RESUMO
Cellular senescence is characteristic of the development and progression of multiple age-associated diseases. Accumulation of senescent cells in the heart contributes to various age-related pathologies. Several compounds called senolytics have been designed to eliminate these cells within the tissues. In recent years, the use and study of senolytics increased, representing a promising field for finding accessible and safe therapies for cardiovascular disease (CVD) treatment. This mini-review discusses the changes in the aging heart and the participation of senescent cells in CVD, as well as the use of senolytics to prevent the progression of myocardial damage, mainly the effect of dasatinib and quercetin. In particular, the mechanisms and physiological effects of senolytics therapies in the aged heart are discussed.
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Doenças Cardiovasculares , Quercetina , Humanos , Dasatinibe/farmacologia , Quercetina/farmacologia , Senoterapia , Doenças Cardiovasculares/tratamento farmacológico , Envelhecimento , Senescência Celular/fisiologiaRESUMO
Cellular senescence is a defense mechanism to arrest proliferation of damaged cells. The number of senescent cells increases with age in different tissues and contributes to the development of age-related diseases. Old mice treated with senolytics drugs, dasatinib and quercetin (D+Q), have reduced senescent cells burden. The aim of this study was to evaluate the effects of D+Q on testicular function and fertility of male mice. Mice (n = 9/group) received D (5 mg kg-1) and Q (50 mg kg-1) via gavage every moth for three consecutive days from 3 to 8 months of age. At 8 months mice were breed with young non-treated females and euthanized. The treatment of male mice with D+Q increased serum testosterone levels and sperm concentration and decreased abnormal sperm morphology. Sperm motility, seminiferous tubule morphometry, testicular gene expression and fertility were not affected by treatment. There was no effect of D+Q treatment in ß-galactosidase activity and in lipofuscin staining in testes. D+Q treatment also did not affect body mass gain and testes mass. In conclusion, D+Q treatment increased serum testosterone levels and sperm concentration and decreased abnormal sperm morphology, however did not affect fertility. Further studies with older mice and different senolytics are necessary to elucidate the effects in the decline of sperm output (quality and quantity) associated with aging.
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Quercetina , Testosterona , Feminino , Masculino , Animais , Camundongos , Quercetina/farmacologia , Dasatinibe/farmacologia , Senoterapia , Motilidade dos Espermatozoides , Sêmen/metabolismo , EspermatozoidesRESUMO
The TcK2 protein kinase of Trypanosoma cruzi, the causative agent of Chagas disease, is structurally similar to the human kinase PERK, which phosphorylates the initiation factor eIF2α and, in turn, inhibits translation initiation. We have previously shown that absence of TcK2 kinase impairs parasite proliferation within mammalian cells, positioning it as a potential target for treatment of Chagas disease. To better understand its role in the parasite, here we initially confirmed the importance of TcK2 in parasite proliferation by generating CRISPR/Cas9 TcK2-null cells, albeit they more efficiently differentiate into infective forms. Proteomics indicates that the TcK2 knockout of proliferative forms expresses proteins including trans-sialidases, normally restricted to infective and nonproliferative trypomastigotes explaining decreased proliferation and better differentiation. TcK2 knockout cells lost phosphorylation of eukaryotic initiation factor 3 and cyclic AMP responsive-like element, recognized to promote growth, likely explaining both decreased proliferation and augmented differentiation. To identify specific inhibitors, a library of 379 kinase inhibitors was screened by differential scanning fluorimetry using a recombinant TcK2 encompassing the kinase domain and selected molecules were tested for kinase inhibition. Only Dasatinib and PF-477736, inhibitors of Src/Abl and ChK1 kinases, showed inhibitory activity with IC50 of 0.2 ± 0.02 mM and 0.8 ± 0.1, respectively. In infected cells Dasatinib inhibited growth of parental amastigotes (IC50 = 0.6 ± 0.2 mM) but not TcK2 of depleted parasites (IC50 > 34 mM) identifying Dasatinib as a potential lead for development of therapeutics for Chagas disease targeting TcK2.
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Doença de Chagas , Parasitos , Trypanosoma cruzi , Animais , Humanos , Trypanosoma cruzi/genética , eIF-2 Quinase/genética , eIF-2 Quinase/metabolismo , Dasatinibe , Doença de Chagas/tratamento farmacológico , Doença de Chagas/parasitologia , Proliferação de Células , Mamíferos/metabolismoRESUMO
BACKGROUND: Preclinical studies suggest that senolytic compounds such as quercetin (a natural product) and dasatinib (a synthetic product) decrease senescent cells, reduce inflammation, and alleviate human frailty. This evidence has opened a new field of research for studying the effect of these compounds on age-related dysfunction and diseases. OBJECTIVE: The present study performed in silico and we identified new potential senolytic candidates from an extensive database that contains natural products (NPs) and semi-synthetic products (SMSs). METHODS: Computer programs Chemminer and rcdk packages, which compared the fingerprints of numerous molecules (40,383) with reference senolytics, and the creation of a pharmacological network built with signaling pathways and targets involved in senescence processes were used to identify compounds with a potential activity. RESULTS: Six drug-like candidates (3,4'-dihydroxypropiophenone, baicalein, α, ß-dehydrocurvularin, lovastatin, luteolin, and phloretin) were identified. CONCLUSION: To our knowledge, this is the first time that these six natural molecules have been proposed to have senolytic activity. To validate the methodology employed in the identification of new drug-like senolytics, experimental evidence is needed with models that evaluate senolytic activity.
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Produtos Biológicos , Senescência Celular , Humanos , Senoterapia , Produtos Biológicos/farmacologia , Quercetina/farmacologia , Dasatinibe/farmacologiaRESUMO
Abstract Dasatinib, a potent oral multi-targeted kinase inhibitor against Src and Bcr-Abl, can decrease inflammatory response in sepsis. A simple and cost-effective method for determination of an effective dose dasatinib was established. This method was validated in human plasma, with the aim of reducing the number of animals used, thus, avoiding ethical problems. Dasatinib and internal standard lopinavir were extracted from 180 uL of plasma using liquid-liquid extraction with methyl tert-butil ether, followed by liquid chromatography coupled to triple quadrupole mass spectrometry in multiple reaction monitoring mode. For the pharmacokinetic study, 1 mg/kg of dasatinib was administered to mice with and without sepsis. The method was linear over the concentration range of 1-98 ng/mL for DAS in mice and human plasma, with r2>0.99 and presented intra- and interday precision within the range of 2.3 - 6.2 and 4.3 - 7.0%, respectively. Further intra- and interday accuracy was within the range of 88.2 - 105.8 and 90.6 - 101.7%, respectively. The mice with sepsis showed AUC0-t = 2076.06 h*ng/mL and Cmax =102.73 ng/mL and mice without sepsis presented AUC0-t = 2128.46 h*ng/mL. Cmax = 164.5 ng/mL. The described analytical method was successfully employed in pharmacokinetic study of DAS in mice.
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Animais , Masculino , Camundongos , Plasma , Cromatografia Líquida/métodos , Espectrometria de Massas em Tandem/métodos , Dasatinibe/análise , FarmacocinéticaRESUMO
Senescent cells are in a cell cycle arrest state and accumulate with aging and obesity, contributing to a chronic inflammatory state. Treatment with senolytic drugs dasatinib and quercetin (D + Q) can reduce senescent cell burden in several tissues, increasing lifespan. Despite this, there are few reports about senescent cells accumulating in female reproductive tissues. Therefore, the aim of the study was to characterize the ovarian reserve and its relationship with cellular senescence in genetically obese mice (ob/ob). In experiment 1, ob/ob (n = 5) and wild-type (WT) mice (n = 5) at 12 months of age were evaluated. In experiment 2, 2-month-old female ob/ob mice were treated with senolytics (D + Q, n = 6) or placebo (n = 6) during the 4 months. Obese mice had more senescent cells in ovaries, indicated by increased p21 and p16 and lipofuscin staining and macrophage infiltration. Treatment with D + Q significantly reduced senescent cell burden in ovaries of obese mice. Neither obesity nor treatment with D + Q affected the number of ovarian follicles. In conclusion, our data indicate that obesity due to leptin deficiency increases the load of senescent cells in the ovary, which is reduced by treatment by senolytics. However, neither obesity nor D + Q treatment affected the ovarian reserve.
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Ovário , Senoterapia , Animais , Senescência Celular , Dasatinibe/farmacologia , Feminino , Camundongos , Camundongos Obesos , Obesidade/tratamento farmacológico , Quercetina/farmacologiaRESUMO
ANTECEDENTES : El presente dictamen expone la evaluación de la eficacia y seguridad de dasatinib con o sin quimioterapia, comparado con quimioterapia, en pacientes adultos con leucemia linfoblástica aguda, philadelphia positivo, resistente o intolerante a quimioterapia más imatinib. En la literatura se señala que, la leucemia linfoblástica aguda (LLA) cromosoma Philadelphia positivo (Ph+) representa entre el 20.0 al 30 % de los casos de LLA. En el Perú, no se conoce el número de casos de LLA Ph+; sin embargo, se conoce que, en el 2019, la tasa de incidencia de LLA en personas mayores de 20 años fue de 1.04 casos por cada 100,000 personas y la tasa de mortalidad fue de 0.79 muertes por cada 100,000 personas. ï Luego de la terapia de inducción con un inhibidor de la tirosina quinasa (TKI, por sus siglas en inglés), entre el 10 y 20 % de los pacientes desarrolla LLA resistente. Debido a la aparición de casos de resistencia o intolerancia a los TKI de primera generación (imatinib), se han desarrollado otros TKI, como dasatinib. En EsSalud, se cuentan con varias opciones de medicamentos que pueden ser empleados en diferentes esquemas de quimioterapia en este grupo de pacientes con resistencia o intolerancia a TKI. Actualmente, dasatinib se encuentra disponible en EsSalud para el tratamiento de pacientes con leucemia mieloide crónica (LMC), Ph+ resistente o intolerante a tratamientos previos a dosis altas a imatinib y sin mutación T315l. No obstante, algunos especialistas de EsSalud solicitan que se amplíe el uso de dasatinib a pacientes adultos con LLA Ph+ resistente o intolerante, aduciendo que dasatinib (con o sin quimioterapia) podría mejorar la sobrevida libre de progresión (SLP) del paciente. Así, el presente dictamen preliminar expone la evaluación de la eficacia y seguridad de dasatinib, con o sin quimioterapia, en pacientes adultos con LLA Ph+ resistente o intolerante a quimioterapia más imatinib. METODOLOGÍA: Tras la búsqueda de la literatura científica, se identificaron dos guías de práctica clínicas (GPC) elaboradas por The National Comprehensive Cancer Network (NCCN) y The European Society for Medical Oncology (ESMO), y dos evaluaciones de tecnologías sanitarias (ETS) elaboradas por The Scottish Medicines Consortium (SMC) y Comissão Nacional de Incorporação de Tecnologías no Sistema Único de Saúde (CONITEC). Además, se encontraron dos estudios de fase II; sin grupo de comparación, el estudio START-L (Ottman et al., 2007), empleado para sustentar la aprobación acelerada de uso de dasatinib por parte de la Food and Drug Administration (FDA) y la aprobación de la European Medicines Agency (EMA) en pacientes con LLA Ph+ y resistencia o intolerancia a una terapia previa, y el estudio de Sakamaki et al., 2009. RESULTADOS: Se describe la evidencia disponible según el tipo de publicación, siguiendo lo indicado en los criterios de elegibilidad. CONCLUSIONES: En el presente documento, se evaluó la mejor evidencia científica disponible hasta la actualidad, sobre la eficacia y seguridad de dasatinib con o sin quimioterapia, comparado con quimioterapia, en pacientes adultos con LLA Ph+y resistencia o intolerancia a la quimioterapia más imatinib. La búsqueda sistemática de la evidencia culminó con la selección de dos GPC (NCCN 2021; Hoelzer et al. 2016), dos ETS (CONITEC 2020; SMC 2007), el estudio de fase II START-L, pivotal de dasatinib (Ottmann et al. 2007), y el estudio de fase II de Sakamaki et al. (Sakamaki et al. 2009). Las GPC del NCCN y ESMO coinciden en señalar que la evidencia disponible sobre el uso de dasatinib para el tratamiento de los pacientes con LLA Ph+ y resistencia o recaída no es de calidad. Por ello, la ESMO resalta que no hay una terapia estándar de reinducción y el NCCN recomienda, especialmente, la participación en un ensayo clínico. Las ETS del SMC y del CONITEC coinciden en dar una recomendación en contra del uso de dasatinib en pacientes con LLA Ph+ con resistencia/recaída a una terapia previa o al mesilato de imatinib. La SMC basó en que la terapia con dasatinib no sería costo-efectiva en este grupo de pacientes; y la CONITEC, en la alta incidencia de EAS, y las altas tasas de abandono del tratamiento y de reducción de dosis observadas en la evidencia analizada. Los estudios START-L y de Sakamaki et al., de fase II, presentaron limitaciones (e.g. falta de un grupo de comparación, pequeño tamaño de la muestra y la falta de acceso al protocolo del estudio) que afectan la validez de sus resultados. Aun así, sus resultados sugieren que el perfil de seguridad de dasatinib no puede ser considerado como favorable para los pacientes (altas tasas de eventos adversos, reducción de dosis de dasatinib y descontinuación del tratamiento). Actualmente, en EsSalud, se cuentan con varias opciones de medicamentos que pueden ser empleados en diferentes esquemas de quimioterapia para pacientes con LLA Ph+ resistente o intolerante a quimioterapia más imatinib. Por lo expuesto, el IETSI no aprueba el uso de dasatinib con o sin quimioterapia en pacientes adultos con LLA Ph+ resistente o intolerante a quimioterapia más imatinib.
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Humanos , Leucemia Mielogênica Crônica BCR-ABL Positiva/tratamento farmacológico , Quimioterapia Adjuvante/efeitos adversos , Mesilato de Imatinib/efeitos adversos , Dasatinibe/uso terapêutico , Eficácia , Análise Custo-BenefícioRESUMO
INTRODUCCIÓN: La incidencia de pacientes con leucemia mieloide crónica llega a representar el 15%- 20% de las leucemias, de las cuales la mayoría inicia un tratamiento de primera línea (imatinib o dasatinib). Sin embargo, un porcentaje de ellos generan intolerancia o resistencia, teniendo que iniciar TKI de nueva generación. Actualmente a nivel institucional se cuenta con 07 pacientes con leucemia mieloide crónica en fase crónica que reciben tratamiento con nilotinib. El nilotinib es un inhibidor de la actividad de la tirosina quinasa ABL de la oncoproteína BCR-ABL. Actúa en las líneas celulares como en las células leucémicas primarias "cromosoma Filadelfia positivo". Se utiliza en el tratamiento de pacientes adultos con leucemia mieloide crónica (LMC) cromosoma Filadelfia positivo en fase crónica y en fase acelerada, con intolerancia a un tratamiento previo. METODOLOGÍA: Se realizó una búsqueda sistemática y dirigida de las principales bases de datos encontrándose 02 ETS, 05 GPC y 01 RS y 02 estudios primarios sobre el tema. Las 05 GPC encontradas incluyen el uso de un TKi de segunda generación como parte de una segunda línea de tratamiento en pacientes LMC-FC que sean resistentes a imatinib en primera línea, éstas GPC revisadas también mencionan que el uso de nilotinib debe plantearse en casos específicos donde los pacientes hayan recibido una terapia de primera línea con imatinib a la cual sean intolerantes o resistentes y que de manera individual podrían tener factores de riesgo para que sean más propensos a desarrollar eventos adversos o intolerancia/resistencia a dasatinib. RESULTADOS: Las 02 ETS encontradas avalan el uso de nilotinib en pacientes con LMC-FC que reporten intolerancia o resistencia a imatinib o dasatinib, de estas ETS corresponden a una realizada a nivel nacional y otra realizada en un país latinoamericano con contextos similares a Perú. La RS y los estudios primarios reportados han concluido que nilotinib ha presentado desenlaces favorables y EA infrecuentes en el manejo de la LMC-FC. Sin embargo, los estudios incluidos en la RS y los estudios primarios eran de un solo brazo. Ello establece ciertas limitaciones en la evidencia encontrada. CONCLUSIÓN: Si bien la mejor evidencia científica disponible es limitada; sin embargo, se ha reportado tanto en las ETS, GPC, RS y en los estudios primarios recomendaciones a favor, desenlaces favorables y eventos adversos manejables de nilotinib en terapia de segunda línea. Por lo cual, el panel aprueba el uso de nilotinib en pacientes con LMC-FC que sean resistentes o intolerantes a imatinib en primera línea.