RESUMO
The diagnosis of American tegumentary leishmaniasis (ATL) still requires the design of more effective tools. Leishmania (Viannia) braziliensis is the causal agent of the 90% of Argentinean ATL cases. Considering the current knowledge, an ELISA based crude antigen (CA) for the diagnosis was designed. Ninety-nine subjects diagnosed as ATL, 27 as no-ATL, and 84 donors from non-ATL-endemic areas were included in this study. The current ATL diagnosis was based four techniques, dermal smear microscopic examination (parasitological test), PCR, Leishmanin skin test, and clinical records. We obtained CA extracts from promastigotes and amastigotes from macrophage cultures of different zymodemes of endemic Leishmania species circulating in the study area. Crude antigens from the 'local' main zymodeme of L. (V.) braziliensis showed the highest reactivity against anti-Leishmania antibodies compared to the other included species. The CA of amastigotes of this zymodeme was 3.4 fold more reactive than promastigotes one. Moreover, amastigote-membrane CA (MCA) were 3.6 fold more reactive than the soluble antigens. The MCA-ELISA reached a sensitivity and specificity of 98% (CI = 94.7%-100%) and 63.6% (53.9-73.1), respectively. When anti-Trypanosoma cruzi reactive sera were excluded, the specificity reached 98.4% (94.4-100), while the sensitivity was similar, with a positive predictive value (PV) of 98.6% (94.6-100) and negative PV of 96.3% (91.6-100). The performance of the MCA-ELISA results strongly contribute to the final diagnostic decision, since a non-reactive serological result almost discards the suspected ATL, because of its high negative PV. The developed MCA-ELISA showed a high diagnostic performance, which makes it a good candidate for ATL diagnosis, for seroprevalence studies, or for monitoring treatments efficacy.
Assuntos
Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Antígenos de Protozoários/imunologia , Membrana Celular/imunologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Leishmania braziliensis/imunologia , Leishmaniose Cutânea/diagnóstico , Afinidade de Anticorpos , Especificidade de Anticorpos , Argentina/epidemiologia , Doadores de Sangue , Doenças Endêmicas , Humanos , Leishmania braziliensis/crescimento & desenvolvimento , Leishmaniose Cutânea/sangue , Leishmaniose Cutânea/epidemiologia , Leishmaniose Cutânea/parasitologia , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leishmaniose Mucocutânea/diagnóstico , Leishmaniose Mucocutânea/parasitologia , Valor Preditivo dos Testes , Sensibilidade e Especificidade , Estudos Soroepidemiológicos , Trypanosoma cruzi/imunologiaRESUMO
Nod-like Receptor Protein3 (NLRP3) inflammasome in macrophages infected with Leishmania sp. enhances the secretion of IL-1ß. Excess IL-1ß production is linked to disease severity in patients with cutaneous leishmaniasis (CL) caused by L. mexicana. Blockade of the NLRP3 inflammasome in cell cultures from skin biopsies of patients with CL caused by L. braziliensis inhibited the release of IL-1ß. We hypothesized that common single nucleotide polymorphisms in the IL1B and in its receptor antagonist IL1RN genes may be predictive of CL caused by L. guyanensis. The SNPs -511T/C (rs16944) and +3954C/T (rs1143634) of the IL1B and IL1RN VNTR (rs2234663) were assessed in 881 patients with CL and 837 healthy controls by PCR-RFLP and direct PCR respectively. Plasma cytokines levels were also assayed. The plasma levels of IL-1ß were higher in patients compared to control subjects. In contrast, increased plasma levels of IL-1Ra were observed in controls. The rs16944 C/C genotype was more common among the patients (ORâ¯=â¯1.5 [95%CI 1.1-2.0]; Pâ¯=â¯0.004) and the C allele suggests susceptibility to CL (ORâ¯=â¯1.2 [95%CI 1.1-1.4]; Pâ¯=â¯0.003). The rs16944 C/C genotype shows a tendency to correlate with lower levels of the IL-1Ra cytokine. Low levels of IL-1Ra cytokine and rs16944 C/C genotype seem to confer susceptibility to L. guyanensis-infection in the Amazonas.
Assuntos
Alelos , Proteína Antagonista do Receptor de Interleucina 1/sangue , Interleucina-1beta , Leishmania guyanensis/metabolismo , Leishmaniose Mucocutânea , Polimorfismo de Nucleotídeo Único , Adulto , Brasil , Feminino , Humanos , Interleucina-1beta/sangue , Interleucina-1beta/genética , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leishmaniose Mucocutânea/genética , Masculino , Pessoa de Meia-IdadeRESUMO
The diagnosis of mucocutaneous leishmaniasis (MCL) is hampered by the absence of a gold standard. An accurate diagnosis is essential because of the high toxicity of the medications for the disease. This study aimed to assess the ability of polymerase chain reaction (PCR) to identify MCL and to compare these results with clinical research recently published by the authors. A systematic literature review based on the Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses: the PRISMA Statement was performed using comprehensive search criteria and communication with the authors. A meta-analysis considering the estimates of the univariate and bivariate models was performed. Specificity near 100% was common among the papers. The primary reason for accuracy differences was sensitivity. The meta-analysis, which was only possible for PCR samples of lesion fragments, revealed a sensitivity of 71% [95% confidence interval (CI) = 0.59; 0.81] and a specificity of 93% (95% CI = 0.83; 0.98) in the bivariate model. The search for measures that could increase the sensitivity of PCR should be encouraged. The quality of the collected material and the optimisation of the amplification of genetic material should be prioritised.
Assuntos
DNA de Protozoário/isolamento & purificação , Leishmaniose Mucocutânea/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/normas , Biópsia , Ensaios Clínicos como Assunto , Intervalos de Confiança , Humanos , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leishmaniose Mucocutânea/urina , Pesquisa Qualitativa , Curva ROC , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
One of the potential dangers of American tegumentary leishmaniasis (ATL) caused by Leishmania (Viannia) braziliensis is the development of mucosal lesions. Haematogenous dissemination of the parasite is the most likely mechanism to explain this occurrence, but most attempts to isolate the parasite from blood have so far been unsuccessful. The presence of Leishmania in peripheral blood was therefore evaluated by PCR using DNA samples isolated from patients presenting active cutaneous or mucosal disease, and from individuals cured by antimonial treatment as well as individuals without a past history of leishmaniasis but with a positive Montenegro skin test, all living in L. (V.) braziliensis-endemic areas. Leishmania DNA was found not only in those patients presenting active cutaneous (24.8%) or mucosal (35%) lesions, but also in samples isolated from healed individuals (27.3%) as well as in asymptomatic skin-test-positive residents of endemic areas (37.5%). Overall, PCR showed the presence of parasite DNA in the blood of 26.2% of the 225 examined samples. These data suggest that persistence of parasites within the host may last for many years and, rather than being a risk factor, might be important in maintaining the protective response in those living in endemic areas.
Assuntos
DNA de Protozoário/sangue , Leishmania braziliensis/isolamento & purificação , Leishmaniose Mucocutânea/parasitologia , Animais , Interações Hospedeiro-Parasita , Humanos , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leucócitos Mononucleares/parasitologia , Sistema Linfático/parasitologia , Reação em Cadeia da Polimerase/normas , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
Neste estudo, avaliamos a eficiência dos métodos mais comumente utilizados na rotina do diagnóstico da leishmaniose mucosa (LM) e muco-cutânea (LMC). O grupo de (LM) foi composto por 19 pacientes, sendo 13(68,4 por cento)homens e 6(31,6 por cento)mulheres. A média de idade foi de 56,9 com mediana de 58 anos (min=29 e máx=95). O tempo médio da lesão foi de 65 meses. O grupo de (LMC) foi composto por 17 pacientes, sendo 12(70,6 por cento) homens e 5(29,4 por cento) mulheres. A idade média do grupo LMC foi de 46,7 com mediana de 49(min=18 e máx=79), com tempo médio de lesão de 148 meses. Foram realizadas hemoculturas antes do diagnóstico, aos 30, 90 e 180 dias após o tratamento, sendo os resultados sempre negativos. As culturas de fragmento de mucosa também foram negativas. A impressão por aposição do fragmento de biópsia foi positivo em um paciente do grupo LM e um grupo LMC. A intradermo reação de Montenegro foi realizada em 36 pacientes, conferindo sensibilidade de 95,2 por cento sendo de 100 por cento para o grupo de LM e 83,3 por cento do grupo LMC. A sensibilidade da PCR de fragmento de biópsia foi de 84,6 por cento e 100 por cento para os grupos de LM e LMC, respectivamente. A especificidade da PRC foi de 93,3 por cento. Antes do tratamento, detectou-se por PRC parasitário ou DNA do parasito circulante em um paciente do grupo LM. Após o tratamento, a PRC foi positiva em dois pacientes do grupo LM(aos 90 dias e, aos 180 dias) e um paciente do grupo LMC(aos 30 dias). A pesquisa de anticorpos foi avaliada através dos testes ELISA (IgA, IgG, total, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) e RIFI(IgG total) utilizando antígenos de L.braziliensis e de L.amazonensis. Não foram detectados anticorpos IgA, IgG2 e IgG4. A sensibilidade da RIFI variou entre 100 por cento(Lb)e 89,5 por cento(La).
A especificidade foi avaliada em pacientes portadores de Doença de Chagas, Malária, Sífilis e indivíduos não-infectados de área endêmica, sendo encontrada especificidade entre 65 por cento e 100 por cento. No ELISA, a sensibilidade variou de 64 por cento a 100 por cento e a especificidade de 40 por cento a 100 por cento. No acompanhamento pós-tratamento, não foi observada queda dos níveis de anticorpos pela técnica de RIFI. Pelo ELISA, observou-se queda dos anticorpos IgG totais anti-L braziliensis a partir de 90 dias pós-tratamento para o grupo LM(sendo a IgG3 a principal responsável pela queda) a aos 180 dias pós-tratamento para o grupo LMC. Para IgG1, a queda dos níveis de anticorpos só foi observada aos 180 dias pós-tratamento para o grupo LM nos dois antígenos estudados. A queda dos níveis de IgG3 só aconteceu utilizando a L.braziliensis, no grupo LM, a partir dos 90 dias pós-tratamento.
Assuntos
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leishmaniose Mucocutânea/diagnóstico , Leishmaniose Mucocutânea/terapiaRESUMO
Neste estudo, avaliamos a eficiência dos métodos mais comumente utilizados na rotina do diagnóstico da leishmaniose mucosa (LM) e muco-cutânea (LMC). O grupo de (LM) foi composto por 19 pacientes, sendo 13 (68,4 por cento) homens e 6 (31,6 por cento) mulheres. A média de idade foi de 56,9 com mediana de 58 anos (min=29 e máx=95). O tempo médio da lesão foi de 65 meses. O grupo de (LMC) foi composto por 17 pacientes, sendo 12 (70,6 por cento) homens e 5 (29,4 por cento) mulheres. A idade média do grupo LMC foi de 46,7 com mediana de 49 (min=18 e máx=79), com tempo médio de lesão de 148 meses. Foram realizadas hemoculturas antes do diagnóstico, aos 30, 90 e 180 dias após o tratamento, sendo os resultados sempre negativos. As culturas de fragmento de mucosa também foram negativas. A impressão por aposição do fragmento de biópsia foi positivo em um paciente do grupo LM e um grupo LMC. A intradermo reação de Montenegro foi realizada em 36 pacientes, conferindo sensibilidade de 95,2 por cento sendo de 100 por cento para o grupo de LM e 83,3 por cento do grupo LMC. A sensibilidade da PCR de fragmento de biópsia foi de 84,6 por cento e 100 por cento para os grupos de LM e LMC, respectivamente. A especificidade da PRC foi de 93,3 por cento. Antes do tratamento, detectou-se por PRC parasitário ou DNA do parasito circulante em um paciente do grupo LM. Após o tratamento, a PRC foi positiva em dois pacientes do grupo LM (aos 90 dias e, aos 180 dias) e um paciente do grupo LMC (aos 30 dias). A pesquisa de anticorpos foi avaliada através dos testes ELISA (IgA, IgG, total, IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4) e RIFI (IgG total) utilizando antígenos de L.braziliensis e de L.amazonensis. Não foram detectados anticorpos IgA, IgG2 e IgG4. A sensibilidade da RIFI variou entre 100 por cento (Lb)e 89,5 por cento (La). A especificidade foi avaliada em pacientes portadores de Doença de Chagas, Malária, Sífilis e indivíduos não-infectados de área endêmica, sendo encontrada especificidade entre 65 por cento e 100 por cento. No ELISA, a sensibilidade variou de 64 por cento a 100 por cento e a especificidade de 40 por cento a 100 por cento. No acompanhamento pós-tratamento, não foi observada queda dos níveis de anticorpos pela técnica de RIFI. Pelo ELISA, observou-se queda dos anticorpos IgG totais anti-L braziliensis a partir de 90 dias pós-tratamento para o grupo LM (sendo a IgG3 a principal responsável pela queda) a aos 180 dias pós-tratamento para o grupo LMC. Para IgG1, a queda dos níveis de anticorpos só foi observada aos 180 dias pós-tratamento para o grupo LM nos dois antígenos estudados. A queda dos níveis de IgG3 só aconteceu utilizando a L. braziliensis, no grupo LM, a partir dos 90 dias pós-tratamento.
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Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Leishmaniose Mucocutânea/diagnóstico , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Leishmaniose Mucocutânea/terapiaRESUMO
PURPOSE: To develop an animal model for studying mucocutaneous leishmaniasis. METHODS: The hind footpad of C57Bl/6j inbred mice was experimentally infected with 10(7) Leishmania (Leishmania) amazonensis promastigote and the skin was studied through light and electron transmission microscopy and immunohistochemistry (PAP) techniques. RESULTS: There were morphological evidences of cellular immune mechanisms and hypersensitivity reaction after eight weeks of infection and metastasis and well shaped parasites at ultrastructural level by fifty-one weeks post infection. Relapse of infection with mucosa lesions occurred around the 50th week after inoculation. CONCLUSION: The use of this animal model in long term follow up could be an useful experimental model for human mucocutaneous leishmaniasis.
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Antígenos de Protozoários/sangue , Leishmania/imunologia , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Animais , Modelos Animais de Doenças , Feminino , Seguimentos , Leishmaniose Mucocutânea/imunologia , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BLRESUMO
The authors report a case of a 89 years-old woman with mucocutaneous leishmaniasis and previous diabetes mellitus and high blood pressure, who had been treated with allopurinol for 10 months without healing of lesions. Afterwards, she has been treated with meglumine antimonate, "glucantime" for 4 days, with a total dose 2,380 mg of Sbv, but developed cardiac side effects and hypokalemia, hence the treatment was withdrawn. However, this patient developed total clinical regression of lesions, in spite of she has been received low dose of this drug.
Assuntos
Antiprotozoários/administração & dosagem , Dermatoses Faciais/tratamento farmacológico , Leishmaniose Mucocutânea/tratamento farmacológico , Meglumina/administração & dosagem , Compostos Organometálicos/administração & dosagem , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Dermatoses Faciais/sangue , Dermatoses Faciais/parasitologia , Feminino , Humanos , Leishmaniose Mucocutânea/sangue , Antimoniato de MegluminaRESUMO
Os autores relatam um caso de leishmaniose cutâneo-mucosa em uma paciente de 89 anos, diabética e hipertensa, tratada inicialmente com alopurinol por 10 meses não havendo cicatrização das lesões. Posteriormente, recebeu antimoniato de N-metil glucamina (glucantime) por 4 dias, na dose total de 2.380mg do Sbv, mas desenvolveu cardiotoxicidade e hipocalemia, sendo suspenso o tratamento, entretanto, evoluiu com regressão clínica total das lesões, apesar de ter recebido pequena dose desta medicação.
The authors report a case of a 89 years-old woman with mucocutaneous leishmaniasis and previous diabetes mellitus and high blood pressure, who had been treated with allopurinol for 10 months without healing of lesions. Afterwards, she has been treated with meglumine antimonate, [quot ]glucantime[quot ] for 4 days, with a total dose 2,380 mg of Sbv, but developed cardiac side effects and hypokalemia, hence the treatment was withdrawn. However, this patient developed total clinical regression of lesions, in spite of she has been received low dose of this drug.
Assuntos
Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Feminino , Humanos , Antiprotozoários/administração & dosagem , Compostos Organometálicos/administração & dosagem , Dermatoses Faciais/tratamento farmacológico , Leishmaniose Mucocutânea/tratamento farmacológico , Meglumina/administração & dosagem , Dermatoses Faciais/sangue , Dermatoses Faciais/parasitologia , Leishmaniose Mucocutânea/sangueRESUMO
Estudio prospectivo, de corte transversal donde fueron incluídos 102 pacientes con diagnóstico clínico y serológico de Leishmania Cutánea (LC) y Mucocutánea (LMC), que concurrieron al Laboratorio Central de Salud Pública, durante los años 1996 y 97, para la determinación del título de anticuerpos IgG anti-leismania se utilizó la Inmunoflourescencia Indirecta (IFI) y la Intradermoreacción de Montenegro (IDRM)