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1.
Rev. microbiol ; 23(1): 24-7, jan.-mar. 1992. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-114740

RESUMO

Procurando verificar a participaçäo de rotavirus e adenovirus na etiologia da gastrenterite infantil, 280 amostras de fezes de crianças da faixa etária de 0 a 5 anos foram coletadas em Araraquara-SP, sendo 140 de crianças com diarréia e 140 do grupo de controle. A pesquisa desses vírus foi realizada através de um ensaio imunoenzimático (EIARA) e adicionalmente, rotavirus foi pesquisado através da eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE). No grupo diarréico, rotavirus foi detectado em 8,6% das amostras usando EIARA e em 7,9% usando PAGE. Nenhuma das amostras do grupo controle se mostrou positiva para esse vírus. Adenovirus foi detectado em 2,9% das amostras do grupo diarréico e em 1,4 % das fezes do grupo controle. Os resultados mostram que o rotavirus participam ativamente da etiologia da diarreia infantil em nossa cidade


Assuntos
Humanos , Recém-Nascido , Lactente , Pré-Escolar , Rotavirus/análise , Diarreia Infantil/etiologia , Brasil , Gastroenterite/parasitologia
2.
Rev. microbiol ; 23(1): 28-31, jan.-mar. 1992. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-114741

RESUMO

Foi realizado um estudo em crianças atendidas no HC da UFMG, tendo sido o rotavírus detectado em amostras fecais de 36 (17,14%) crianças näo hospitalizadas, em um grupo de 210 crianças com diarréia; e em 14 (56,0%) crianças de um grupo de 25 crianças hospitalizadas com gastrenterite aguda. As amostras fecais foram testadas em ELISA e os perfis eletroforéticos do RNA foram determinados em gel de poliacarilamida. Entre 42 amostras de vírus analisadas, 3 diferentes eletroforetipos foram observados, com marcada predominância de um tipo


Assuntos
Humanos , Criança , Rotavirus/análise , Diarreia/etiologia , Gastroenterite/etiologia , Brasil
4.
Rev. bras. anal. clin ; 23(3): 59-62, 1991. tab, ilus
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-119556

RESUMO

Duzentos e trinta e uma amostras fecais,coletadas durante o periodo de julho de 1984 a julho de 1988, originarias de crianças de um mes a cinco anos de idade, acometidas de diarreia aguda, foram analisadas atraves de microscopia eletronica (ME), ensaio imunoenzimatico (IE), eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA) do RNA viral e aglutinaçao do latex (AL), a fim de se comparar a sensibilidade e a importancia das tecnicas usadas. Constatou-se que do total, 47 amostras (47/231, 20,3%)foram consideradas positivas para rotavirus por pelo menos uma tecnica, 32 amostras detectadas por ME (32/47,68,0%); 31 amostras por EGPA (31/47, 65,9%), 31 por IE (31/47,65,9%) e 30 amostras por AL (30/47,63,8%). Dezoito amostras (18/47,38,2%) foram positivas pelas quatro tecnicas, nove amostras (9/47,19,1%) positivas por tres tecnicas, sete amostras (7/47, 14,8%) positivas por duas tecnicas e 184 amostras (l84/231,79,6%) negativas pelas quatro tecnicas. A concordancia entre as quatro tecnicas foi de 87,4% (202/231). A analise estatistica (Teste de McNemar) entre os resultados dos testes em que se detectou maior diferença de positividade,i.e., ME x AL, mostrou nao haver diferença significativa na sensibilidade dos metodos utilizados (P>0,5).


Assuntos
Humanos , Feminino , Masculino , Recém-Nascido , Lactente , Pré-Escolar , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Técnicas Imunoenzimáticas , Testes de Fixação do Látex , Rotavirus/análise , Brasil
5.
Rev. microbiol ; 20(3): 363-6, jul.-set. 1989. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-79988

RESUMO

Uma cepa de rotavírus, obtida de criança diarreica com 22 meses de idade, näo reagiu com anticorpos monoclonais para os quatro sorotipos desse agente, emergindo como um possível novo sorotipo. Essa amostra se caracterizou por pertencer ao subgrupo II, exibindo perfil genômico, por eletroforese em gel de policrilamida, tipicamente longo. Detectou-se, ainda, outra amostra de rotavírus, oriunda de criança com 19 meses de idade, assintomática, com características sorológicas que a classificaram como sorotipo 2, monoclonais. Näo se obtiveram padröes de eletroforese nucleica suficientemente nítidos, bem como näo se logrou a replicaçäo virótica dessa cepa em células da linhagem "MA 104", quer a partir da simples suspensäo de fezes, quer após efetuada a purificaçäo em gradiente de cloreto de césio. Ambos os achados acima referidos decorreram de estudo longitudinal envolvendo 88 crianças, habitantes da área periférica de Belém, observados desde o seu nascimento até os três anos de idade


Assuntos
Lactente , Humanos , Rotavirus/análise , Diarreia Infantil/parasitologia , Brasil , Estudos Longitudinais , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Anticorpos Monoclonais/análise
6.
s.l; s.n; 1988. 109 p. ilus, tab.
Tese em Português | LILACS | ID: lil-57839

RESUMO

Utilizando a cepa de rotavírus SA-11, cultivada em células MA-104 e purificadas em gradiente de CsCl, soros antirotavírus foram preparados em cobaias para uso no diagnóstico de gastroenterites por rotavírus, através da reaçäo de imunofluorescência indireta. Do total de 268 casos estudados, analisados por imunofluorescência indireta, feita em microplacas com culturas de células MA-104, obteve-se uma porcentagem de positividade de 14,93% (40 amostras). A comparaçäo desta prova com o ensaio imunoenzimático (EIERA) e a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), revelou boa concordância entre os três ensaios, com valores para kappa entre 0,72 e 0,83, significativamente maior que a concordância obtida ao acaso.


Assuntos
Recém-Nascido , Lactente , Pré-Escolar , Criança , Cobaias , Coelhos , Animais , Humanos , Antígenos Virais , Diarreia Infantil/diagnóstico , Imunofluorescência , Soros Imunes , Infecções por Rotavirus/diagnóstico , Rotavirus/análise , Brasil , Diarreia Infantil/prevenção & controle , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Fezes/análise , Técnicas Imunoenzimáticas
7.
Rev Argent Microbiol ; 19(2): 77-9, 1987.
Artigo em Espanhol | MEDLINE | ID: mdl-2845474

RESUMO

An enzyme-linked immunoassay (EIA) to detect Rotavirus in stools is described. Antibodies prepared in rabbits were immobilized on small nylon cubes as capture phase and enzyme conjugated antibodies were used to reveal the reaction. The conjugate was prepared with horseradish peroxidase by the Nakane periodate oxidation method. The solid phase consisted of 3 mm nylon cubes (66 CNL Du-cilo) previously submitted to partial acid hydrolysis to liberate amino-reactive groups. Glutaraldehyde was employed to couple the capturing antibody to the solid phase resulting in a covalent linkage between the gamma-globulin and the nylon. Phenylenediamine in citrate buffer pH 5.0 with 0.5% hydrogen peroxide was used as revealing substrate. EIA was performed as follows: stools watery extracts were incubated 1 h at 37 degrees C with antibody-treated nylon cubes, and then with enzyme conjugate, rinsed with distilled water and substrate-added. Samples developing colour, with optical density of at least 0.350 at 492 nm, were considered positive. The method showed good correlation with a commercial kit.


Assuntos
Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Fezes/microbiologia , Gastroenterite/microbiologia , Infecções por Rotavirus/microbiologia , Rotavirus/análise , Anticorpos Antivirais/imunologia , Criança , Gastroenterite/etiologia , Humanos , Nylons , Kit de Reagentes para Diagnóstico , Rotavirus/imunologia
8.
Vet Microbiol ; 13(1): 35-45, 1987 Jan.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-3027954

RESUMO

The prevalence of porcine rotavirus infection was studied in 15 different herds located in the north-western region of Venezuela. The presence of rotavirus was studied by direct electron microscopy (EM) and by an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). From 136 samples analyzed during the six months of the study (September 1983-February 1984), 38 (27.9%) were found to be positive for rotaviruses, with infection more common in animals that were 4-6 weeks old. Atypical rotaviruses were not detected in any of the samples examined. Most rotavirus positive specimens were subgrouped using specific monoclonal antibodies in an ELISA test. The majority of the samples (26 out of 38) were found to exhibit Subgroup I antigenicity. Only two specimens, collected from the same herd in two consecutive months, were found to belong to Subgroup II. To characterize further the circulating rotaviruses, electrophoretic analysis of the RNA genome was performed on samples selected from nine different herds. Great variability in the RNA electropherotypes was observed. No correlation was found between subgroup specificity and the migration of the two smaller segments (Genes 10 and 11), as has been described for human rotaviruses.


Assuntos
Diarreia/veterinária , Infecções por Rotavirus/veterinária , Rotavirus/análise , Doenças dos Suínos/microbiologia , Animais , Diarreia/microbiologia , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Microscopia Eletrônica , RNA Viral/análise , Rotavirus/classificação , Rotavirus/genética , Rotavirus/isolamento & purificação , Infecções por Rotavirus/microbiologia , Suínos , Venezuela
9.
Rev. argent. microbiol ; 19(2): 77-9, 1987. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-78181

RESUMO

El presente trabajo describe un enzimoinmunoanálisis (EIA) para detectar Rotavirus en heces usando anticuerpos preparados en conejo inmovilizaods en nylon como fase de captura, y un segundo anticuerpo, preparado en cabra conjugado a enzima como fase de revelado. El conjugado se preparó usando peroxidas de rábano picante mediante la técnica de oxidación con periodato de Nakane. La fase sólida consistió en dados de nylon (66 CNL) de 3 mm de lado, los que fueron sometidos a hidrólisis parcial con ácido para liberar los grupos amino reactivos. El acople de anticuerpo de captura a la fase sólida se hizo mediante el uso de un brazo químico de glutarraldehido y resultó en una unión covalente entre la gamma globulina y el nylon. Como sustrato de revelado se usó o-fenilendiamina en buffer fosfato citrato pH 5,0 con 0,5% de peróxido de hidrógeno. El EIA se realizó con extractos acuosos de heces que fueron incubados con un dado de nylon sensibilizado con anticuerpos y posteriormente revelado incubado con el conjugado y posterior agregado del sustrato. Se leyerion como positivo todas aquellas muestras que desarrollaron color y cuya DO a 492 nm fue superior a 0,350. El método mostró perfecta correlación con muestras positivas y testigos negativos frente a un reactivo obtenido comercialmente


Assuntos
Criança , Humanos , Anticorpos Antivirais/imunologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Fezes/microbiologia , Gastroenterite/imunologia , Infecções por Rotavirus/microbiologia , Rotavirus/análise , Gastroenterite/etiologia , Nylons , Kit de Reagentes para Diagnóstico , Rotavirus/microbiologia
10.
Rev. argent. microbiol ; 19(2): 77-9, 1987. Tab
Artigo em Espanhol | BINACIS | ID: bin-28568

RESUMO

El presente trabajo describe un enzimoinmunoanálisis (EIA) para detectar Rotavirus en heces usando anticuerpos preparados en conejo inmovilizaods en nylon como fase de captura, y un segundo anticuerpo, preparado en cabra conjugado a enzima como fase de revelado. El conjugado se preparó usando peroxidas de rábano picante mediante la técnica de oxidación con periodato de Nakane. La fase sólida consistió en dados de nylon (66 CNL) de 3 mm de lado, los que fueron sometidos a hidrólisis parcial con ácido para liberar los grupos amino reactivos. El acople de anticuerpo de captura a la fase sólida se hizo mediante el uso de un brazo químico de glutarraldehido y resultó en una unión covalente entre la gamma globulina y el nylon. Como sustrato de revelado se usó o-fenilendiamina en buffer fosfato citrato pH 5,0 con 0,5% de peróxido de hidrógeno. El EIA se realizó con extractos acuosos de heces que fueron incubados con un dado de nylon sensibilizado con anticuerpos y posteriormente revelado incubado con el conjugado y posterior agregado del sustrato. Se leyerion como positivo todas aquellas muestras que desarrollaron color y cuya DO a 492 nm fue superior a 0,350. El método mostró perfecta correlación con muestras positivas y testigos negativos frente a un reactivo obtenido comercialmente (AU)


Assuntos
Criança , Humanos , Estudo Comparativo , Gastroenterite/imunologia , Anticorpos Antivirais/imunologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Fezes/microbiologia , Infecções por Rotavirus/microbiologia , Rotavirus/análise , Gastroenterite/etiologia , Rotavirus/microbiologia , Nylons , Kit de Reagentes para Diagnóstico
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