RESUMO
This study aimed to determine the accuracy of assessing stallion sperm motility using a light microscope, a cell phone camera, and a free computer-assisted semen analysis (FCASA) package for ImageJ. The total motility of frozen (n=22) and cooled (n=48) equine semen was determined by FCASA and compared to the results of subjective visual analysis (SVA) by two technicians. Frozen samples were also evaluated by a commercial computer-assisted semen analysis (CCASA) system. The Friedman test revealed no significant differences (P>0.05) between cooled samples analyzed by FCASA (38.0) and SVA (technician 1, 40.0; technician 2, 40.0), nor between frozen samples analyzed by FCASA (23.36 ± 15.9), SVA (25.5 ± 18.8 and 25.8 ± 18.5), and CCASA (25.2 ± 18.3). However, mean FCASA results were underestimated by 7.2% compared with CCASA. The correlation between FCASA and CCASA was significant and strong (P<0.0001, r=0.95). Chi-squared tests indicated that FCASA provided similar results (P=0.14) to the reference method (CCASA), but SVA had lower accuracy (P=0.04). ImageJ analysis of cell phone videos captured under a light microscope can be used for estimation of stallion sperm motility with comparable accuracy to commercial systems.(AU)
O objetivo deste estudo foi testar as configurações necessárias para avaliar a motilidade espermática total de garanhões, mediante o uso de ImageJ, microscópio óptico e câmera de celular. Os valores de motilidade total das amostras de sêmen equino congeladas (22) e refrigeradas (48) foram comparados por análise visual (SVA) e pelo plugin do ImageJ (CASAF). Amostras congeladas também foram comparadas por um CASA comercial (CCASA). O teste de Friedman não resultou em diferença estatística (P>0,05) entre as 48 amostras analisadas com CASAF (38,0) e SVA de dois avaliadores (40,0 e 40,0). A comparação das 22 amostras congeladas entre CASAF (23,36±15,9), SVA (25,5±18,8 e 25,8±18,5) e CCASA (25,2±18,3) também não resultou em diferença estatística, sendo que a média dos resultados obtidos com CASAF subestimou a obtida com o CCASA em 7,2%. A correlação entre CASAF e CCASA foi significativamente elevada (r=0,95, P<0,0001). O teste de qui-quadrado resultou em proporção de acertos semelhantes entre o CASAF e o CCASA (P=0,14), enquanto SVA resultou em proporção diferente (P=0,04), indicando menor acurácia. O uso de microscópio óptico e câmera de celular foi útil para obter vídeos de sêmen de garanhões a serem analisados com ImageJ, proporcionando resultados de motilidade total equiparáveis a sistemas comerciais.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Motilidade dos Espermatozoides , Análise do Sêmen/métodos , Smartphone/instrumentação , Cavalos/fisiologia , Análise do Sêmen/veterinária , Microscopia/veterináriaRESUMO
The objective of the study was to determine whether or not there is a correlation between thermoresistance tests (TT) after semen thawing and pregnancy rate (PR) after fixed-time artificial insemination (FTAI). Four different TT were performed on ten samples used for AI; a rapid test (RTT) (30min / 46°C) and three slow tests (STT): STT1 (60min/38°C), STT2 (180min/38°C), and STT3 (300min/38°C). Two hundred and fifteen multiparous crossbred cows were submitted to FTAI under the following protocol: on day zero (d0) the animals received a P4 device +EB; on d7 PGF2α; on d8 P4 was removed and eCG+EC were administered; IATF was performed on d10. Three gestational diagnoses (G D) were performed on d40, d70 and d120. The mean sperm motility (%) in RTT and STTs were 19.84±6.13, 28.55±10.48, 17.62±5.87 and 8.63±3.46, respectively, and TP in the three DG 61.86%, 57.67%, and 55.81%, respectively. Through Person test a significant negative correlation (P< 0.05) was found between STT2 and PR at 60 days (r= -0.644) and between STT3 and all TPs (r= -0.774, -0.752, 0.748). It was concluded that TT parameters are not able to determine correlation between semen quality and TP.(AU)
O objetivo do presente estudo foi determinar se há ou não correlação entre testes de termorresistência (TT) após descongelamento do sêmen e taxa de prenhez (TP) após inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Quatro diferentes TT foram realizados nas 10 amostras utilizadas para a IA; um teste rápido (RTT) (30min/46°C) e três testes lentos (STT): STT1 (60min/38°C), STT2 (180min/38°C) e STT3 (300min/38°C). Duzentas e quinze vacas cruzadas multíparas foram submetidas à IATF sob o seguinte protocolo: no dia zero (d0), os animais receberam um dispositivo de P4+EB; em d7, PGF2α; em d8, retirou-se P4 e eCG+EC administrados; no d10, foi realizada IATF. Três diagnósticos gestacionais (DG) foram feitos, em d40, d70 e d120. As médias de motilidade espermática (%) em RTT e STTs foram 19,84±6,13, 28,55±10,48, 17,62±5,87 e 8,63±3,46, respectivamente, e TP nos três DG 61,86%, 57,67% e 55,81%, respectivamente. Por meio do teste de Person, uma correlação negativa significativa (P<0,05) foi encontrada entre os resultados de STT2 e PR aos 60 dias (r=-0,644) e entre STT3 e todas TPs (r=-0,774, -0,752 e -0,748). Concluiu-se que parâmetros de TT não são capazes de determinar correlação entre qualidade do sêmen e TP.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Gravidez , Bovinos , Motilidade dos Espermatozoides , Regulação da Temperatura Corporal , Taxa de Gravidez , Resposta ao Choque Térmico , Análise do Sêmen/métodos , Inseminação Artificial/veterináriaRESUMO
The objective of the study was to determine whether or not there is a correlation between thermoresistance tests (TT) after semen thawing and pregnancy rate (PR) after fixed-time artificial insemination (FTAI). Four different TT were performed on ten samples used for AI; a rapid test (RTT) (30min / 46°C) and three slow tests (STT): STT1 (60min/38°C), STT2 (180min/38°C), and STT3 (300min/38°C). Two hundred and fifteen multiparous crossbred cows were submitted to FTAI under the following protocol: on day zero (d0) the animals received a P4 device +EB; on d7 PGF2α; on d8 P4 was removed and eCG+EC were administered; IATF was performed on d10. Three gestational diagnoses (G D) were performed on d40, d70 and d120. The mean sperm motility (%) in RTT and STTs were 19.84±6.13, 28.55±10.48, 17.62±5.87 and 8.63±3.46, respectively, and TP in the three DG 61.86%, 57.67%, and 55.81%, respectively. Through Person test a significant negative correlation (P< 0.05) was found between STT2 and PR at 60 days (r= -0.644) and between STT3 and all TPs (r= -0.774, -0.752, 0.748). It was concluded that TT parameters are not able to determine correlation between semen quality and TP.(AU)
O objetivo do presente estudo foi determinar se há ou não correlação entre testes de termorresistência (TT) após descongelamento do sêmen e taxa de prenhez (TP) após inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Quatro diferentes TT foram realizados nas 10 amostras utilizadas para a IA; um teste rápido (RTT) (30min/46°C) e três testes lentos (STT): STT1 (60min/38°C), STT2 (180min/38°C) e STT3 (300min/38°C). Duzentas e quinze vacas cruzadas multíparas foram submetidas à IATF sob o seguinte protocolo: no dia zero (d0), os animais receberam um dispositivo de P4+EB; em d7, PGF2α; em d8, retirou-se P4 e eCG+EC administrados; no d10, foi realizada IATF. Três diagnósticos gestacionais (DG) foram feitos, em d40, d70 e d120. As médias de motilidade espermática (%) em RTT e STTs foram 19,84±6,13, 28,55±10,48, 17,62±5,87 e 8,63±3,46, respectivamente, e TP nos três DG 61,86%, 57,67% e 55,81%, respectivamente. Por meio do teste de Person, uma correlação negativa significativa (P<0,05) foi encontrada entre os resultados de STT2 e PR aos 60 dias (r=-0,644) e entre STT3 e todas TPs (r=-0,774, -0,752 e -0,748). Concluiu-se que parâmetros de TT não são capazes de determinar correlação entre qualidade do sêmen e TP.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Gravidez , Bovinos , Motilidade dos Espermatozoides , Regulação da Temperatura Corporal , Taxa de Gravidez , Resposta ao Choque Térmico , Análise do Sêmen/métodos , Inseminação Artificial/veterináriaRESUMO
The aim of this study was to evaluate the effect of four methods of sperm selection, on the integrity and stability of the plasma membrane, integrity of the acrosomal membrane and spermatic morphology in frozen/thawed ovine semen. Two types of colloidal silica: colloidal silica-silane and colloidal silica-polyvinylpyrrolidone (PVP), and two aliquots: 1 and 4 ml, were used for sperm selection. Probes FITC-PSA and PI were used to measure the integrity of the plasma and acrosomal membranes. Plasma membrane stability was measured, using fluorescent probes M540 and YOPRO1. Effective reduction in the incidence of spermatozoa with acrosomal pathologies was only achieved using 1 ml colloidal silica-silane. All methods were efficient in select viable and unreacted spermatozoa. Only methods using 1 ml of silica were efficient in decrease spermatozoa stained by PI (death). Methods using silica colloidal-silane were more efficient to decrease apoptotic cells after selection when compared to silica colloidal-PVP. In conclusion, sperm selection in colloidal silica-silane and colloidal silica-PVP improved sperm quality when compared to the controls. The method using 1 ml of colloidal silica-silane is the preferred method because its effectiveness and lower cost.
Assuntos
Membrana Celular/metabolismo , Coloides/química , Criopreservação/métodos , Preservação do Sêmen/métodos , Sêmen/metabolismo , Acrossomo/metabolismo , Acrossomo/patologia , Animais , Sobrevivência Celular , Criopreservação/economia , Criopreservação/veterinária , Citometria de Fluxo , Corantes Fluorescentes , Masculino , Análise do Sêmen/veterinária , Preservação do Sêmen/efeitos adversos , Preservação do Sêmen/economia , Preservação do Sêmen/veterinária , Ovinos , Carneiro Doméstico/fisiologia , Motilidade dos Espermatozoides/fisiologiaRESUMO
The objectives of this study were to verify the time during which viable ovine spermatozoa could be recovered from the cauda epididymis kept at ambient temperature (18-25°C). Sperm collected in an artificial vagina (AV) were used as control. Spermatozoa samples were collected with an AV and from epididymis at 0 (G0), 6 (G6), 12 (G12), 24 (G24), and 48 (G48) hours post mortem. Total motility (TM), progressive motility (PM), hypo-osmotic membrane integrity test (HOST) and morphological changes were assessed. TM decreased (P<0.05) from 24 hours post mortem (70.0±1.9%) compared to AV (86.4±1.0%). PM decreased (P<0.05) from 12 hours after death (31.3±4.0%) compared to AV group (73.2±1.4%). The percentage of viable cells in HOST decreased (P<0.05) in the G48 (60.0±8.9%). Spermatozoa recovery was lower (P<0.05) 48 hours after death (2064.2±230.7 x 106 spermatozoa) compared to G0(2623.6±288.4 x 106 spermatozoa). In conclusion, under the conditions of this study, it would be possible to use epididymal spermatozoa recovered up to 24 hours after death for artificial insemination or in vitro fertilization; however, fertility trials are necessary to prove this hypothesis.(AU)
Os objetivos deste estudo foram avaliar o período pelo qual era possível recuperar espermatozoides ovinos viáveis da cauda de epidídimos mantidos em temperatura ambiente (18-25°C). O sêmen coletado em vagina artificial (AV) foi utilizado como controle. Os espermatozoides foram coletados dos epidídimos à zero hora (G0), às seis (G6), 12 (G12), 24 (G24) e 48 (G48) horas post mortem. A motilidade total (TM), a motilidade progressiva (PM), a integridade de membrana plasmática em solução hiposmótica (HOST) e a morfologia espermática foram avaliadas. A TM diminuiu (P<0,05) a partir de 24 horas após a morte (70,0±1,9%) comparado ao sêmen coletado em AV (86,4±1,0%). A PM diminuiu (P<0,05) a partir de 12 horas após a morte (31,3±4,0%) comparado ao grupo AV (73,2±1,4%). A porcentagem de espermatozoides viáveis no HOST diminuiu (P<0,05) no G48 (60,0±8,9%). A recuperação espermática foi menor (P<0,05) 48 horas após a morte (2064,2±498,1 x 106 espermatozoides) comparado ao G0 (2298,4±288,4 x 106 espermatozoides). Em conclusão, nas condições deste estudo, é possível utilizar espermatozoides epididimários recuperados até 24 horas após a morte para inseminação artificial ou fertilização in vitro, porém testes de fertilidade são necessários para comprovar essa hipótese.(AU)
Assuntos
Animais , Epididimo/embriologia , Ovinos/embriologia , Espermatozoides , TemperaturaRESUMO
The objectives of this study were to verify the time during which viable ovine spermatozoa could be recovered from the cauda epididymis kept at ambient temperature (18-25°C). Sperm collected in an artificial vagina (AV) were used as control. Spermatozoa samples were collected with an AV and from epididymis at 0 (G0), 6 (G6), 12 (G12), 24 (G24), and 48 (G48) hours post mortem. Total motility (TM), progressive motility (PM), hypo-osmotic membrane integrity test (HOST) and morphological changes were assessed. TM decreased (P<0.05) from 24 hours post mortem (70.0±1.9%) compared to AV (86.4±1.0%). PM decreased (P<0.05) from 12 hours after death (31.3±4.0%) compared to AV group (73.2±1.4%). The percentage of viable cells in HOST decreased (P<0.05) in the G48 (60.0±8.9%). Spermatozoa recovery was lower (P<0.05) 48 hours after death (2064.2±230.7 x 106 spermatozoa) compared to G0(2623.6±288.4 x 106 spermatozoa). In conclusion, under the conditions of this study, it would be possible to use epididymal spermatozoa recovered up to 24 hours after death for artificial insemination or in vitro fertilization; however, fertility trials are necessary to prove this hypothesis.(AU)
Os objetivos deste estudo foram avaliar o período pelo qual era possível recuperar espermatozoides ovinos viáveis da cauda de epidídimos mantidos em temperatura ambiente (18-25°C). O sêmen coletado em vagina artificial (AV) foi utilizado como controle. Os espermatozoides foram coletados dos epidídimos à zero hora (G0), às seis (G6), 12 (G12), 24 (G24) e 48 (G48) horas post mortem. A motilidade total (TM), a motilidade progressiva (PM), a integridade de membrana plasmática em solução hiposmótica (HOST) e a morfologia espermática foram avaliadas. A TM diminuiu (P<0,05) a partir de 24 horas após a morte (70,0±1,9%) comparado ao sêmen coletado em AV (86,4±1,0%). A PM diminuiu (P<0,05) a partir de 12 horas após a morte (31,3±4,0%) comparado ao grupo AV (73,2±1,4%). A porcentagem de espermatozoides viáveis no HOST diminuiu (P<0,05) no G48 (60,0±8,9%). A recuperação espermática foi menor (P<0,05) 48 horas após a morte (2064,2±498,1 x 106 espermatozoides) comparado ao G0 (2298,4±288,4 x 106 espermatozoides). Em conclusão, nas condições deste estudo, é possível utilizar espermatozoides epididimários recuperados até 24 horas após a morte para inseminação artificial ou fertilização in vitro, porém testes de fertilidade são necessários para comprovar essa hipótese.(AU)
Assuntos
Animais , Epididimo/embriologia , Ovinos/embriologia , Espermatozoides , TemperaturaRESUMO
Frozen and thawed ovine semen undergo morphological and functional changes that prevent or decrease the efficiency of fertilization. Sperm selection methods seek to improve the quality and viability of the fertilizing materials. Four sperm selection methods were employed, using two silica colloidal solutions coated with silane (silica colloidal-silane) or by polyvinylpyrrolidone (silica colloidal-PVP), and varying the volume of colloidal solution. Sperm kinematic and sperm recovery were evaluated by means of CASA. The protocols using silica colloidal-silane showed higher total motility (TM), progressive motility (PM) and percentage of rapid sperm (%RAP) compared to the methods employing silica colloidal-PVP and to the samples prior to sperm selection. The silica colloidal-PVP had greater sperm recovery compared to the silica colloidal-silane. Only the method using 4mL of silica colloidal-PVP was not efficient in selecting samples with better quality compared to the samples analyzed prior to sperm selection. The methods using lower volumes of colloidal solution did not differ from those using higher volumes and the best results were shown by the method with 1mL silica colloidal-silane. The results found in the study indicated greater efficiency of the silica colloidal-silane solution for sperm selection of thawed ovine semen when compared to selection using silica colloidal-PVP. The method using 1mL of silica colloidal-silane was equally efficient to the method with higher volume, presenting itself as an alternative to process samples with lower sperm concentration.(AU)
O sêmen ovino congelado e descongelado sofre alterações morfofuncionais que impossibilitam ou diminuem a eficiência na fecundação. Os métodos de seleção espermática visam melhorar a qualidade e a viabilidade do material fecundante. Foram utilizados quatro métodos de seleção espermática utilizando duas soluções de sílica coloidal revestida por silano (sílica coloidal-silano) ou por polivinilpirrolidona (sílica coloidal-PVP), variando o volume de solução coloidal. Foram testadas a cinética espermática no CASA e a recuperação espermática. Os protocolos utilizando sílica coloidal-silano apresentaram maior motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP) e porcentagem de espermatozoides rápidos (% RAP) quando comparados aos métodos utilizando a sílica coloidal-PVP e às amostras antes da seleção espermática. A sílica coloidal-PVP teve maior recuperação espermática quando comparada à sílica coloidal-silano. Somente o método utilizando 4mL de sílica coloidal-PVP não foi eficiente na seleção de amostras com melhor qualidade quando comparado às amostras analisadas antes da seleção espermática. Os métodos utilizando menores volumes de solução coloidal não diferiram dos métodos de maior volume, sendo a sílica coloidal-silano com 1mL o método que apresentou os melhores resultados. Como conclusão, os resultados encontrados no trabalho apontaram a maior eficiência da sílica coloidal-silano em selecionar sêmen ovino congelado e descongelado quando comparado à seleção em sílica coloidal-PVP. O método utilizando 1mL de sílica coloidal-silano foi igualmente eficiente ao método com maior volume, sendo uma alternativa para processar amostras com baixa concentração espermática.(AU)
Assuntos
Animais , Cinética , Análise do Sêmen/veterinária , Ovinos , Recuperação Espermática/veterinária , Suspensões/métodos , Povidona , Preservação do Sêmen/veterinária , Silanos , Motilidade dos EspermatozoidesRESUMO
Frozen and thawed ovine semen undergo morphological and functional changes that prevent or decrease the efficiency of fertilization. Sperm selection methods seek to improve the quality and viability of the fertilizing materials. Four sperm selection methods were employed, using two silica colloidal solutions coated with silane (silica colloidal-silane) or by polyvinylpyrrolidone (silica colloidal-PVP), and varying the volume of colloidal solution. Sperm kinematic and sperm recovery were evaluated by means of CASA. The protocols using silica colloidal-silane showed higher total motility (TM), progressive motility (PM) and percentage of rapid sperm (%RAP) compared to the methods employing silica colloidal-PVP and to the samples prior to sperm selection. The silica colloidal-PVP had greater sperm recovery compared to the silica colloidal-silane. Only the method using 4mL of silica colloidal-PVP was not efficient in selecting samples with better quality compared to the samples analyzed prior to sperm selection. The methods using lower volumes of colloidal solution did not differ from those using higher volumes and the best results were shown by the method with 1mL silica colloidal-silane. The results found in the study indicated greater efficiency of the silica colloidal-silane solution for sperm selection of thawed ovine semen when compared to selection using silica colloidal-PVP. The method using 1mL of silica colloidal-silane was equally efficient to the method with higher volume, presenting itself as an alternative to process samples with lower sperm concentration.(AU)
O sêmen ovino congelado e descongelado sofre alterações morfofuncionais que impossibilitam ou diminuem a eficiência na fecundação. Os métodos de seleção espermática visam melhorar a qualidade e a viabilidade do material fecundante. Foram utilizados quatro métodos de seleção espermática utilizando duas soluções de sílica coloidal revestida por silano (sílica coloidal-silano) ou por polivinilpirrolidona (sílica coloidal-PVP), variando o volume de solução coloidal. Foram testadas a cinética espermática no CASA e a recuperação espermática. Os protocolos utilizando sílica coloidal-silano apresentaram maior motilidade total (MT), motilidade progressiva (MP) e porcentagem de espermatozoides rápidos (% RAP) quando comparados aos métodos utilizando a sílica coloidal-PVP e às amostras antes da seleção espermática. A sílica coloidal-PVP teve maior recuperação espermática quando comparada à sílica coloidal-silano. Somente o método utilizando 4mL de sílica coloidal-PVP não foi eficiente na seleção de amostras com melhor qualidade quando comparado às amostras analisadas antes da seleção espermática. Os métodos utilizando menores volumes de solução coloidal não diferiram dos métodos de maior volume, sendo a sílica coloidal-silano com 1mL o método que apresentou os melhores resultados. Como conclusão, os resultados encontrados no trabalho apontaram a maior eficiência da sílica coloidal-silano em selecionar sêmen ovino congelado e descongelado quando comparado à seleção em sílica coloidal-PVP. O método utilizando 1mL de sílica coloidal-silano foi igualmente eficiente ao método com maior volume, sendo uma alternativa para processar amostras com baixa concentração espermática.(AU)
Assuntos
Animais , Análise do Sêmen/veterinária , Ovinos , Recuperação Espermática/veterinária , Cinética , Preservação do Sêmen/veterinária , Silanos , Povidona , Suspensões/métodos , Motilidade dos EspermatozoidesRESUMO
The aim of this study was to isolate Toxoplasma gondii and determine the viability of the parasite in fresh semen samples of clinically healthy adult dogs naturally infected. Eleven seropositive dogs with T. gondii IgG antibodies from southern Brazil were selected to confirm the presence and viability of T. gondii in fresh semen samples using in vitro isolation in Vero cell culture, polymerase chain reaction (PCR) and sequencing analysis. The presence of viable T. gondii was confirmed by in vitro isolation and PCR in five semen samples. The ITS1 region of the isolated protozoa (TG S4) was amplified and sequenced. The nucleotide sequence obtained was 99% compatible with the T. gondii DNA sequences stored in the GenBank. It has been shown that T. gondii tachyzoites may be isolated in vitro from fresh semen samples of clinically healthy dogs seropositive for T. gondii.
Assuntos
Doenças do Cão/parasitologia , Sêmen/parasitologia , Toxoplasma/isolamento & purificação , Toxoplasmose Animal/parasitologia , Animais , Brasil/epidemiologia , DNA de Protozoário/genética , Doenças do Cão/diagnóstico , Doenças do Cão/epidemiologia , Cães , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Toxoplasmose Animal/epidemiologiaRESUMO
A análise de sêmen in vitro é importante para evitar prejuízos em programas de inseminação artificial eauxiliar o técnico na escolha de reprodutores para estações de monta. Ainda que as técnicas mais avançadas deavaliação de sêmen ovino estejam restritas a centros de pesquisa, avanços nessa área aumentam a acurácia e arepetibilidade das análises. Foram desenvolvidas tecnologias objetivas de avaliação do sêmen que utilizamsistemas computadorizados e softwares específicos para examinar imagens dos espermatozoides. A análise demotilidade assistida por computador utiliza fotografias sequenciais em que é possível desenhar o trajeto dascélulas espermáticas.Essa tecnologia tem sido aplicada na pesquisa de novos diluidores e crioprotetoresseminais. A morfometria computadorizada diminui a subjetividade da tradicional análise de morfologiaespermática realizada manualmente. A aplicação de sondas fluorescentes com leitura em microscopia defluorescência ou citometria de fluxo permite a avaliação estrutural e funcional dos espermatozoides de formamais ampla, criteriosa e rápida. A pesquisa da capacidade de degradação das espécies reativas de oxigênioauxilia na preservação do sêmen tanto congelado quanto descongelado, e vem sendo utilizada na melhoria demeios para criopreservação. Os testes biológicos, ainda que onerosos na pesquisa em ovinos, geram informaçõesimportantes sobre a sobrevida dos espermatozoides no trato reprodutivo feminino e sua capacidade fecundante.(AU)
In vitro semen analysis is important to prevent errors in artificial insemination programs and assist thetechnician in choosing rams for breeding seasons. While the most advanced assessment techniques ram semenare restricted to research centers, advances in this area increase the accuracy and repeatability of analyzes.Objective semen evaluation technologies using specific computer systems and software to examine images ofsperm were developed. The analysis of computer-assisted motility uses sequential shots that can draw the path ofthe sperm cells, this technology has been applied in search of new extenders and seminal cryoprotectants. Thecomputerized morphometry reduces the subjectivity of traditional sperm morphology analysis performedmanually. The use of fluorescent probes reading fluorescence microscopy or flow cytometry allows structuraland functional assessment of sperm in a more extensive and faster analysis. The research capacity ofdegradation of reactive oxygen species assists in the preservation of frozen and thawed semen, and has beenused in improving the means for cryopreservation. The biological tests, albeit costly research in sheep generateimportant information on the survival of spermatozoa in the female reproductive tract and their fertilizingcapacity.(AU)