in the liver, brain, cardiac and skeletal muscles. NF-kB immunoassays were performed in kidney, liver, and peritoneal macrophages, respectively. The phagocytic capacity was determined in peritoneal macrophages and the expression of the pro- and anti-inflammatory cytokines was assessed by RT-qPCR in the kidney, liver, and spleen. RESULTS: Diets B and C exhibited optimal nutritional adequacy and caused increased levels of ALA, EPA, and DHA in critical tissues compared to the control. The phagocytic capacity of murine peritoneal macrophages (p< 0.01) and IL-10 transcription increased, whereas the expression of NF-κB, IL-1Β, IL-6, and TNF-α decreased in animals fed both experimental diets. CONCLUSIONS: This work contributes to the current knowledge of the anti-inflammatory effects of chia and flax integral flours rich in ALA and reinforces the health advantages of their consumption.

Introducción: Las semillas de chía y lino son ricas en ácido alfa-linolénico (ALA), sus derivados activos eicosapentaenoico (EPA) y docosahexaenoico (DHA) ejercen probados efectos beneficiosos. Existe un conocimiento limitado sobre los efectos protectores de ambas semillas bajo la forma de harinas integrales, siendo de particular interés el efecto antiinflamatorio. OBJETIVO: El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto antiinflamatorio de la suplementación dietaria con harinas integrales de semillas de chía y lino en un modelo murino de inflamación sistémica inducido por LPS. Métodos: Ratones de la cepa Balb/c fueron distribuidos en tres grupos: dieta A (control), dieta B (suplementada con harina integral de chía) y dieta C (suplementada con harina integral de lino). Se efecturaron determinaciones nutricionales, hematológicas y bioquímicas. El contenido de ALA, EPA y DHA en hígado, cerebro, corazón y músculo esquelético se determinó por cromatografía GC-MS. Se realizó la inmunodetección de NF-kB en macrófagos peritoneales, riñón e hígado. Se determinó la capacidad fagocítica de macrófagos peritoneales y se evaluó la expresión de citoquinas pro y antiinflamatorias por RT-qPCR en riñón, hígado y bazo. RESULTADOS: Las dietas B y C mostraron una adecuación nutricional óptima y generaron niveles elevados de ALA, EPA y DHA en tejidos críticos. La capacidad fagocítica de los macrófagos peritoneales (p< 0.01) y la transcripción de IL-10 aumentó, mientras que la expresión de NF-κB, IL-1Β, IL-6 y TNF-α disminuyó en animales de los grupos B y C. CONCLUSIONES: Este trabajo contribuye al conocimiento actual de los efectos antiinflamatorios de ambas harinas integrales y refuerza los beneficios de su consumo.

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Los factores inducibles por hipoxia (HIFs) regulan la adaptación a la hipoxia (H) y protegen a las células induciendo la transcripción de múltiples genes. Se propone estudiar la expresión de las isoformas HIF1αy HIF2αen tejidos hematopoyéticos MO y Bz durante 15 días de Hipoxia Hipobárica (HH) relacionarlos con la cinética de expresión de EPO-R y factores determinantes de la eritropoyesis GATA-1 y NFE2. Se utilizaron ratones CF1, sometidos a HH 0,4 atm de 0 a 15 días. A cada tiempo, se extrajeron fémures y Bz para la obtención de extractos, fraccionamiento proteico e inmunoblotting. Se determinaron parámetros hematológicos standard. La apoptosis fue cuantificada por TUNEL. HIFαfue evaluado en sus dos isoformas. En MO y Bz el factor de transcripción aumenta y es mayor desde el día 1 de HH en Bz. Niveles máximos de HIF1αse verifican al día 3 en MO y a partir del día 5 en Bz. HIF2αen MO presenta expresión máxima al día 2 con posterior descenso, donde la MO retoma el control de la eritropoyesis. En Bz, HIF2 exhibe patrón irregular, conservando aumentos de su inmunodetección en función de la H. Epo-R se expresa desde día 1 en MO y Bz en un patrón similar de comportamiento a GATA-1. NFE2 tiene una cinética diferencial con progresión de ascenso en MO conforme aumentan los días de H observándose un máximo al día 15 mientras que el Bz muestra paulatino descenso en función de la adaptación medular a la H. Esto sugiere que en el Bz y MO se verifican procesos adaptativos coexistentes de expansión/sobrevivencia y apoptosis de progenitores eritroides. En Bz predomina una eritropoyesis compensatoria. En MO por el contrario predomina apoptosis temprana con posterior recomposición y control de la expansión del compartimiento eritroideo. HIF1 y HIF2 se sobreexpresan en ambos tejidos, sin embargo la eritropoyesis esplénica está ligada al control de HIF1αya que aparentemente HIF2αestaría asociada a la supervivencia de otros tipos celulares esplénicos durante el estrés hipóxicoPalabras clave: Hipoxia hipobárica; Factores Inducibles por Hipoxia; Eritropoyesis

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Sepsis remains the most important cause of acute kidney injury (AKI) in critically ill patients and is an independent predictor of poor outcome. The administration of lipopolysaccharide (LPS) to animals reproduces most of the clinical features of sepsis, including AKI, a condition associated with renal cellular dysfunction and apoptosis. Erythropoietin (EPO) is a well known cytoprotective multifunctional hormone, which exerts anti-inflammatory, anti-oxidant, anti-apoptotic and angiogenic effects in several tissues. The aim of this study was to evaluate the underlying mechanisms of EPO renoprotection through the expression of the EPO receptor (EPO-R) and the modulation of the intrinsic apoptotic pathway in LPS-induced AKI. Male inbred Balb/c mice were divided in four experimental groups: Control, LPS (8 mg/kg i.p.), EPO (3000 IU sc) and LPS+EPO. Assessment of renal function, histological examination, TUNEL in situ assay, immunohistochemistry and Western blottings of caspase-3, Bax, Bcl-xL, EPO-R and Cytochrome c were performed at 24h post treatment. LPS+EPO treatment significantly improved renal function and ameliorated histopathological injury when compared to the LPS treated group. Results showed that EPO treatment attenuates renal tubular apoptosis through: (a) the overexpression of EPO-R in tubular interstitial cells, (b) the reduction of Bax/Bcl-xL ratio, (c) the inhibition Cytochrome c release into the cytosol and (d) the decrease of the active caspase-3 expression. This study suggests that EPO exerts renoprotection on an experimental model of LPS-induced AKI. EPO induced renoprotection involves an anti-apoptotic effect through the expression of EPO-R and the regulation of the mitochondrial apoptotic pathway.

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