RESUMO

Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 µm (± 3.63 µm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 µm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

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ABSTRACT: Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 μm (± 3.63 μm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

RESUMO: A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 μm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

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The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ear's skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.(AU)

O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.(AU)

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ABSTRACT: The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ears skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.

RESUMO: O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.

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The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ear's skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.(AU)

O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.(AU)

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We have determined the in vitro activity of antifungal, antibacterial, and antiprotozoal drugs alone and in combination against seven Conidiobolus lamprauges clinical isolates. The assays were based on the M38-A2 protocol and the checkerboard microdilution method. The lowest inhibitory concentrations were observed for amphotericin B, miconazole (MCZ), terbinafine, and miltefosine (MTF) (MIC range 0.25-1; 2-8; 0.25-2; 2-16 µg/ml, respectively). The main synergism observed was through the combination of azithromycin (AZI)+MTF and dapsone (DAP)+MTF (100%), AZI+DAP (85.7%), AZI+MCZ (57.1%) as well as MCZ plus CTX and DAP (42.9%). The in vitro activities suggest that the combination of MTF and AZI or DAP are promising candidate therapies for conidiobolomycosis.

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Data regarding the susceptibility of Conidiobolus lamprauges is limited and there is no consensus about the optimal treatment for infections caused by Conidiobolus spp. In this context, the objective of this study was to evaluate the in vitro susceptibility of six C. lamprauges strains isolated from sheep conidiobolomycosis to amphotericin B, ketoconazole, fluconazole, itraconazole, posaconazole, voriconazole, anidulafungin, caspofungin, micafungin, flucytosine, and terbinafine using the CLSI M38-A2 microdilution technique. Terbinafine was the most active (MIC range <0.06-0.5 µg/mL). Resistance or reduced susceptibility was observed for amphotericin B and azole and echinocandin antifungals. Additional studies are necessary to determine the therapeutic potential of terbinafine as monotherapy or in combination therapy with other antifungals.

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El objetivo de este estudio fue describir clínica e histopatológicamente la rinitis micótica granulomatosa causada por Conidiobolus spp. en ovinos del departamento de Córdoba, Colombia. Fueron analizados siete ovinos criollos, hembras, con edades comprendidas entre 2 y 4 años, los cuales recibieron diagnóstico clínico e histopatológico de conidiobolomicosis. Se observaron manifestaciones clínicas similares en todos los ovinos: dificultad respiratoria debido a la obstrucción parcial de los orificios nasales, intolerancia al ejercicio, respiración ruidosa, secreción puro-sanguinolenta bilateral y aumento de volumen de la cavidad nasal. A la necropsia, las cabezas fueron seccionadas longitudinalmente sobre la línea media y se observaron masas de coloración amarillenta irregular con áreas focalizadas de color café oscuro, friable y con coágulos de sangre en la región rinofacial y conchas nasales. En la coloración de H-E, la mucosa de la cavidad nasal presentó necrosis piogranulomatosa multifocal, conteniendo estructuras semejantes a hifas escasamente coloreadas y circundadas por infiltrado de neutrófilos, macrófagos y células gigantes, además de tejido conjuntivo fibroso organizados de forma paralela al rededor del área de necrosis y rodeados por material de Splendore-Hoeppli. En la coloración de Grocott, se observaron hifas irregulares, filamentosas y raramente septadas, cuya morfología es característica de conidiobolomicosis. El diagnóstico se fundamentó en las características clínicas y en los hallazgos histopatológicos, siendo el primer reporte de esta enfermedad en ovinos del departamento de Córdoba y en Colombia.

The objective of this study was to describe clinic and histopathological granulomatous fungal rhinitis caused by Conidiobolusspp. in sheep of the department of Cordoba, Colombia. Seven native sheep were analyzed, females, aged between 2 and 4 years, who were diagnosed clinically with conidiobolomycosis and correlated with histopathological aspects. In describing cases similar clinical manifestations were observed in all animals, difficulty breathing due to partial obstruction of the nostrils, exercise intolerance, noisy breathing, bloody purulent bilateral, similarly showed increased volume of nasal cavity. At necropsy, the heads were sectioned longitudinally on the midline and observed masses of irregular yellowing targeted areas dark brown, friable and blood clots in the nasal region and shells rhinofacial. In the HE stain, the mucosa of the nasal cavity showed multifocal necrosis pyogranulomatous containing hyphae like structures slightly colored and surrounded by infiltration of neutrophils, macrophages and giant cells, and fibrous connective tissue arranged in parallel around the area of necrosis and surrounded by Splendore-Hoeppli material. In the Grocott stain, irregular, filamentous and rarely septate hyphae were observed, suggesting the morphology of the hyphae in the tissue, which is characteristic of conidiobolomycosis. The diagnosis was based on the clinic and histopathological findings, the first report of the disease in sheep of department of Córdoba and Colombia.

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The present study aimed to report the occurrence as well as the clinical, laboratorial, pathological and mycological findings of three outbreaks of rhinocerebral and rhinopharyngeal conidiobolomycosis in sheep from Rio Grande do Norte state, Brazil. A total of six sheep with clinical signs of conidiobolomycosis were evaluated, and information on history was obtained from ranchers. Clinical signs included depression, progressive emaciation, sero-sanguinolent nasal discharge, tachycardia, dyspnea, miosis and unilateral exophthalmia with increased ocular globe volume, corneal ulceration and nervous system signs. The main hematological alteration was neutrophilia. Serum biochemical evaluation revealed increased values for AST, GGT, creatinine, urea, and glucose, and decreased total proteins and albumin levels. Cerebrospinal fluid analysis showed the presence of fibrin reticules and pleocytosis. Upon necropsy, longitudinal sections of the head revealed the presence of a nodular mass with a friable consistency and a white-yellowish coloration. Microscopic findings included meningitis, cortex necrosis and encephalitis with the presence of eosinophilic Splendore-Hoeppli substance. Histopathology of the lungs revealed a Splendore-Hoeppli-like material and hyperplasia of alveolar and bronchiolar epithelium. Renal lesions were suggestive of amyloidosis.

O presente estudo objetivou relatar a ocorrência e os achados clínicos, laboratoriais, patológicos e micológicos de três surtos de conidiobolomicose rinocerebral e rinofaríngea em ovinos do estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Um total de seis ovinos com sinais clínicos de conidiobolomicose foi avaliado, e informações sobre o histórico foram obtidas dos proprietários. Os sinais clínicos incluíram depressão, emaciação progressiva, descarga nasal serossanguinolenta, taquicardia, dispneia, miosite e exoftalmia unilateral com aumento do volume do globo ocular, ulceração da córnea e sinais nervosos. A principal alteração hematológica foi neutrofilia. A avaliação bioquímica sérica revelou aumento nos valores de AST, GGT, creatinina, ureia e glicose, e redução nos níveis de proteínas totais e albumina. A análise do fluido cerebrospinal revelou presença de retículos de fibrina e pleocitose. À necropsia, secções longitudinais da cabeça revelaram presença de uma massa nodular com consistência friável e coloração branco-amarelada. Os achados microscópicos incluíram meningite, necrose do córtex e encefalite com presença da substância eosinofílica de Splendore-Hoeppli. A histopatologia dos pulmões revelou uma substância similar à de Splendore-Hoeppli e hiperplasia do epitélio alveolar e bronquiolar. As lesões renais foram sugestivas de amiloidose.