RESUMO
The use of run-over wild animals is an efficient strategy for scientific research of pathogens. The aim of this study was to detect DNA from phylum Apicomplexa in the brain of road-killed wild animals from the NorthCentral and North Pioneer mesoregions of Paraná, Brazil. Pre-established transects were run weekly; when found, animals were packed into individual packages and sent for autopsy. The brain fragments were collected and kept at -20 ° C until processing. The DNA extracted from the samples was amplified by nested-PCR for the 18S rDNA gene from the phylum Apicomplexa. All positive samples were submitted to DNA sequencing to define the species. A total of 90 animals were collected, however, only 68 animals (75.6%) that had integrity of the brain were included in the study. It was possible to identify the species by DNA sequencing in four samples: Sarcocystis spp. was identified in one Colaptes melanochloros (Greenbarred woodpecker) and one Mazama gouazoubira (Gray brocket). Neospora caninum was observed in a Leopardus pardalis (Ocelot) and T. gondii was present in Didelphis albiventris (white-eared opossum). The results indicated that parasites with economic and public health relevance were present in wild animals, which may favor infection of humans and animals.(AU)
O uso de animais silvestres atropelados é uma estratégia eficiente para a pesquisa científica de patógenos. O objetivo deste estudo foi detectar DNA de parasitas do filo Apicomplexa em amostras de cérebro de animais silvestres atropelados nas mesorregiões Centro-Norte e Pioneira do Norte do Paraná, Brasil. Os transectos pré-estabelecidos foram percorridos semanalmente; quando encontrados, os animais foram armazenados em embalagens individuais e enviados para autópsia. Os fragmentos cerebrais foram coletados e mantidos a -20 ° C até o processamento. O DNA extraído das amostras foi amplificado por nested-PCR para o gene 18S rDNA do filo Apicomplexa. Todas as amostras positivas foram submetidas ao sequenciamento de DNA para definição da espécie. Um total de 90 animais foram coletados, no entanto, foram incluídos no estudo apenas 68 animais (75,6%) que apresentavam encéfalo. No sequenciamento foi possível identificar parasitos apicomplexos pelo sequenciamento de DNA em quatro amostras: Sarcocystis spp. em Colaptes melanochloros (pica-pau-verde-barrado) e em Mazama gouazoubira (veadocatingueiro); Neospora caninum em Leopardus pardalis (jaguatirica); e T. gondii em Didelphis albiventris (gambá-de-orelha-branca). Os resultados demonstraram que protozoários com relevância econômica e de saúde pública estavam presentes em animais silvestres, o que pode favorecer a infecção de humanos e animais.(AU)
Assuntos
Animais , Toxoplasmose , Apicomplexa/patogenicidade , Neospora , Cérebro/parasitologia , Animais Selvagens/parasitologiaRESUMO
Neospora caninum, Toxoplasma gondii and Hammondia spp. are coccidian parasites similar in morphology. Molecular techniques are necessary to detect parasite DNA isolated from stool samples in wild canids because they were reported as definitive hosts of N. caninum life cycle. The objective of this study was to develop a highly sensitive and accurate molecular method for the identification of coccidian Apicomplexa parasites in crab-eating fox (Cerdocyon thous) and pampas fox (Lycalopex gymnocercus). Tissue samples from road-killed animals (pampas fox = 46, crab-eating fox = 55) and feces (pampas fox = 84, crab-eating fox = 2) were collected, and species were diagnosed through molecular assay. PCR was used for the amplification of a fragment of the coccidian Apicomplexa nss-rRNA gene. Additionally, we developed a novel real-time PCR TaqMan™ probe approach to detect T. gondii- Hammondia spp. and N. caninum. This is the first report of N. caninum DNA in pampas fox feces (n = 1), thus it was also detected from pampas fox tissues (n = 1). Meanwhile, T. gondii was found in tissues of pampas (n = 1) and crab-eating (n = 1) foxes and H. triffittae in one crab-eating fox tissue. Despite the low percentage (2.5%) of positive samples, the molecular method developed in this study proved to be highly sensitive and accurate allowing to conduct an extensive monitoring analysis for these parasites in wildlife.
Assuntos
Apicomplexa/genética , Raposas/parasitologia , Infecções por Protozoários/diagnóstico , Animais , Animais Selvagens/genética , Apicomplexa/patogenicidade , Coccídios/genética , Coccídios/parasitologia , Fezes/microbiologia , Fezes/parasitologia , Comportamento Alimentar , Raposas/genética , Epidemiologia Molecular/métodos , Neospora/genética , Neospora/patogenicidade , Parasitos/genética , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Infecções por Protozoários/genética , UruguaiRESUMO
The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.(AU)
O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.(AU)
Assuntos
Animais , Toxoplasma/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase , Apicomplexa/patogenicidade , Alouatta/microbiologia , Técnicas de Genotipagem/veterinária , Animais Selvagens/microbiologia , Infecções por Protozoários/diagnóstico , DNA de Protozoário , Técnicas de Diagnóstico Molecular , InfecçõesRESUMO
The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.(AU)
O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.(AU)
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Animais , Toxoplasma/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase , Apicomplexa/patogenicidade , Alouatta/microbiologia , Técnicas de Genotipagem/veterinária , Animais Selvagens/microbiologia , Infecções por Protozoários/diagnóstico , DNA de Protozoário , Técnicas de Diagnóstico Molecular , InfecçõesRESUMO
Haemoproteus spp. are protozoan parasites found in birds around the world. These parasites are identified through the morphology of gametocytes, phylogenetic analysis based on the mitochondrial cytb gene, and the parasites geographic distribution. The absence of erythrocytic merogony, high intraspecific genetic variation and low parasitemia in wild birds makes it essential to use integrative approaches that assist in the identification of these parasites. Thus, microscopic and molecular analyses, combined with spatial distribution, were carried out to verify the presence of Haemoproteus spp. in wild birds in Brazil. Light microscopy revealed one Tangara sayaca bird was parasitized by Haemoproteus coatneyi and, two specimens of Zonotrichia capensis presented Haemoproteus erythrogravidus. The morphology of the gametocytes of these two parasitic species showed high similarity. The molecular analysis revealed the presence of one lineage of H. coatneyi and two lineages of H. erythrogravidus, one of which is considered a new lineage. These lineages were grouped phylogenetically in separate clades, with low genetic divergence, and the H. erythrogravidus lineage emerged as an internal group of the lineages of H. coatneyi. The geographic distribution demonstrated that the two species occur in the American continent. This is the first report of H. erythrogravidus in Brazil.(AU)
Haemoproteus spp. são protozoários parasitos encontrados em aves de todo o mundo. A identificação desses parasitos é realizada por meio da morfologia dos gametócitos, da análise filogenética, baseada no gene mitoncodrial cytb e na distribuição geográfica do parasito. A ausência de merogonia eritrocítica, a alta variação genética intraespecífica e a baixa parasitemia em aves silvestres, tornam essencial a utilização de abordagens integrativas que auxiliem na identificação desses parasitos. Assim, análises microscópicas e moleculares, aliadas à distribuição espacial, foram realizadas para verificar a presença de Haemoproteus spp. em aves silvestres no Brasil. A microscopia óptica demonstrou que uma ave Tangara sayaca estava parasitada por Haemoproteus coatneyi, e dois espécimes de Zonotrichia capensis apresentavam Haemoproteus erythrogravidus, cujas morfologias dos gametócitos apresentaram alta similaridade. A análise molecular recuperou uma linhagem de H. coatneyi e duas linhagens de H. erythrogravidus, sendo uma dessas considerada nova linhagem. Essas linhagens se agruparam filogeneticamente em clados separados, apresentando baixa divergência genética, sendo que as linhagens de H. erythrogravidus emergiram como grupo interno às linhagens de H. coatneyi. A distribuição geográfica demonstrou que as duas espécies estão ocorrendo no continente americano. Este é o primeiro relato de H. erythrogravidus no Brasil.(AU)
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Animais , Passeriformes/microbiologia , Apicomplexa/patogenicidade , FilogeniaRESUMO
Hepatozoon spp. are Apicomplexan protozoa that parasitize a wide diversity of vertebrate hosts. In Brazil, few studies have reported the occurrence of Hepatozoon spp. in rodent species. Additionally, an evaluation of the population structure and distribution of Hepatozoon species over several Brazilian biomes has not yet been performed. The present work aimed to investigate the genetic diversity of Hepatozoon spp. in rodents from 31 genera sampled in five Brazilian biomes. Samples were submitted to PCR assays for Hepatozoon spp. targeting two regions of the 18S rRNA gene. Infection by Hepatozoon spp. was detected in 195 (42.2%) rodents comprising 24 genera. Phylogenetic analyses of 18S rRNA sequences grouped all sequences in the clade of Hepatozoon spp. previously detected in rodents and reptiles, apart from those detected in domestic/wild carnivores. These data raise two non-exclusive hypotheses: (i) rodents play an important role as intermediate or paratenic hosts for Hepatozoon infections in reptiles; and (ii) rodents do not seem to participate in the epidemiology of Hepatozoon infections of domestic/wild canids and felids in Brazil. TCS analyses performed with available 18S rRNA Hepatozoon sequences detected in rodents from Brazil showed the occurrence of six haplotypes, which were distributed in two large groups: one from rodents inhabiting the coastal region of Brazil and Mato Grosso state, and another from rodents from the central region of the country. A wide survey of the South American territory will help to elucidate the evolutionary history of Hepatozoon spp. parasitizing Rodentia in the American continent.
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Apicomplexa/genética , Variação Genética , Roedores/parasitologia , Animais , Apicomplexa/patogenicidade , Brasil , Carnívoros/parasitologia , Haplótipos , Filogenia , Infecções Protozoárias em Animais/parasitologia , RNA Ribossômico 18SRESUMO
Social insects face strong selection from parasites because the conditions of group living often favor the transmission of infection among nestmates. However, there is little detailed information on the effects of parasite infection in the host species. Workers of Polybia species, neotropical swarm-founding wasps, are commonly infected by gregarines, protozoans that are exclusively parasitic on invertebrates. Previous studies showed that high rates of gregarine infection in workers of Polybia occidentalis (Olivier) have negative effects on their colony performance. However, the effect of seasonality on infection rates throughout the year or between wet and dry seasons has not been examined. Host-parasite interactions cannot be understood without consideration of the overall population dynamic. We compared rates of gregarine infection in workers of Polybia paulista (Ihering) between wet and dry seasons and among months. The 35% rate was by far the highest of the four wet seasons sampled, but the rates declined in the mid-wet season and were very low during the dry season. Strong seasonal differences in infection rates were also observed between the dry and wet seasons. Several potential factors affecting the seasonal differences are discussed.
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Apicomplexa/isolamento & purificação , Estações do Ano , Vespas/parasitologia , Animais , Apicomplexa/patogenicidade , Brasil , Interações Hospedeiro-ParasitaRESUMO
This study reports the pathogen Perkinsus beihaiensis in oysters of the genus Crassostrea on the coast of the State of Bahia (Brazil), its prevalence, infection intensity and correlation with salinity. Oysters (n = 240) were collected between October and December 2014 at eight sampling stations between latitudes 13°55'S and 15°42'S. The laboratory procedures included macroscopic analysis, histology, culture in Ray's fluid thioglycollate medium (RFTM), Polymerase Chain Reaction (PCR) and DNA sequencing. PCR and sequencing have been used for the genetic identification of oysters as well. Two species of oysters have been identified: Crassostrea rhizophorae and C. brasiliana. In both oyster species P. beihaiensis was the only Perkinsus species detected. In C. rhizophorae, the average prevalence was 82.8% by histology and 65.2% by RFTM. In C. brasiliana, the prevalences were 70.5% and 35.7%, respectively. The higher prevalence of P. beihaiensis in C. rhizophorae was probably influenced by salinity, with which was positively correlated (r> 0.8). In both oysters, P. beihaiensis was located mainly in the gastric epithelium. The infection was generally mild or moderate, without apparent harm to the hosts, but in cases of severe infection, there was hemocytical reaction and tissue disorganization. The generally high prevalence in the region suggests that oysters should be monitored with respect to this pathogen, especially in growing areas.(AU)
Este estudo relata o patógeno Perkinsus beihaiensis em ostras do gênero Crassostrea no litoral do Estado da Bahia (Brasil), sua prevalência, intensidade de infecção e correlação com a salinidade. As ostras (n = 240) foram coletadas entre outubro e dezembro de 2014 em oito estações amostrais entre as latitudes 13°55'S e 15°42'S. Os procedimentos laboratoriais incluíram análise macroscópica, histologia, cultivo em meio de tioglicolato de Ray (RFTM), reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento de DNA. PCR e sequenciamento foram também utilizados para a identificação genética das ostras. Foram identificadas duas espécies de ostras: Crassostrea rhizophorae e C. brasiliana. Em ambas as espécies, P. beihaiensis foi a única espécie de Perkinsus detectada. Em C. rhizophorae, a prevalência média foi de 82,8% por histologia e de 65,2% por RFTM. Em C. brasiliana, as prevalências foram de 70,5% e 35,7%, respectivamente. A maior prevalência de P. beihaiensis em C. rhizophorae foi provavelmente influenciada pela salinidade, com a qual este apresentou correlação positiva (r>0,8). Em ambas as espécies, P. beihaiensis esteve localizada principalmente no epitélio gástrico. A infecção foi geralmente leve ou moderada, sem danos aparentes aos hospedeiros, mas em casos de infecção severa, houve reação hemocitária e desorganização de tecidos. As prevalências geralmente altas na região sugerem que as ostras devam ser monitoradas com relação a este patógeno, principalmente em áreas de cultivo.(AU)
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Animais , Crassostrea/parasitologia , Apicomplexa/patogenicidade , Infecções Protozoárias em Animais/diagnóstico , BrasilRESUMO
Migratory animals undergo seasonal and often spectacular movements and perform crucial ecosystem services. In response to anthropogenic changes, including food subsidies, some migratory animals are now migrating shorter distances or halting migration altogether and forming resident populations. Recent studies suggest that shifts in migratory behaviour can alter the risk of infection for wildlife. Although migration is commonly assumed to enhance pathogen spread, for many species, migration has the opposite effect of lowering infection risk, if animals escape from habitats where pathogen stages have accumulated or if strenuous journeys cull infected hosts. Here, we summarize responses of migratory species to supplemental feeding and review modelling and empirical work that provides support for mechanisms through which resource-induced changes in migration can alter pathogen transmission. In particular, we focus on the well-studied example of monarch butterflies and their protozoan parasites in North America. We also identify areas for future research, including combining new technologies for tracking animal movements with pathogen surveillance and exploring potential evolutionary responses of hosts and pathogens to changing movement patterns. Given that many migratory animals harbour pathogens of conservation concern and zoonotic potential, studies that document ongoing shifts in migratory behaviour and infection risk are vitally needed.This article is part of the theme issue 'Anthropogenic resource subsidies and host-parasite dynamics in wildlife'.
Assuntos
Ração Animal/provisão & distribuição , Migração Animal/fisiologia , Aves/imunologia , Borboletas/parasitologia , Quirópteros/imunologia , Cervos/imunologia , Animais , Animais Selvagens , Apicomplexa/patogenicidade , Aves/microbiologia , Aves/parasitologia , Borboletas/imunologia , Quirópteros/microbiologia , Cervos/microbiologia , Cervos/parasitologia , Ecossistema , Interações Hospedeiro-Parasita , Interações Hospedeiro-Patógeno , América do Norte , Dinâmica Populacional , Estações do Ano , América do SulRESUMO
Hepatozoon species are the most common intracellular hemoparasite found in reptiles. Hepatozoon caimani, whose vectors are Culex mosquitoes, has been detected in a high prevalence among caimans in Brazil by blood smears examinations. The present work aimed to detect and characterize the Hepatozoon spp. found in 33 caimans (24 free-ranging and 9 captive; 28 males and 5 females) (Caiman crocodilus yacare) sampled at Poconé, North Pantanal, state of Mato Grosso, Brazil, using blood smears examinations and molecular techniques. Hepatozoon spp.-gametocytes were found in 70.8% (17/24) and 88.8% (8/9) of blood smears from free-ranging and captive caimans, respectively. Hepatozoon spp. 18S rRNA DNA was found in 79.2% (19/24) and 88.8% (8/9) of free-ranging and captive caimans, respectively. Comparative analysis of parasitized and non-parasitized erythrocytes showed that all analyzed features were significantly different (P 0.05) for both linear and area dimensions. Phylogenetic analysis based on 18S rRNA sequences grouped the Hepatozoon spp. sequences detected in the present study together with H. caimani, recently detected in caimans in southern Pantanal.(AU)
Espécies do gênero Hepatozoon são os hemoparasitas intracelulares mais comumente encontrados em répteis. Hepatozoon caimani, cujos vetores são mosquitos do gênero Culex sp., têm sido detectados em uma alta prevalência entre jacarés no Brasil, por meio da análise de esfregaços sanguíneos. O presente estudo objetivou detectar e caracterizar parasitas do gênero Hepatozoon spp. em 33 jacarés (24 de vida-livre e 9 de cativeiro; 28 machos e 5 fêmeas) (Caiman crocodilus yacare) amostrados em Poconé, região norte do Pantanal, estado do Mato Grosso, Brasil, por meio da análise de esfregaços sanguíneos e técnicas moleculares. Gametócitos de Hepatozoon spp. foram encontrados em 70,8% (17/24) e em 88,8% (8/9) dos esfregaços sanguíneos de jacarés de via-livre e cativeiro, respectivamente. 18S rRNA DNA de Hepatozoon spp. foi detectado em 79,2% (19/24) e 88,8% (8/9) das amostras de sangue de jacarés de vida-livre e cativeiro, respectivamente. A análise comparativa de eritrócitos parasitados e não parasitados mostrou diferença significativa (P 0,05) em todas as variáveis lineares e de área analisadas. A análise filogenética baseada em sequências de DNA do 18S rRNA agrupou as sequências de Hepatozoon spp. detectadas no presente estudo juntamente com aquelas de H. caimani, recentemente detectadas em jacarés do Pantanal do Mato Grosso do Sul.(AU)