RESUMO
The aim of this study was to evaluate the effect of racial crossing on seminal parameters of eight Santa Inês and crossbred (Santa Inês x Dorper) rams submitted to heat stress, and to monitor the return of these parameters to previously reported. Before to place the insulation bags, two collects of semen through electroejaculation were performed. The insulation pouches were made with double-layer plastic, internally lined with cotton, and fixed around the spermatic funiculus and scrotum with adhesive tape and bandage remaining on the testes of the animals for seven days. The first collect was performed on the day that the pouches were taken (day 0) and thereafter, every seven days, totalizing 15 measurements. Data were submitted to analysis of variance (ANOVA). The analyzed variables were subjected to Dunnett test at 5% probability to compare the values obtained before treatment with those obtained in the following days. In this study it was found that the animals restored normal seminal parameter after the insulation effects, however, the return rate differed slightly among the studied breeds. The crossbred animals restored the seminal patterns, on average, a week before Santa Inês. It is concluded that the racial crossing influences the semen parameters of rams submitted to heat stress.
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do cruzamento racial sobre parâmetros seminais de oito carneiros Santa Inês e mestiços, submetidos ao estresse térmico e monitorar o retorno desses parâmetros aos relatos anteriormente. Antes de colocar as bolsas de insulação, foram realizadas duas coletas de sêmen por meio de eletroejaculação. As bolsas de insulação foram confeccionadas com plástico de camada dupla, revestidas internamente com algodão, fixadas ao redor do funículo espermático e escroto com fita adesiva e bandagem, permanecendo nos testículos dos animais por sete dias. A primeira coleta foi realizada no dia em que as bolsas foram retiradas (dia 0) e a partir daí, a cada sete dias, totalizando 15 coletas. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). As variáveis analisadas foram submetidas ao teste de Dunnett a 5% de probabilidade para comparar os valores obtidos antes do tratamento com aqueles obtidos nos dias seguintes. Neste estudo verificou-se que os animais restauraram os parâmetros seminais normais após os efeitos da insulação, porém, a taxa de retorno diferiu ligeiramente entre as raças estudadas. Os animais mestiços restauraram os padrões seminais, em média, uma semana antes da Santa Inês. Conclui-se que o cruzamento racial influencia os parâmetros seminais de carneiros submetidos ao estresse térmico.
Assuntos
Motilidade dos Espermatozoides , Ovinos , Resposta ao Choque TérmicoRESUMO
To date, no studies have been performed evaluating the effect of boar spermatozoa concentration in 0.5mL freezing straws, leading us to examine this question. Each sperm-rich fraction of the ejaculate (n=25) was diluted at five different sperm concentrations (100, 200, 300, 600 and 800 x 106 spermatozoa/mL), packaged in 0.5mL straws, and subsequently frozen. After thawing, the sperm from all of treatment groups were analyzed to determine motility characteristics using a sperm class analyzer (SCA-CASA), and their plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, sperm membrane lipid peroxidation and fluidity were analyzed by flow cytometry. An increase in spermatozoa concentration above 300x106 spermatozoa/mL in a 0.5mL straw impaired (p<0.05) the total and progressive motility, curvilinear velocity, straight-line velocity, linearity and beat cross frequency. However, the plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation and fluidity were not influenced (p>0.05) by high spermatozoa concentrations at freezing. Therefore, to increase spermatozoa survival and total and progressive motility after thawing, boar spermatozoa should be frozen at concentrations up to 300x106 spermatozoa/mL.(AU)
Até o momento, não foram realizados estudos que avaliassem o efeito da concentração de espermatozoides/mL em palhetas (0,5mL) para a criopreservação, levando-nos a analisar esta questão. Cada fração-rica do ejaculado (n=25) foi diluída em cinco diferentes concentrações de espermatozoides (100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL), envasadas em palhetas de 0,5mL e posteriormente congeladas. Após a descongelação, os espermatozoides de todos os tratamentos foram avaliados a fim de determinar as características de motilidade usando um sistema de análise computadorizada dos espermatozoides (SCA-CASA). A integridade das membranas plasmática e acrosomal, o potencial de membrana mitocondrial, a peroxidação lipídica e a fluidez da membrana foram analisadas por citometria de fluxo. O aumento na concentração de espermatozoides acima de 300x106 espermatozoides/mL diminuiu (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade curvilínea, velocidade linear, linearidade e frequência de batimento. No entanto, a integridade da membrana plasmática e acrosomal, potencial de membrana mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez de membrana não foram influenciados (p>0,05) por altas concentrações de espermatozoides durante a criopreservação. Portanto, a fim de melhorar a sobrevivência dos espermatozoides suínos e a motilidade total e progressiva após a descongelação, os espermatozoides suínos devem ser congelados a concentrações não superiores a 300x106 espermatozoides/mL.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos/embriologia , Criopreservação/veterinária , Análise do Sêmen/estatística & dados numéricosRESUMO
To date, no studies have been performed evaluating the effect of boar spermatozoa concentration in 0.5mL freezing straws, leading us to examine this question. Each sperm-rich fraction of the ejaculate (n=25) was diluted at five different sperm concentrations (100, 200, 300, 600 and 800 x 106 spermatozoa/mL), packaged in 0.5mL straws, and subsequently frozen. After thawing, the sperm from all of treatment groups were analyzed to determine motility characteristics using a sperm class analyzer (SCA-CASA), and their plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, sperm membrane lipid peroxidation and fluidity were analyzed by flow cytometry. An increase in spermatozoa concentration above 300x106 spermatozoa/mL in a 0.5mL straw impaired (p<0.05) the total and progressive motility, curvilinear velocity, straight-line velocity, linearity and beat cross frequency. However, the plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation and fluidity were not influenced (p>0.05) by high spermatozoa concentrations at freezing. Therefore, to increase spermatozoa survival and total and progressive motility after thawing, boar spermatozoa should be frozen at concentrations up to 300x106 spermatozoa/mL.(AU)
Até o momento, não foram realizados estudos que avaliassem o efeito da concentração de espermatozoides/mL em palhetas (0,5mL) para a criopreservação, levando-nos a analisar esta questão. Cada fração-rica do ejaculado (n=25) foi diluída em cinco diferentes concentrações de espermatozoides (100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL), envasadas em palhetas de 0,5mL e posteriormente congeladas. Após a descongelação, os espermatozoides de todos os tratamentos foram avaliados a fim de determinar as características de motilidade usando um sistema de análise computadorizada dos espermatozoides (SCA-CASA). A integridade das membranas plasmática e acrosomal, o potencial de membrana mitocondrial, a peroxidação lipídica e a fluidez da membrana foram analisadas por citometria de fluxo. O aumento na concentração de espermatozoides acima de 300x106 espermatozoides/mL diminuiu (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade curvilínea, velocidade linear, linearidade e frequência de batimento. No entanto, a integridade da membrana plasmática e acrosomal, potencial de membrana mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez de membrana não foram influenciados (p>0,05) por altas concentrações de espermatozoides durante a criopreservação. Portanto, a fim de melhorar a sobrevivência dos espermatozoides suínos e a motilidade total e progressiva após a descongelação, os espermatozoides suínos devem ser congelados a concentrações não superiores a 300x106 espermatozoides/mL.(AU)
Assuntos
Animais , Suínos/embriologia , Criopreservação/veterinária , Análise do Sêmen/estatística & dados numéricosRESUMO
Sperm concentration is traditionally evaluated by counting cells in a hemocytometric Neubauer chamber, often a highly subjective, time-consuming, and laborious technique prevalent in andrology laboratories around the world. However, the Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) represents a more consistent method of evaluating sperm concentration that may provide enhancing efficiencies of sperm count. The purpose of this study is to compare the results of these two methods in the analysis of post-thaw concentration of bovine semen. Four hundred and twenty five batches of semen from different bulls were selected, thawed at 37°C for 30 seconds and then homogenized. Aliquots of 40 µL of semen were diluted in 960 µL of distilled water, fixing the rate at 1:25 dilution for analysis in a Neubauer chamber. Conversely, aliquots of 5 µL for each semen dose were submitted to CASA, considered a minimum of five random fields and 2000 sperm count per analysis. The average concentration of sperm cells was 38.96a ± 1.28 in the Neubauer analysis and 35.14b ± 0.82 for the CASA, with the correlation coefficient of 0.87 (P < 0.0001) and reliability of 0.78 (scale ranging from 0 to 1) between the two methods. In conclusion, the results of two techniques for assessing sperm concentration have similar results. However the CASA methodology would yield greater benefit due to precision, consistency, and reduced disposal issues, particularly for large processing laboratories.(AU)
Tradicionalmente, a concentração espermática é avaliada por meio da contagem de células em câmara hemocitométrica de Neubauer, técnica laboriosa adotada na rotina dos laboratórios de andrologia. Uma alternativa para essa contagem é a técnica computadorizada de avaliação espermática (CASA), método que pode aumentar a eficiência e acurácia na determinação da concentração de espermatozoides em uma amostra de sêmen. O presente trabalho relata a avaliação da sensibilidade da técnica CASA para o acesso da concentração de espermatozoides bovinos em pósdescongelação. Foram selecionadas 425 doses de sêmen de reprodutores de diferentes raças, descongeladas a 37°C por 30 segundos e homogeneizadas. Alíquotas de 40 µL de sêmen foram transferidas para tubos cônicos de 1,5 mL previamente preenchidos com 960 µL de água destilada, fixando a taxa de diluição em 1:25 para contagem em câmara de Neubauer. Em contrapartida, alíquotas de 5 µL de cada dose de sêmen foram avaliadas com o emprego do sistema CASA considerando o número mínimo de cinco campos aleatórios e 2 mil espermatozoides por análise. A concentração média de células espermáticas foi de 38,96a ± 1,28 e 35,14b ± 0,82,respectivamente para amostras avaliadas em câmara de Neubauer ou sistema computadorizado, apresentando o coeficiente de correlação de 0,87 (P < 0.0001) e concordância de 0,78 (escala de 0 a 1). Conclui-se que as duas técnicas de avaliação da concentração espermática possuem eficiência similar. No entanto, em virtude da precisão, rapidez e por dispensar a diluição prévia das amostras para a contagem, a CASA é uma alternativa para a contagem de células espermáticas em câmara de Neubauer, sobretudo para grandes centrais de produção de sêmen bovino congelado.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Preservação do Sêmen/veterinária , Contagem de Espermatozoides/métodos , Contagem de Espermatozoides/veterináriaRESUMO
Sperm concentration is traditionally evaluated by counting cells in a hemocytometric Neubauer chamber, often a highly subjective, time-consuming, and laborious technique prevalent in andrology laboratories around the world. However, the Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) represents a more consistent method of evaluating sperm concentration that may provide enhancing efficiencies of sperm count. The purpose of this study is to compare the results of these two methods in the analysis of post-thaw concentration of bovine semen. Four hundred and twenty five batches of semen from different bulls were selected, thawed at 37°C for 30 seconds and then homogenized. Aliquots of 40 µL of semen were diluted in 960 µL of distilled water, fixing the rate at 1:25 dilution for analysis in a Neubauer chamber. Conversely, aliquots of 5 µL for each semen dose were submitted to CASA, considered a minimum of five random fields and 2000 sperm count per analysis. The average concentration of sperm cells was 38.96a ± 1.28 in the Neubauer analysis and 35.14b ± 0.82 for the CASA, with the correlation coefficient of 0.87 (P < 0.0001) and reliability of 0.78 (scale ranging from 0 to 1) between the two methods. In conclusion, the results of two techniques for assessing sperm concentration have similar results. However the CASA methodology would yield greater benefit due to precision, consistency, and reduced disposal issues, particularly for large processing laboratories.(AU)
Tradicionalmente, a concentração espermática é avaliada por meio da contagem de células em câmara hemocitométrica de Neubauer, técnica laboriosa adotada na rotina dos laboratórios de andrologia. Uma alternativa para essa contagem é a técnica computadorizada de avaliação espermática (CASA), método que pode aumentar a eficiência e acurácia na determinação da concentração de espermatozoides em uma amostra de sêmen. O presente trabalho relata a avaliação da sensibilidade da técnica CASA para o acesso da concentração de espermatozoides bovinos em pósdescongelação. Foram selecionadas 425 doses de sêmen de reprodutores de diferentes raças, descongeladas a 37°C por 30 segundos e homogeneizadas. Alíquotas de 40 µL de sêmen foram transferidas para tubos cônicos de 1,5 mL previamente preenchidos com 960 µL de água destilada, fixando a taxa de diluição em 1:25 para contagem em câmara de Neubauer. Em contrapartida, alíquotas de 5 µL de cada dose de sêmen foram avaliadas com o emprego do sistema CASA considerando o número mínimo de cinco campos aleatórios e 2 mil espermatozoides por análise. A concentração média de células espermáticas foi de 38,96a ± 1,28 e 35,14b ± 0,82,respectivamente para amostras avaliadas em câmara de Neubauer ou sistema computadorizado, apresentando o coeficiente de correlação de 0,87 (P < 0.0001) e concordância de 0,78 (escala de 0 a 1). Conclui-se que as duas técnicas de avaliação da concentração espermática possuem eficiência similar. No entanto, em virtude da precisão, rapidez e por dispensar a diluição prévia das amostras para a contagem, a CASA é uma alternativa para a contagem de células espermáticas em câmara de Neubauer, sobretudo para grandes centrais de produção de sêmen bovino congelado.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Contagem de Espermatozoides/veterinária , Contagem de Espermatozoides/métodos , Preservação do Sêmen/veterináriaRESUMO
The experiment compared the pregnancy rates in sheep submitted to IA, to evaluate the influence ofsperm concentration on fertility rate in sheep inseminated with frozen semen. In experiment run 37 females wereused, subject to synchronization of estrus and divided into two groups: G1 (n = 19), using artificial inseminationwith a concentration of 200 million viable spermatozoa and G2 (n = 18), using artificial insemination is at aconcentration of 100 million sperm. Pregnancy rates were 66.66% and 77.77% in sheep that were inseminatedwith the concentration 200 and 100 million sperm respectively transcervical and the sheep that have beeninseminated by laparoscopy at the same concentrations as pregnancy rates were 50% and 77.77% respectively.The concentrations used have shown - is quite effective when compared pregnancy rates in each group. Butneeds more in vivo studies.
Assuntos
Feminino , Animais , Capacitação Espermática , Coeficiente de Natalidade , Inseminação Artificial/veterinária , Ovinos/embriologiaRESUMO
The experiment compared the pregnancy rates in sheep submitted to IA, to evaluate the influence ofsperm concentration on fertility rate in sheep inseminated with frozen semen. In experiment run 37 females wereused, subject to synchronization of estrus and divided into two groups: G1 (n = 19), using artificial inseminationwith a concentration of 200 million viable spermatozoa and G2 (n = 18), using artificial insemination is at aconcentration of 100 million sperm. Pregnancy rates were 66.66% and 77.77% in sheep that were inseminatedwith the concentration 200 and 100 million sperm respectively transcervical and the sheep that have beeninseminated by laparoscopy at the same concentrations as pregnancy rates were 50% and 77.77% respectively.The concentrations used have shown - is quite effective when compared pregnancy rates in each group. Butneeds more in vivo studies.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Ovinos/embriologia , Coeficiente de Natalidade , Capacitação Espermática , Inseminação Artificial/veterináriaRESUMO
Em ejaculados provenientes de 28 catetos, verificou-se a existência de relações entre a concentração espermática determinada por meio da câmara de Neubauer e a tramitância observada por espectrofotometria, utilizando comprimentos de onda variando de 530 a 590nm. Os ejaculados apresentaram uma concentração média de 283,9±30,8x106 espermatozoides mL-1, com variação de 30 a 640x106 espermatozoides mL-1. Os valores para tramitância variaram entre 36,9 a 96,3, nos diferentes comprimentos de onda. Não foram detectadas relações significativas entre os dois métodos (P>0,05). Dessa forma, não se recomenda a espectrofotometria para os procedimentos de rotina na determinação da concentração espermática em catetos.
In ejaculates derived from 28 collared peccaries, we verified the existence of relationships between sperm concentration determined by the Neubauer counting chamber and the tramitance verified by spectrophotometer, under wavelengths varying from 530 to 590nm. Ejaculates presented a concentration of 283.9±30.8x106sperm m-1, varying from 30 to 640x106sperm mL-1. Values for tramitance varied from 36.9 to 96.3, under different wavelengths. No significant relationship was verified between two methods (P>0.05). Thus, the spectrophotometer is not recommended for routine procedures of sperm concentration measurement in collared peccaries.
RESUMO
Em ejaculados provenientes de 28 catetos, verificou-se a existência de relações entre a concentração espermática determinada por meio da câmara de Neubauer e a tramitância observada por espectrofotometria, utilizando comprimentos de onda variando de 530 a 590nm. Os ejaculados apresentaram uma concentração média de 283,9±30,8x106 espermatozoides mL-1, com variação de 30 a 640x106 espermatozoides mL-1. Os valores para tramitância variaram entre 36,9 a 96,3, nos diferentes comprimentos de onda. Não foram detectadas relações significativas entre os dois métodos (P>0,05). Dessa forma, não se recomenda a espectrofotometria para os procedimentos de rotina na determinação da concentração espermática em catetos.(AU)
In ejaculates derived from 28 collared peccaries, we verified the existence of relationships between sperm concentration determined by the Neubauer counting chamber and the tramitance verified by spectrophotometer, under wavelengths varying from 530 to 590nm. Ejaculates presented a concentration of 283.9±30.8x106sperm m-1, varying from 30 to 640x106sperm mL-1. Values for tramitance varied from 36.9 to 96.3, under different wavelengths. No significant relationship was verified between two methods (P>0.05). Thus, the spectrophotometer is not recommended for routine procedures of sperm concentration measurement in collared peccaries.(AU)
Assuntos
Espectrofotometria , Contagem de Espermatozoides/veterinária , Artiodáctilos , SêmenRESUMO
A seleção de reprodutores capazes de transmitir características de valor econômico para a progênie é fundamental para o sucesso da indústria de aves. Nesse sentido, os machos devem produzir sêmen de boa qualidade, com volume e concentração adequados. O ejaculado de galos é composto por uma grande quantidade de células espermáticas suspensas em um pequeno volume de plasma seminal, proveniente dos túbulos seminíferos. Por esse motivo, a adição de diluentes ao sêmen é uma prática de rotina nos estabelecimentos que realizam inseminação artificial, com a finalidade de aumentar o aproveitamento do ejaculado. A diluição também permite manter a qualidade do sêmen por várias horas, quando resfriado, ou por períodos mais longos, quando congelado. Para a manutenção da capacidade fertilizante do sêmen resfriado, substratos energéticos e agentes tampões devem ser incluídos no diluente. Para diminuir os danos sofridos pelos espermatozoides durante o congelamento, crioprotetores são adicionados ao sêmen. Entre eles, a dimetilacetamida vem sendo o mais utilizado nos protocolos para o congelamento de sêmen de galos nos últimos anos. A modulação lipídica do espermatozoide, por meio de dietas ou por adição de gema de ovo ou de seus derivados ao diluente, também auxilia na preservação do sêmen. Os benefícios são ainda maiores quando antioxidantes são incluídos.(AU)
Selecting breeders capable of transmit characteristics of economic value to the offspring is fundamental to poultry industry success. In this sense, males must produce good quality semen, with appropriate volume and concentration. Rooster ejaculates are composed of a great amount of sperm cells suspended in a small volume of seminal plasma, originated in the seminiferous tubules. For this reason, adding diluents to semen is a common practice in artificial insemination establishments, aiming to increase ejaculate use. Dilution also allows semen quality maintenance for hours, when refrigerated, or for longer periods, when frozen. To keep fertilizing capacity of refrigerated sperm, energetic substrates and buffer agents must be included into the diluents. To decrease sperm damage during freezing, cryoprotectants are added to the semen. Among them, dimethylacetamide has been the most used in freezing protocols for rooster semen in the last years. Sperm lipid modulation, by dietary means or by adding egg yolk or its derivates to the diluents, also helps in semen preservation. Benefits are improved when antioxidants are included.(AU)