RESUMO
OBJECTIVE: The purpose of this study was to develop an animal model for intrapartum inflammation at term to investigate the interactions between maternal and fetal inflammatory responses and adverse neurologic outcome. STUDY DESIGN: Lipopolysaccharide (160, 320, or 640 µg/kg) was administered intraperitoneally to day 20 term-pregnant Sprague Dawley rat dams 2, 4, and 6 hours before sample collection. Maternal outcomes included dam core temperature and plasma interleukin 6 (IL-6). Fetal outcomes included plasma IL-6, brain IL-6 messenger RNA expression, and brain IL-6 protein expression. Primary cortical cell cultures were prepared to examine neuronal morphologic condition. Neurite counts were obtained with the use of automated Sholl analysis. RESULTS: Maternal plasma IL-6 levels peaked 2 hours after lipopolysaccharide stimulus and rapidly resolved, except for an observed low level persistence at 6 hours with 640 µg/kg. Fetal plasma and placental IL-6 expression also peaked rapidly but only persisted in placental samples. Fetal brain IL-6 RNA and protein expression was significantly higher than control litters at 6 hours after the exposure to both 320 µg/kg (P ≤ .05) and 640 µg/kg (P ≤ .01). Cortical cells from fetuses that were exposed for 6 hours to maternal systemic inflammation showed reduced neurite number and neurite length (P < .001) with increasing lipopolysaccharide dose. CONCLUSION: Our results demonstrate that fetal brain injury follows isolated systemic maternal inflammation and that fetal brain inflammation lags after maternal stimulus, which creates a potential 4-hour clinical window for therapeutic intervention.
Assuntos
Encéfalo/patologia , Corioamnionite/imunologia , Interleucina-6/metabolismo , Animais , Biomarcadores/metabolismo , Western Blotting , Temperatura Corporal , Encéfalo/metabolismo , Células Cultivadas , Corioamnionite/metabolismo , Corioamnionite/patologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Feminino , Imunofluorescência , Lipopolissacarídeos/administração & dosagem , Reação em Cadeia da Polimerase , Gravidez , Ratos , Ratos Sprague-DawleyRESUMO
INTRODUCTION: Escherichia coli is recognized as an etiological bacteria associated with chorioamnionitis and the preterm premature rupture of fetal membranes. This pathological condition induces pro-inflammatory cytokines and degradative metalloproteinases, which are considered biological markers secreted in an acute stage of infection. Heat-shock proteins (HSPs) are an important component of the innate immunity response and are found in different pathological conditions. They have not been previously measured in human fetal membranes in response to infectious conditions. We hypothesized that the choriodecidual tissue and amniotic epithelium secreted temporal and differential Hsp-60, Hsp-70, and interleukin (IL)-1ß mediated by E. coli infection. METHODS: Fetal membranes were mounted in a two-compartment culture system and infected with two passes of live E. coli at different doses (10², 104, 105, and 106 colony-forming units (CFU)/mL) and intervals of incubation (3, 6, and 24 h). The culture medium was collected, and Hsp-60, Hsp-70, and IL-1ß were assessed using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. RESULTS: After 3 and 6 h of infection, E. coli induced an increase in Hsp-70 secretion in the choriodecidual tissue. However, after 24 h of incubation, Hsp-70 was downregulated and we observed an increase in IL-1ß secretion. By contrast, E. coli induced a lower Hsp-60 secretion in the amnion compared to Hsp-70. DISCUSSION: Human fetal membranes responded actively to E. coli infection, with an increase in Hsp-70 during the first hours of infection. After 24 h, there was an increase in the liberation of IL-1ß.
Assuntos
Escherichia coli/imunologia , Membranas Extraembrionárias/metabolismo , Membranas Extraembrionárias/microbiologia , Proteínas de Choque Térmico HSP110/metabolismo , Proteínas de Choque Térmico HSP70/metabolismo , Interleucina-1beta/metabolismo , Regulação para Cima , Âmnio/imunologia , Âmnio/metabolismo , Âmnio/microbiologia , Chaperonina 60/metabolismo , Corioamnionite/imunologia , Corioamnionite/metabolismo , Corioamnionite/microbiologia , Córion/imunologia , Córion/metabolismo , Córion/microbiologia , Decídua/imunologia , Decídua/metabolismo , Decídua/microbiologia , Regulação para Baixo , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Escherichia coli/isolamento & purificação , Infecções por Escherichia coli/imunologia , Infecções por Escherichia coli/metabolismo , Infecções por Escherichia coli/microbiologia , Membranas Extraembrionárias/imunologia , Feminino , Humanos , Imunidade Inata , Cinética , Proteínas Mitocondriais/metabolismo , Gravidez , Técnicas de Cultura de TecidosAssuntos
Doenças do Prematuro/etiologia , Recém-Nascido Prematuro , Recém-Nascido de muito Baixo Peso , Leucomalácia Periventricular/etiologia , Sepse/complicações , Biomarcadores/sangue , Corioamnionite/sangue , Corioamnionite/imunologia , Citocinas/sangue , Feminino , Humanos , Recém-Nascido , Doenças do Prematuro/sangue , Leucomalácia Periventricular/sangue , GravidezAssuntos
Feminino , Humanos , Recém-Nascido , Gravidez , Recém-Nascido Prematuro , Recém-Nascido de muito Baixo Peso , Doenças do Prematuro/etiologia , Leucomalácia Periventricular/etiologia , Sepse/complicações , Biomarcadores/sangue , Corioamnionite/sangue , Corioamnionite/imunologia , Citocinas/sangue , Doenças do Prematuro/sangue , Leucomalácia Periventricular/sangueRESUMO
En 1994 en un estudio realizado por nuestro grupo en colabaración con la Dra. Fuksman sobre 1.200 placentas correspondientes a embarazos de alto riesgo, se halló la presencia de villitis en el 5.6 por ciento de las mismas. La histopatología detectada en ese momento fue deciduitis linfocitaria y aumento de fibrina perirvellositaria asociada con hipoirrigación e infarto placentario. Hallamos que en el 55 por ciento de las placentas con villitis los recién nacidos presentaban RCIU con respecto al 10 por ciento de los controles, con un PA de 32 por ciento en las villitis y el 83 por ciento en los controles (3). En ese material se estudiaron 68 placentas con villitis y 68 placentas sin villitis como grupo control. En 1996 demostramos en ese mismo material mediante la técnica de anticuerpos monoclonales, sobre cortes de placenta estudiando las subpoblaciones linfocitarias de las villitis, que el 50 por ciento eran CD4 (linfocitos helper), 18 por ciento CD8 (linfocitos supresoreslcitotóxicos) y 10 por ciento Leu19 (Natural Killer) pero lo significativo y anormal es que hallamos que el 65 por ciento de los linfocitos expresaban antígenos de histocompatibilidad clase II DR (40). En 1998 Jacques y Col publicaron datos similares. En 1999 comunicamos que en el informe histopatológico de material de legrado de pacientes abortadoras de causa inmunológica la descripción de villitis en un 20 por ciento de los casos. Estudios realizados en colabaración con la Dra. Zenclussen con ese material nos permitió publicar recientemente la presencia de altos niveles de Interleuquina 6(IL-6) y receptor de IL-6 en suero. El objetivo de este estudio es investigar en placentas de pacientes abortadoras recurrentes la expresión de IL-6 y sus receptores gp80 y gp130 en trece muestras de material de raspado de abortos del primer trimestre mediante la técnica de inmunofluorescencia. Como control se utilizaron cortes de placentas de embarazos normales a término. Nuestros hallazgos muestran la presencia de depósitos de IL-6 y de receptores de IL-6 con un patrón granular para las tres moléculas especificamente en el sinciciotrofoblasto mientras que fue negativo para tres en el citotrofoblasto. En los cortes de placentas normales no se hallaron en ningún caso dichos depósitos. Concluímos de todos los hallazgos antes sintetizados...
Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Feminino , Gravidez , Aborto Espontâneo/etiologia , Interleucina-6/efeitos adversos , Placenta/patologia , Trofoblastos/patologia , Aborto Espontâneo/imunologia , Anticorpos Monoclonais , Antígenos de Histocompatibilidade Classe II , Linfócitos T CD4-Positivos , Linfócitos T CD8-Positivos , Corioamnionite/imunologia , Corioamnionite/fisiopatologia , Decídua/patologia , Antígenos de Histocompatibilidade , Imuno-Histoquímica , Primeiro Trimestre da Gravidez/efeitos dos fármacos , Gravidez de Alto Risco/imunologia , Receptores de Interleucina-6/imunologiaRESUMO
En 1994 en un estudio realizado por nuestro grupo en colabaración con la Dra. Fuksman sobre 1.200 placentas correspondientes a embarazos de alto riesgo, se halló la presencia de villitis en el 5.6 por ciento de las mismas. La histopatología detectada en ese momento fue deciduitis linfocitaria y aumento de fibrina perirvellositaria asociada con hipoirrigación e infarto placentario. Hallamos que en el 55 por ciento de las placentas con villitis los recién nacidos presentaban RCIU con respecto al 10 por ciento de los controles, con un PA de 32 por ciento en las villitis y el 83 por ciento en los controles (3). En ese material se estudiaron 68 placentas con villitis y 68 placentas sin villitis como grupo control. En 1996 demostramos en ese mismo material mediante la técnica de anticuerpos monoclonales, sobre cortes de placenta estudiando las subpoblaciones linfocitarias de las villitis, que el 50 por ciento eran CD4 (linfocitos helper), 18 por ciento CD8 (linfocitos supresoreslcitotóxicos) y 10 por ciento Leu19 (Natural Killer) pero lo significativo y anormal es que hallamos que el 65 por ciento de los linfocitos expresaban antígenos de histocompatibilidad clase II DR (40). En 1998 Jacques y Col publicaron datos similares. En 1999 comunicamos que en el informe histopatológico de material de legrado de pacientes abortadoras de causa inmunológica la descripción de villitis en un 20 por ciento de los casos. Estudios realizados en colabaración con la Dra. Zenclussen con ese material nos permitió publicar recientemente la presencia de altos niveles de Interleuquina 6(IL-6) y receptor de IL-6 en suero. El objetivo de este estudio es investigar en placentas de pacientes abortadoras recurrentes la expresión de IL-6 y sus receptores gp80 y gp130 en trece muestras de material de raspado de abortos del primer trimestre mediante la técnica de inmunofluorescencia. Como control se utilizaron cortes de placentas de embarazos normales a término. Nuestros hallazgos muestran la presencia de depósitos de IL-6 y de receptores de IL-6 con un patrón granular para las tres moléculas especificamente en el sinciciotrofoblasto mientras que fue negativo para tres en el citotrofoblasto. En los cortes de placentas normales no se hallaron en ningún caso dichos depósitos. Concluímos de todos los hallazgos antes sintetizados...(AU)
Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Feminino , Gravidez , Aborto Espontâneo/etiologia , Placenta/patologia , Trofoblastos/patologia , Interleucina-6/efeitos adversos , Primeiro Trimestre da Gravidez/efeitos dos fármacos , Aborto Espontâneo/imunologia , Anticorpos Monoclonais/diagnóstico , Antígenos de Histocompatibilidade , Antígenos de Histocompatibilidade Classe II , Linfócitos T CD4-Positivos , Linfócitos T CD8-Positivos , Decídua/patologia , Receptores de Interleucina-6/imunologia , Imuno-Histoquímica , Gravidez de Alto Risco/imunologia , Corioamnionite/imunologia , Corioamnionite/fisiopatologiaRESUMO
Chorioamnionitis, a major cause of preterm birth with significant neonatal morbidity and mortality, frequently occurs in mothers who are free of symptoms. A combined clinical, radiologic, and pathologic study of 129 very low birth weight infants indicated a significant association between a markedly decreased thymic size at birth and subclinical chorioamnionitis.
Assuntos
Corioamnionite/complicações , Recém-Nascido de muito Baixo Peso , Timo/patologia , Atrofia , Estudos de Casos e Controles , Corioamnionite/diagnóstico , Corioamnionite/imunologia , Corioamnionite/metabolismo , Feminino , Humanos , Recém-Nascido , Masculino , Gravidez , Radiografia , Timo/diagnóstico por imagemRESUMO
OBJECTIVE: The proposal was to study the presence of immunoglobulin A (IgA) in the chorioamniotic membrane of healthy postpartum women with premature rupture of the chorioamniotic membrane (PROM). METHOD: A single radial immunodiffusion technique was used to quantify the IgA in the chorioamniotic membrane tissues. RESULTS: The level of IgA was approximately 10 times higher in patients whose membranes had been ruptured for > 10 h (24.58 mg/dl). These results were compared with those of a previously published study where the mean of amount of IgA was 2.52 mg/dl in membranes of patients with rupture < 10 h. Our results show that IgA began to rise after 10-15 h following rupture. CONCLUSION: Although more studies need to be performed our data indicate that the increasing IgA in our patients after 10 h of latency probably represents the beginning of an ascending colonization of bacteria which could be the source of future infection.