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Aldefluor protocol to sort keratinocytes stem cells from skin
Noronha, Samuel Marcos Ribeiro; Gragnani, Alfredo; Pereira, Thiago Antônio Calado; Correa, Silvana Aparecida Alves; Bonucci, Jessica; Ferreira, Lydia Masako.
Afiliação
  • Noronha, Samuel Marcos Ribeiro; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
  • Gragnani, Alfredo; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
  • Pereira, Thiago Antônio Calado; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
  • Correa, Silvana Aparecida Alves; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
  • Bonucci, Jessica; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
  • Ferreira, Lydia Masako; Universidade Federal de São Paulo. Divisão de Cirurgia Plástica. São Paulo. Brasil
Acta cir. bras. ; 32(11): 984-994, nov. 2017. tab, graf
Article em En | VETINDEX | ID: vti-728461
Biblioteca responsável: BR68.1
Localização: BR68.1
ABSTRACT

Purpose:

To investigate the use Aldefluor® and N, N - Dimethylaminobenzaldehyde (DEAB) to design a protocol to sort keratinocyte stem cells from cultured keratinocytes from burned patients.

Methods:

Activated Aldefluor® aliquots were prepared and maintained at temperature between 2 to 8°C, or stored at -20°C. Next, the cells were collected following the standard protocol of sample preparation.

Results:

Best results were obtained with Aldefluor® 1.5µl and DEAB 15 µl for 1 x 106 cells, incubated at 37°C for 15 minutes. Flow cytometer range for keratinocyte stem cells separation was evaluated. There were 14.8% of stem cells separated in one sample of keratinocyte culture used to pattern the protocol. After being defined the ideal concentration, the same test pattern was performed in other keratinocyte samples. We observed a final mean of 10.8%.

Conclusion:

Aldefluor® has been shown as a favorable marking of epidermal keratinocyte stem cells for subsequent separation on a flow cytometer, with detection of 10.8% of epidermal keratinocyte stem cells, in this protocol.(AU)
Assuntos
Palavras-chave

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Assunto principal: Queratinócitos / Aldeído Desidrogenase / Células-Tronco Adultas Limite: Humans Idioma: En Revista: Acta cir. bras. Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article / Project document

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Assunto principal: Queratinócitos / Aldeído Desidrogenase / Células-Tronco Adultas Limite: Humans Idioma: En Revista: Acta cir. bras. Ano de publicação: 2017 Tipo de documento: Article / Project document