RESUMO
Apical membrane antigen 1 (AMA-1) is an invasion-related Plasmodium antigen that is expressed during both intracellular and extracellular asexual stages of the parasite's life cycle, making it an ideal target for induction of humoral and cellular immune responses that can protect against malaria. We show here that when it is administered as a recombinant protein (P) in Montanide ISA720 adjuvant, followed by a recombinant human type 5 adenovirus (Ad), intense and long-lasting Plasmodium vivax AMA-1-specific antibody responses (including both IgG1 and IgG2a), as well as proliferative memory T cell responses, can be detected in immunized mice. Memory T cells displayed both central (CD44(hi) CD62L(hi)) and effector (CD44(hi) CD62L(lo)) phenotypes, with the central memory phenotype prevailing (56% of AMA-1-specific proliferating cells). Considering the main traits of the memory immune responses induced against AMA-1, this particular sequence of immunogens (P followed by Ad), but no others (Ad/Ad, Ad/P, or P/P), displayed an optimal synergistic effect. These results give further support to the need for preclinical studies of P. vivax vaccine candidate AMA-1 administered in prime/boost protocols that include recombinant proteins and adenoviral vectors.
Assuntos
Anticorpos Antiprotozoários/imunologia , Antígenos de Protozoários/imunologia , Vacinas Antimaláricas/imunologia , Plasmodium vivax/imunologia , Adenoviridae , Adjuvantes Imunológicos , Animais , Anticorpos Antiprotozoários/biossíntese , Citocinas/biossíntese , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Feminino , Receptores de Hialuronatos/biossíntese , Imunidade Celular , Imunidade Humoral , Imunização , Imunização Secundária , Memória Imunológica , Selectina L/biossíntese , Vacinas Antimaláricas/administração & dosagem , Malária Vivax/imunologia , Malária Vivax/prevenção & controle , Manitol/administração & dosagem , Manitol/análogos & derivados , Manitol/imunologia , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Ácidos Oleicos/administração & dosagem , Ácidos Oleicos/imunologia , Proteínas de Protozoários/imunologia , Proteínas Recombinantes/administração & dosagem , Proteínas Recombinantes/imunologia , Linfócitos T/imunologia , Vacinas Sintéticas/imunologiaRESUMO
Although largely considered benign, Plasmodium vivax causes disease in nearly 75 million people each year and the available strategies are not sufficient to reduce the burden of disease, therefore pointing to vaccine development as a cost-effective control measure. In this study, the P. vivax merozoite surface protein 10 (MSP-10) was expressed as a recombinant protein in Escherichia coli and purified by affinity chromatography. High antigenicity was observed since sera from P. vivax-infected patients strongly recognized rPvMSP10. The immunogenicity of rPvMSP10 was tested in Aotus monkeys, comparing responses induced by formulations with Freund's adjuvant, Montanide ISA720 or aluminum hydroxide. All formulations produced high antibody titers recognizing the native protein in late schizonts. Despite inducing strong antibody production, none of the formulations protected immunized Aotus monkeys upon experimental challenge.
Assuntos
Antígenos de Protozoários/imunologia , Vacinas Antimaláricas/imunologia , Malária Vivax/prevenção & controle , Plasmodium vivax/imunologia , Proteínas de Protozoários/imunologia , Adjuvantes Imunológicos , Hidróxido de Alumínio/imunologia , Animais , Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Aotus trivirgatus , Adjuvante de Freund/imunologia , Humanos , Imunidade Humoral , Malária Vivax/imunologia , Manitol/análogos & derivados , Manitol/imunologia , Ácidos Oleicos/imunologia , Proteínas Recombinantes/imunologiaRESUMO
Previous studies with gonadotrophin releasing hormone (GnRH/LHRH) vaccines have shown the usefulness of immunization against this hormone in prostate cancer. To this end, we have generated a completely synthetic peptide modified at position 6 and attached to the 830-844 tetanic toxoid (TT) helper T cell sequence. Through this work we have demonstrated that the GnRHm1-TT molecule was highly immunogenic when it is formulated as an oil-based emulsion adjuvated with Montanide ISA 51. That results correlated directly with testosterone reduction and tumor growth inhibition of the Dunning R3327-H androgen responsive prostate tumor model in rats. GnRHm1-TT, proved to be safe and useful for future clinical trials.
Assuntos
Vacinas Anticâncer/imunologia , Hormônio Liberador de Gonadotropina/imunologia , Imunoterapia , Neoplasias da Próstata/terapia , Toxoide Tetânico/imunologia , Adjuvantes Imunológicos/administração & dosagem , Animais , Anticorpos/sangue , Vacinas Anticâncer/administração & dosagem , Linhagem Celular Tumoral , Modelos Animais de Doenças , Hormônio Liberador de Gonadotropina/administração & dosagem , Humanos , Masculino , Manitol/administração & dosagem , Manitol/análogos & derivados , Manitol/imunologia , Ácidos Oleicos/administração & dosagem , Ácidos Oleicos/imunologia , Fragmentos de Peptídeos/administração & dosagem , Fragmentos de Peptídeos/síntese química , Fragmentos de Peptídeos/imunologia , Neoplasias da Próstata/imunologia , Neoplasias da Próstata/mortalidade , Neoplasias da Próstata/prevenção & controle , Ratos , Testosterona/sangue , Toxoide Tetânico/administração & dosagem , Vacinas Sintéticas/administração & dosagem , Vacinas Sintéticas/imunologiaRESUMO
Aotus monkeys were used to determine the immunogenicity of Pvs25 protein expressed in the zygote/ookinete surface. Animals were immunized in three times with 100 microg of Pvs25 formulated in Montanide ISA-720. Antibodies to Pvs25 detected by an enzyme-linked immunosorbent assay appeared by day 30 after the first immunization, with a peak of antibodies levels on day 150. These antibodies were still detectable on day 300. Plasma samples on day 150 from experimental group were able to completely block the development of the parasite in Anopheles albimanus mosquitoes artificially fed with human isolates of Plasmodium vivax. Immunized Aotus monkeys were infected with blood forms of the P. vivax Salvador I strain and no boosting effect of blood infection on titers of antibodies to Pvs25 was observed despite the presence of infective gametocytes. In conclusion, Pvs25 protein formulated in Montanide ISA-720 induces efficient and long-lasting transmission-blocking antibodies that cannot be boosted by parasite infection.
Assuntos
Anticorpos Antiprotozoários/sangue , Antígenos de Protozoários/imunologia , Antígenos de Superfície/imunologia , Vacinas Antimaláricas/imunologia , Malária Vivax/transmissão , Plasmodium vivax/imunologia , Proteínas Recombinantes/imunologia , Animais , Anopheles , Antígenos de Protozoários/administração & dosagem , Antígenos de Protozoários/genética , Antígenos de Superfície/administração & dosagem , Antígenos de Superfície/genética , Cebidae , Humanos , Soros Imunes/imunologia , Vacinas Antimaláricas/administração & dosagem , Vacinas Antimaláricas/genética , Malária Vivax/imunologia , Malária Vivax/prevenção & controle , Manitol/administração & dosagem , Manitol/análogos & derivados , Manitol/imunologia , Ácidos Oleicos/administração & dosagem , Ácidos Oleicos/imunologia , Proteínas Recombinantes/administração & dosagem , Proteínas Recombinantes/genética , VacinaçãoRESUMO
In a previous work we selected montanide ISA720 (M-ISA720) among different adjuvants for the vaccination with a V3 loop based multi-epitope polypeptide TAB9. In this paper we present the evaluation of the toxicity and immunogenicity of this formulation in non-human primates. TAB9 in M-ISA720 was highly immunogenic in macaques (Macaca fascicularis) inducing antibodies against TAB9 in all animals after one inoculation and a strong anamnestic response after booster injections. Furthermore 97% of the V3 peptides included were recognized by TAB9 sera. No differences between doses of 200 microg and 1 mg of TAB9 in M-ISA720 were observed after four immunizations. Neutralizing antibodies against five HIV-1 isolates were detected in most animals. Animals remain healthy throughout the study and did not show lesions at the inoculation site.
Assuntos
Adjuvantes Imunológicos/administração & dosagem , Anticorpos Antivirais/biossíntese , Infecções por HIV/imunologia , HIV-1/imunologia , Epitopos Imunodominantes/imunologia , Manitol/análogos & derivados , Ácidos Oleicos/imunologia , Peptídeos/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Animais , Afinidade de Anticorpos , Sequência Consenso , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Macaca radiata , Manitol/imunologia , Dados de Sequência Molecular , Testes de Neutralização , ÓleosRESUMO
Os autores relatam sua experiência no preparo de cólon pelo uso de manitol a 10% assciado à cloranfenicol e gentamicina por via parenteral. Foram estudados 104 pacientes e pelas vantagens observadas em relaçäo ao preparo convencional, os autores concluem que é um método que pode ser adotado como um meio eficaz de preparo do cólon. Por provocar uma diarréia osmótica, o esvaziamento intestinal é bom, tendo os autores obtido resultados excelente e bom em mais de 90% dos casos; os efeitos colaterais säo discretos desde que o preparo seja bem indicado e bem conduzido e a tolerância pelos doentes é melhor que com o método clássico