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Real time polymerase chain reaction to diagnose Anaplasma marginale in cattle and deer (Ozotoceros bezoarticus leucogaster) of the Brazilian Pantanal
Picoloto, Graziela; Ferreira de Lima, Renileide; Andressa Oliveira Olegário, Lílian; Miranda Espínola Carvalho, Cristiano; Crystina Reis Lacerda, Ana; Moraes Tomás, Walfrido; André Lima Borges, Paulo; Oliveira Pellegrin, Aiesca; Roberto Madruga, Cláudio.
Afiliação
  • Picoloto, Graziela; Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Programa de Mestrado em Ciência Animal.
  • Ferreira de Lima, Renileide; Universidade Federal de Lavras Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia.
  • Andressa Oliveira Olegário, Lílian; Universidade Federal de Lavras Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia.
  • Miranda Espínola Carvalho, Cristiano; Universidade Católica Dom Bosco Programa de Mestrado em Biotecnologia.
  • Crystina Reis Lacerda, Ana; Universidade de Brasília Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal.
  • Moraes Tomás, Walfrido; Embrapa Pantanal Centro de Pesquisa Agropecuária do Pantanal.
  • André Lima Borges, Paulo; Embrapa Pantanal Centro de Pesquisa Agropecuária do Pantanal.
  • Oliveira Pellegrin, Aiesca; Embrapa Pantanal Centro de Pesquisa Agropecuária do Pantanal.
  • Roberto Madruga, Cláudio; Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Programa de Mestrado em Ciência Animal.
Article em En | VETINDEX | ID: vti-441856
Biblioteca responsável: BR68.1
ABSTRACT
Epizootiological study of Anaplasma marginale in regions that contain various reservoir hosts, co-existence of rickettsia pathogens, and common vectors is a complicated task. To achieve diagnosis of this rickettsia in cattle and campeiro deer of Brazilian Pantanal, a comparison was made between a real time polymerase chain reaction (RT-PCR) with intercalating Sybr Green fluorochrome and primers based on msp5 gene of A. marginale; a conventional PCR (C-PCR); and parasitological examination using thin blood smear stained with Giemsa-MayGrunwald. Both PCRs showed good performance in the diagnosis of A. marginale in cattle, and were superior to the parasitological exam. The RT-PCR detected seven positive campeiro deer (16.3%). This rate was significantly higher compared to C-PCR, which identified one animal as positive (2.3%), and also compared to parasitological diagnosis, which did not find any positive animals. The dissociation temperature average of positive reactions in cattle (81.72 ºC ± 0.20) was identical to dissociation temperature found in the cervids (81.72 ºC ± 0.12), suggesting that both animal species were infected with A. marginale. We concluded that RT-PCR can be used for A. marginale diagnosis and in epizootiological studies of cattle and cervids; in spite of the small number of campeiro deer samples, the results indicated that this wildlife species has importance in the Anaplasma epizootiology in the Brazilian Pantanal.
RESUMO
O estudo epizootiológico de Anaplasma marginale em regiões que existem vários reservatórios, co-existência de espécies de riquétsias patógenas e vetores comuns é uma tarefa complicada. Com o objetivo de obter o diagnóstico dessa riquétsia em bovinos e veado campeiro do Pantanal brasileiro foi avaliada uma reação da polimerase em cadeia em tempo real (PCR-TR) com o fluoróforo intercalante de fita dupla de DNA Sybr Green e iniciadores baseados na seqüência do gene msp5 de A. marginale comparando-a a uma PCR convencional (PCR-C) e ao exame parasitológico de esfregaço fino de sangue corado com Giemsa-MayGrunwald. Ambas PCRs apresentaram bom desempenho no diagnóstico de A. marginale nos bovinos, o qual foi superior ao exame parasitológico. O PCR-TR detectou sete veados campeiros positivos (16,3%), o que foi significativamente maior comparado ao PCR-C identificando um animal como positivo (2,3%), e ao exame parasitológico não encontrou nenhum animal positivo. A média da temperatura de dissociação das reações positivas para amostras de bovinos (81,72 ºC ± 0,20) foi idêntica àquelas dos cervídeos ( 81,72 ºC ± 0,12), o que sugere que ambas espécies animais foram infectadas por A. marginale. Concluímos que PCR-TR pode ser utilizada para diagnóstico e estudos epizootiológicos de A. marginale em bovinos e cervídeos. Apesar da pequena amostragem de veado campeiro os resultados indicam que essa espécie de animal selvagem tem importância na epizootiologia do Anaplasma no Pantanal brasileiro.
Palavras-chave
Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX País/Região como assunto: America do sul / Brasil Idioma: En Revista: R. bras. Parasitol. Vet. Ano de publicação: 2010 Tipo de documento: Article
Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX País/Região como assunto: America do sul / Brasil Idioma: En Revista: R. bras. Parasitol. Vet. Ano de publicação: 2010 Tipo de documento: Article