RESUMO
BACKGROUND: The current live vaccinia virus vaccine used in the prevention of smallpox is contraindicated for millions of immune-compromised individuals. Although vaccination with the current smallpox vaccine produces protective immunity, it might result in mild to serious health complications for some vaccinees. Thus, there is a critical need for the production of a safe virus-free vaccine against smallpox that is available to everyone. For that reason, we investigated the impact of imiquimod and resiquimod (Toll-like receptors agonists), and the codon-usage optimization of the vaccinia virus A27L gene in the enhancement of the immune response, with intent of producing a safe, virus-free DNA vaccine coding for the A27 vaccinia virus protein. METHODS: We analyzed the cellular-immune response by measuring the IFN-γ production of splenocytes by ELISPOT, the humoral-immune responses measuring total IgG and IgG2a/IgG1 ratios by ELISA, and the TH1 and TH2 cytokine profiles by ELISA, in mice immunized with our vaccine formulation. RESULTS: The proposed vaccine formulation enhanced the A27L vaccine-mediated production of IFN-γ on mouse spleens, and increased the humoral immunity with a TH1-biased response. Also, our vaccine induced a TH1 cytokine milieu, which is important against viral infections. CONCLUSION: These results support the efforts to find a new mechanism to enhance an immune response against smallpox, through the implementation of a safe, virus-free DNA vaccination platform.
Assuntos
Fatores Imunológicos/administração & dosagem , Vacina Antivariólica/imunologia , Varíola/imunologia , Vírus da Varíola/imunologia , Adjuvantes Imunológicos , Animais , Anticorpos Antivirais/imunologia , Antígenos Virais/genética , Antígenos Virais/imunologia , Citocinas/metabolismo , Modelos Animais de Doenças , ELISPOT , Mapeamento de Epitopos , Feminino , Imunidade Celular , Imunidade Humoral , Isotipos de Imunoglobulinas/imunologia , Camundongos , Varíola/metabolismo , Varíola/prevenção & controle , Vacina Antivariólica/genética , Vacinas Sintéticas/genética , Vacinas Sintéticas/imunologiaRESUMO
La eliminación mundial del virus de la viruela con el virus de la vaccinia fue un proceso que duró poco más de siglo y medio, que se desarrolló en varias etapas según la aceptación del procedimiento, de los adelantos técnicos y del esfuerzo colaborativo de las autoridades internacionales de salud con los representantes en cada uno de los países del mundo. El virus de la vaccinia es asimétrico y está recubierto por una membrana obtenida cuando el virus maduro sale de la célula infectada. Tiene la forma de un ladrillo y es muy resistente a los efectos de los inactivadores físicos y químicos. La certificación definitiva de la erradicación mundial de la viruela fue hecha por la Asamblea Mundial de la Salud en mayo de 1980; con esto el virus de la vaccinia parecía también haber quedado condenado a la extinción. Sin embargo, la comunidad científica se volvió a fijar en él a consecuencia del desarrollo de la tecnología del DNA recombinante, cuando surgió la posibilidad de romper la barrera genética de los organismos y se logró la recombinación de genomas de cualquier especie. Si el agente infeccioso no es patogénico y el gene proviene de otro agente que si lo es, entonces ese vector de expresión se puede utilizar con una vacuna prácticamente ideal, ya que puede inmunizar al sujeto contra ese patógeno, sin peligro para la salud. Uno de los más lógicos candidatos a servir como vector fue el virus de la vaccinia, debido a que sus cualidades inmunogénicas y de seguridad son excelentes ya que su genoma puede incorporar una cantidad importante de DNA, por lo menos 25,000 pares de bases, sin por ello perder su inefectividad. El virus de la vaccinia cuenta ahora con enormes posibilidades para continuarse usando, ya no como medida profiláctica, específica o no, sino como un vehículo seguro y eficiente de material genético de otros agentes infecciosos